流式细胞仪凋亡图解读
用流式细胞仪检测各个象限的意义
左上象限为坏死细胞，左下象限为正常细胞，右上象限为早期凋亡细胞，右下象限为晚期凋亡细胞。
流式细胞仪 FITC-PI双染HEK293T细胞 空白组细胞凋亡率很高
第一，贴壁培养的细胞要处理的非常轻柔，不然会导致大量假阳性（Annexin V 阳性）。这个方法最好是由于悬浮培养的，比如淋巴细胞 第二，从图上看，你的电压设置的过低，第一个图阴性无染色的细胞都被压倒一起，而不是位于左下象限的中间。另外，你的阳性对照的细胞，用的是已知确定凋亡死亡的细胞吗？
hochest33258法检测细胞凋亡该怎么分析
离心弃染液， PBS重悬；（4）加入PI染液，使其终浓度为5mg\/ml，冰浴；（5）离心弃染液，PBS洗一次，进行流式细胞仪进行分析，、直外激光检测记录400~500nm处蓝色荧光和大于630nm处红色荧光；【结果判断】正常对照细胞呈弱蓝色及弱红色荧光；凋亡细胞呈蓝色及弱红色荧光，坏死细胞呈强红色及弱蓝色。
PC12细胞活力及凋亡检测方法(MTT、流式、细胞爬片HE、免疫组化protocol...
当进行检测前，将细胞传代至96孔或6孔培养板，以便于后续的MTT和流式细胞仪实验。细胞活力与凋亡检测 MTT活力评估<\/: 100 μl细胞接种在96孔板中，待孵育后，通过测量吸光值计算细胞存活率，揭示细胞活力。 流式细胞仪凋亡分析<\/: 在6孔板中接种细胞，观察并区分活细胞、早期凋亡等不同阶段，...
细胞凋亡的检测
凋亡细胞中,因线粒体穿膜电位的改变,它以单体形式存在于细胞液中,发出绿色荧光。用荧光显微镜或流式细胞仪可清楚地分辨这两种不同的荧光信号。CLONTECH公司的ApoAlert Mitochondrial Membrane Sensor Kit就采用这种原理来检测线粒体膜电位的变化。但是,这种方法不能区分细胞凋亡或其他原因导致的线粒体膜电位的变化。
线粒体膜电位检测详细过程
2. 设置阳性对照，使用CCCP处理细胞，观察线粒体膜电位变化。3. 对悬浮细胞和贴壁细胞进行染色、培养和离心，最终使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计或流式细胞仪检测线粒体膜电位。检测结果通过荧光强度变化判断线粒体膜电位状态，出现绿色荧光表示线粒体膜电位下降，可能处于细胞凋亡早期；...
细胞凋亡检测方法汇总
操作步骤简单，首先将细胞收集并预处理，之后使用特定染色试剂进行细胞标记。之后，通过流式细胞仪分析细胞标记情况。实验中需设置对照组，包括空白对照、单染对照、阳性对照和阴性对照，以确保实验结果的准确性。在结果分析中，横坐标表示Annexin V强度，纵坐标表示PI强度。依据对照比较结果，可准确判断细胞的...
请问流式细胞仪检测细胞凋亡的原理是什么?
因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素（EGFP、FITC）标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过...
流式细胞术检测细胞周期和凋亡
消化结束后，加入含血清的培养基终止胰酶消化，并将细胞重悬转移至离心管中。接着进行离心，去除上清，加入75%酒精重悬固定细胞，放入4℃冰箱中固定过夜。再次离心，去除上清，加入PBS洗3次，加入PI染色液，37℃染色30min。最后，将细胞上流式细胞仪检测。细胞凋亡检测：细胞凋亡的早期就有细胞膜表面破损...
