流式细胞仪测凋亡原理

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如何用流式检测小鼠外周血中T细胞的凋亡
用500μl PBS悬浮细胞,用流式细胞仪检测CD16 标记率。4 中性粒细胞功能测定  佛波醇酯(PMA,Sigma产品,用DMSO溶解,配制成1mg\/ml,储存于-20℃,临用前稀释)能激活中性粒细胞,使之释放活性氧,其中O-2*和H2O2能与化学发光剂Luminol(3-氨基苯二甲酰肼,北京化工厂)反应而发光。用LKB-1250...

bd的流式细胞仪器测凋亡怎么操作
检测凋亡的流式方法很多,就算是BD的机子,型号也很多,所以操作差别很大。不过原则都是一样的。先用未染色的细胞设置gate,然后根据染色的强弱,来判断凋亡的多少 以下是目前常用的流式细胞仪检测凋亡的方法,你根据自己试验细胞的不同来选取:

检测细胞凋亡AV-PI双染的具体步骤是怎样的?注意事项有哪些?
除了上述的操作步骤,还有一个必须注意的,就是对照。阴性对照,阳性对照,还有调节通道的,只加PI,只加AV,这些都要设计好,要不测出来的值不可信。细胞接种后,每日计数细胞数,连续观察7-10日,在对数坐标纸上绘制细胞生长曲线,确定曲线基本呈水平的部分即为指数生长期(一般在2-6日)。 各种...

求细胞凋亡的一些系统的检测方法,最好全!谢了!
用Annexin V-EGFP和PI染色后,正常的活细胞不被Annexin V-EGFP和PI着色;凋亡早期的细胞仅被Annexin V-EGFP着色,PI 染色呈阴性;坏死细胞和凋亡晚期的细胞可以同时被Annexin V-EGFP和PI着色。用流式细胞仪或荧光显微镜直接观察PS外翻这一细胞凋亡的重要特征,是一种快速简便的细胞凋亡经典检方法。操作...

用流式细胞仪检测各个象限的意义
单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出;鞘液由鞘液管从四周流向喷孔,包围在样品外周后从喷嘴射出。为了保证液流是稳液,一般限制液流速度υ<10m\/s。由于鞘液的作用,被检测细胞被限制在液流的轴线上。流动室上装有压电晶体,受到振荡信号可发生振动。以上内容参考:百度百科-流式细胞仪 ...

dapi染色原理
显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞,荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100%)。DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟,在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。

请告诉我判断细胞死活的方法。
2 仪器分析法 可采用微电极技术(利用死活细胞膜两侧电位的差异)、全自动分析细胞记数仪和流式细胞仪等,可对细胞的死活进行精确的批量检测。德国INNOVATIS出产的全自动Cedex细胞存活率\/细胞计数仪\/细胞分析仪是世界上第一台高分辨率、高清晰度扫描(专利)细胞分析仪,具有全自动台盼蓝染色、显微CCD成象...

流式细胞仪检测细胞凋亡方法细胞怎么处理
流式细胞仪检测细胞凋亡方法细胞怎么处理 目的利用流式细胞检测技术,通过不同的方法检测经过凋亡诱导剂处理后的细胞的凋亡水平,探讨流式细胞仪在细胞凋亡检测方面的应用,为基础研究和临床应用提供指导依据

IC50的检测方法
部分二:确定IC50IC50通过比较对照组与实验组的吸光度变化计算,等于使细胞存活率减半所需的药物浓度。可以使用改良寇式法或Excel、Graphpad等软件中的回归分析,找到化合物浓度与抑制率的直线关系,计算出IC50值为2.53。部分三:流式细胞仪检测凋亡通过Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒,处理细胞后进行细胞消化...

PI染色流式细胞仪结果图分析,只是看细胞凋亡,多谢
这个实验有几个问题:在FSC SSC这个图上没有看到明显的细胞群,有可能是PMT电压没有设置好,或者是细胞因为处理的太过,都死了,成为碎片。第二个图的PI染色,既然你说是要做凋亡检测,目前PI单染看凋亡,只有是测sub G1期。这个横坐标应该设为线性而不是对数。所以说你整个实验都设置错了。只有...

揣保19299124828问: 请问流式细胞仪检测细胞凋亡的原理是什么? -
戚墅堰区参柴回答: 一、原理 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧.Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高...

