用流式细胞仪检测各个象限的意义

作者&投稿:桂柴 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
我用流式细胞仪检测了CD4,CD8,图怎么看,各象限表示什么~

你的图呢,先贴一下图吧,不然只能猜了。

检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD3. 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),然后把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。分别代表CD4阳性,CD8阳性,双阳性,和无染色的。正常情况下,是不应该有双阳性和未染色的,也就是说你的细胞应该只显示在4个象限的其中的两个。其他的两个最多只是一些背景的杂信号。代表T细胞的两个亚群。


Q1:(AnnexinV-FITC)-/PI+,此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中,甚至机械损伤的细胞也包含其中。
Q2: (AnnexinV+FITC)+/PI+,此区域的细胞为晚期凋亡细胞。
Q3:(AnnexinV-FITC)+/PI-,此区域的细胞为早期凋亡细胞。
Q4:(AnnexinV-FITC)-/PI-,此区域的细胞为活细胞。

资料扩展:
细胞 (英文名:cell)并没有统一的定义,比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成,但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。
一般来说,细菌等绝大部分微生物以及原生动物由一个细胞组成,即单细胞生物,高等植物与高等动物则是多细胞生物。细胞可分为原核细胞、真核细胞两类,但也有人提出应分为三类,即把原属于原核细胞的古核细胞独立出来作为与之并列的一类。研究细胞的学科称为细胞生物学。
细胞体形极微,在显微镜下始能窥见,形状多种多样。主要由细胞核与细胞质构成,表面有细胞膜。高等植物细胞膜外有细胞壁,细胞质中常有质体,体内有叶绿体和液泡,还有线粒体。动物细胞无细胞壁,细胞质中常有中心体,而高等植物细胞中则无。

左下为正常细胞,左上为坏死细胞;右上为晚期凋亡细胞,右下为早期凋亡细胞。

检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD3. 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。

分别代表CD4阳性,CD8阳性,双阳性,和无染色的。正常情况下,是不应该有双阳性和未染色的,也就是说你的细胞应该只显示在4个象限的其中的两个。其他的两个最多只是一些背景的杂信号。代表T细胞的两个亚群。

流动室和液流系统

流动室由样品管、鞘液管和喷嘴等组成,常用光学玻璃、石英等透明、稳定的材料制作。设计和制作均很精细,是液流系统的心脏。样品管贮放样品,单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出;鞘液由鞘液管从四周流向喷孔,包围在样品外周后从喷嘴射出。为了保证液流是稳液,一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用,被检测细胞被限制在液流的轴线上。流动室上装有压电晶体,受到振荡信号可发生振动。

以上内容参考:百度百科-流式细胞仪



要看你是什么染料标记了例如临床上,最常用的荧光染料主要有三大种: FITC、PE和PeCy5。肉眼观察,FITC为绿色;PE为橙色; PeCy5为红色。它们都在488纳米被激发。检测波长分别是:FITC是525纳米;PE是575纳米;PeCy5是675纳米。实际上,荧光的变化是在一个范围内。这时候,荧光之间有可能重叠,需要进行荧光补偿的调节。所以可以看到,例如FITC和PE、PI,它们发出的波长有交叉,要想检测FITC,需要把PE和PI的信号去掉,也就是荧光补偿需要调节的意义。在临床上也是常常用两种荧光染料直接染色细胞,从而可以得到细胞更多的信息。例如在检测B细胞和T细胞的时候,可以用CD3和CD19同时加在试剂,可以同时与细胞进行孵育。我们将CD3标记成FITC,CD19标记成PE。有的淋巴细胞只表达CD3,有的细胞表达CD19;这样,我们就可以检测到CD3阳CD19阴的细胞就是T淋巴细胞;而CD3阴CD19阳的细胞就是B淋巴细胞。这样我们能够得到更有效的数据分析。

左下为正常细胞,左上为坏死细胞;右上为晚期凋亡细胞,右下为早期凋亡细胞。


流式细胞仪检测原理
流式细胞仪检测原理 流式细胞仪是一种集光学、流体力学、电力学和计算机技术于一体,可对细胞进行多参数定量测定和综合分析的方法。其检测原理主要包含以下几个方面:一、光学检测原理 流式细胞仪通过光学系统检测细胞的大小和内部结构。当细胞通过激光束时,激光束会照射细胞,产生散射光信号。这些散射光...

贝克曼流式细胞仪在实验室主要用于哪些检测?
贝克曼流式细胞仪是一种检测细胞表面分子和细胞内部结构的仪器,主要用于淋巴细胞亚群分析及绝对计数、HLA-B27的检测(强制性脊柱炎)以及血液病\/淋巴瘤的免疫分型。除了中心实验室及检验科以外,应用的临床科室主要集中在血液科、肿瘤科等。此外,疾控系统也应用于HIV监测 。

流式细胞空白对照 阴性对照 阳性对照分别加什么东西,各自用来做什么_百 ...
流式细胞仪检测的是相对值,所以必须要有各种对照来设定机器的参数和阈值。这个清单比较长。就你说的这三种,我可以展开说一下。一般用荧光标记的抗体染色后,样本有可能会出现两个细胞群,一个阳性,一个阴性的,这样的很好判断。另外一种情况,就是整个细胞群的信号在染色后发生了漂移,但是看不出阳性...

流式细胞仪原理
PMT)将信号放大,转变为电信号后由计算机系统进行分析.流式细胞仪的检测范围:细胞结构:细胞大小,细胞颗粒度,DNA含量与细胞周期,RNA含量,蛋白质含量等等;细胞功能: 细胞表面\/胞浆\/核的特异性抗原,细胞活性,细胞内\/外的细胞因子,激素结合位点, 细胞受体,钙离子浓度,线粒体膜电位,等等 ...

流式细胞仪检测CD3、CD3CD4高CD8正常CD19低怎么回事
CD19 是B细胞表面抗原。而CD3, 4, 8是T细胞标志。CD8是细胞毒T细胞,CD4是Th细胞。这个结果说明你的免疫细胞计数出了问题。具体是什么原因导致的,要进一步的检查

用流式细胞仪检测各个象限的意义
左上象限为坏死细胞,左下象限为正常细胞,右上象限为早期凋亡细胞,右下象限为晚期凋亡细胞。

流式细胞的每一组试验都要设置阴性对照和检测对照么
因为流式细胞仪检测的是相对信号的强弱,所以,每一组都要有对照。每一种抗体也都要有非特异性抗体作为对照

流式细胞仪的各个通道都有什么作用,分别对应什么参数呢???
流式细胞仪(Flow cytometry )是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总...

流式细胞仪可以检测外周血IgG4吗
理论上是可以的。原理和检测细胞因子相同。BEADS 为基础的MULIPEX检测。一下子可以同时测很多个目标。如果你只测一个IGG4,成本太高了,比如用ELISA.

流式细胞仪是否能检测细菌(支原体)的大小
这个不太可能吧 流式细胞计可同时进行多参数测量,信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号 流式细胞仪的应用 1.分析细胞表面标志 2.分析细胞内抗原物质 3.分析细胞受体 4.分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量 5.分析免疫细胞的功能 至于测大小。。用显微镜就好了啊 ...

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