流式细胞仪检测细胞凋亡中Pl 染液是什么
或者坏死，或者人为因素，比如胰酶消化，吹打，刮取等等操作，损伤了细胞膜。这样的细胞就会被染色了。所以PI本身并不是一个用来显示凋亡的特异性的染料。假阳性很多。一般最多用来做初步筛选，如果要确认确实是凋亡的话，需要其他方法。PI的目的就是判断细胞膜的损伤，和凋亡并不是对应关系。
台山市亚斯回答： 已经做完流式,看到结果却不知该怎样分析了.我用的是AnnexinV-FITC 凋亡试剂盒 ,AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡.请教各位,凋亡散点图中第1,2,4象限到底分别代表什么细胞?手里的资料说法都不相同.试剂盒说明书:1代表细胞收集过...
太茂18819382322问： 流式细胞测凋亡率.数据中哪个代表凋亡率?本人菜鸟一枚,完全不懂,这个图是啥意思啊?P1 P2 P3 分别代表什么? - ？
台山市亚斯回答：[答案] 你做的是annexin V 和PI双染吧. FITC代表的是annexin V 染色, 代表早期凋亡,PI 单染,代表死亡的细胞,双染阳性的是正在凋亡的细胞. 所以,Q2+ Q4就是所有凋亡的细胞
太茂18819382322问： 流式细胞测凋亡散点图分析求助 - ？
台山市亚斯回答： 在二维散点图上, PI 和 annexin V 分别是X和Y轴.一般认为PI 单染的细胞是已经死亡的细胞,annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞,而双染是凋亡中期的. 你需要在散点图上先画出4个象限,位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限.
太茂18819382322问： 如何分析流式细胞结果分析凋亡二维点图 - ？
台山市亚斯回答： 流式细胞仪(Flow cytometer )是对细胞进行自动分析和分选的装置.它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来.多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指标,而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少.也就是说,它的细节 分辨率为零.
太茂18819382322问： 流式细胞仪检测细胞凋亡结果该怎样分析 - ？
台山市亚斯回答： 第一,要保证有正确的对照组 第二,要保证操作正确 第三,把你的结果贴上来,才好分析啊
太茂18819382322问： 流式细胞测凋亡率.数据中哪个代表凋亡率?？
台山市亚斯回答： 你做的是annexin V 和PI双染吧. FITC代表的是annexin V 染色, 代表早期凋亡,PI 单染,代表死亡的细胞,双染阳性的是正在凋亡的细胞. 所以,Q2+ Q4就是所有凋亡的细胞
太茂18819382322问： 请问流式细胞仪检测细胞凋亡的原理是什么? - ？
台山市亚斯回答： 一、原理 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧.Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高...
太茂18819382322问： 流式细胞仪的FSC,SSC图,侧向发散和向前发散分别代表什么意思请问流式细胞仪的图侧向发散是代表胞内物质发生改变吗? 是不是对细胞有害呢? - ？
台山市亚斯回答：[答案] SSC增加,这个只能说是细胞内的折光性物质增加,并不一定就是有害的,也可能是有益的. FSC增加,说明细胞的体积增大
太茂18819382322问： 流式细胞仪检测细胞凋亡,单染可以检测出细胞凋亡率吗? - ？
台山市亚斯回答： 用PI单染就可以,PI是用来测细胞周期的,在单倍体峰前如果有个亚峰则表明有凋亡,但是这个方法不是很好,坏死细胞也会包含在内.准确地说用PI单染测出的凋亡率应该是死亡细胞占细胞总数的比例.建议用AnexinV和PI双染,PI阴性和AnexinV阳性区是真正凋亡的细胞.细胞早期凋亡时,内膜外翻,位于胞浆的磷脂酰丝氨酸转位至细胞表面,FITC标记的Anexin V能与其结合,而坏死细胞不具有该特点.
太茂18819382322问： 流式细胞仪直方图图解左图和右图对应的,请问这个怎么理解啊? - ？
台山市亚斯回答：[答案] 这不是流式的图.你看横坐标表示的是荧光强度,纵坐标是标准化后的像素的计数.是对左侧细胞荧光显微镜图像的定量.两个峰分别代表的是两种荧光的强度分布.有颜色的那个图像是2种荧光人工叠加的效果图.