揣保19299124828问: 流式细胞仪的原理是什么? -
戚墅堰区参柴回答: 流式细胞仪(flow cytometer,FCM)是进行流式细胞分析的仪器,它集电子技术、计算机技术、激光技术、流体理论、细胞荧光化学技术及单克隆抗体技术于一体,被誉为实验室的“CT”. 流式细胞术则是一种在功能水平上对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析和分选的检测技术,它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术.自1969年第1台流式细胞仪问世,流式细胞术已经发展成为日益完善的细胞分选和分析技术. 生物帮上面有更加详细的介绍,sds-page视频 http://v.bio1000.com/show-844.html

揣保19299124828问: 流式细胞仪的原理和操作过程 -
戚墅堰区参柴回答: 原理: 流式细胞仪可同时进行多参数测量,信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号.测量是在测量区进行的,所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点.液流中央的单个细胞通过测量区时,受到激光照射会向立体角...

揣保19299124828问: 细胞凋亡的早期检测方法有哪些 -
戚墅堰区参柴回答: 1、PS(磷脂酰丝氨酸)在胞外膜分布的检测 PS从胞膜内侧转移到外侧现象是在细胞凋亡的早期即可发生标志.AnnexinV是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在胞膜外侧的PS,使用荧光素标记的AnnexinV 蛋白(如Annexin ...

揣保19299124828问: 请问一下用流式细胞仪检测细胞凋亡的试验中,为什么要用PBS洗涤两次呢?用PBS洗涤的原理是什么呢? -
戚墅堰区参柴回答: PBS是一种缓冲液,他的渗透压与一般细胞的相同,在做细胞试验或者活体组织实验中,一般就把PBS当做水来用,各种冲洗的过程什么的都是用它.这样不会改变细胞形态~

揣保19299124828问: 细胞凋亡常用的检测方法有哪些?
戚墅堰区参柴回答:1 光学显微镜和倒置显微镜 (1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体. 贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落. (2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割 成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态. 生物帮上面有这方面的专业介绍, http://www.bio1000.com/zt/product/357940.html bd流流式细胞仪,流式细胞仪原理,流式细胞仪,流式细胞仪的用途

揣保19299124828问: 式细胞是能不能对同一个样品测细胞周期又测细胞凋亡 -
戚墅堰区参柴回答: 因为是诱导凋亡的实验,细胞加药处理后,贴壁细胞会因为活力丧失而脱壁漂浮,而这部分细胞正是你需要的,所以加药处理完后要收集全部培养上清,少量PBS洗瓶内剩下的细胞,洗的PBS与之前收集的上清合并.胰酶消化.消化完毕用之前收集的培养基中止消化.离心后PBS再洗一遍.离心,弃上清,细胞沉淀中加入70% 4度预冷的乙醇(PBS配制),4度放置不少于1小时(有的文献说是不少于15分钟).之后离心去乙醇,PBS洗一遍后加入PI和DNAse,终浓度50 ug/ml,混匀,避光室温放置30 min后即可上流式细胞仪测定.

揣保19299124828问: 医学常识中流式细胞仪的基本工作原理是什么?医学常识中流式细胞仪的
戚墅堰区参柴回答: 按检测需要标记了特异性荧光染料的单细胞和鞘液,分别经硅化管进入流式室,形成鞘液包裹细胞悬液的稳态单细胞液柱.该液柱以稳定的层流形式通过喷嘴高速射下,液柱与水平方向的高度聚焦的激光束垂直相交,单个细胞上标记的荧光染料在通过激光光斑时被激发而产生特异性荧光.同时,由于混合细胞群中细胞大小和胞内颗粒的多少会被激发而产生不同的散射光.仪器有荧光检测系统和散射光感受系统,用于收集荧光信号和散射光信号.被接受的光电信号转换成电压脉冲和积分脉冲,使信号放大,该信号进入计算机系统进行数据转换、分析、处理.

揣保19299124828问: 流式细胞测凋亡率.数据中哪个代表凋亡率?本人菜鸟一枚,完全不懂,这个图是啥意思啊?P1 P2 P3 分别代表什么? -
戚墅堰区参柴回答:[答案] 你做的是annexin V 和PI双染吧. FITC代表的是annexin V 染色, 代表早期凋亡,PI 单染,代表死亡的细胞,双染阳性的是正在凋亡的细胞. 所以,Q2+ Q4就是所有凋亡的细胞

揣保19299124828问: 流式细胞仪检测细胞凋亡的几种方法的比较 -
戚墅堰区参柴回答: 目的:探索运用流式细胞仪来检测细胞凋亡的方法.方法:采用流式细胞仪对DNA含量、磷脂酰丝氨酸、线粒体膜电位、钙离子浓度的检测,分析细胞凋亡情况.结果:DNA含量测定存在一定误差;磷脂酰丝氨酸测定能准确反映细胞早晚期凋亡情况;线粒体膜电位、钙离子浓度测定能准确反映凋亡细胞的生理指标,如果结合形态学分析将更为客观.结论:通过比较实验方法,为将来采用流式细胞仪检测细胞凋亡提供更准确的实验方法.


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