什么是hat选择培养基
什么是HAT培养基
HAT选择性培养基是根据次黄嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成途径设计的。缺失这两种酶的细胞,在HAT培养基中,应该不能生存,只有发生融合或者其他情况下,才能是细胞重新获得用旁路途径进行DNA合成能力。
HAT培养基是什么培养基
HAT选择培养基的作用是筛选出(杂交瘤细胞)HAT系次黄嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶呤(aminopterin)和胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidin)三种物质各英文首字之缀列,HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。对具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在细胞内具有起始合成途径(de novo pathway)和中间合成途...
hat和ht培养基区别
1、全称不同:HAT培养基的全称为Hypoxanthine-Aminopterin-Thymidine培养基,是一种选择性培养基;而HT培养基的全称为High-Temperature培养基,是一种高温培养基。2、用途不同:HAT培养基主要用于细胞培养中的细胞融合实验,可以选择性地杀死未融合的细胞,使融合细胞能够生长;而HT培养基主要用于调整菌株的...
简述HAT选择培养液在制备B淋巴细胞杂交瘤中的作用及其机制。_百度知 ...
【答案】:HAT培养液的作用是用于选择杂交瘤细胞。机制在于:①正常细胞合成DNA有两条途径,一是主要合成途径,二是应急合成途径,氨基蝶呤可阻断主要合成途径,当主要合成途径被阻断时,细胞可用次黄嘌呤合成嘌呤核苷酸,利用胸腺嘧啶合成嘧啶核苷酸而继续合成DNA;②HAT培养液含次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)...
hat培养基中字母h,a,t分别代表什么和什么作用
HAT(H—Hypoxanthine次黄嘌呤,A—Aminopterin甲氨喋呤,T——Thymidine胸腺嘧啶核苷)培养基的选择培养。由于氨基蝶呤可阻碍起始合成途径,所以培养基中含有它时,细胞便只有中间合成途径,所以必须供给核苷酸。至于缺失中间合成途径的细胞,可失去增殖能力臻于死亡。根据这一点,不仅把混存于细胞群中的正常...
HAT 的选择原理
因此自身没有S途径,且D途径又被氨基蝶呤阻断,所有在HAT培养液中也不能增殖而很快死亡。只有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞,既具有效应B细胞的S途径,又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性,因此能在HAT培养液中选择性存活下来,并不断增殖。
HAT培养基是什么培养基
HPRT)或胸苷激酶(TK)活性缺陷细胞的培养基.是含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)和甘氨酸的完全培养基.在氨基蝶呤(二氢叶酸类似物)存在下,这种酶缺陷的细胞不能通过核苷酸合成旁路合成次黄嘌呤和胸苷.HPRT和TK缺陷细胞可以在此培养基中生存.是常用的骨髓杂交瘤细胞选择性培养基.
用杂交瘤技术制备单克隆抗体的过程中,可在HAT选择培养基长期存活...
【答案】:C HAT选择培养基含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶,其中氨基蝶呤可阻断DNA合成的主要途径。主要途径阻断后,依靠应急途径即在HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)和TK(胸苷激酶)作用下,利用胸腺嘧啶和次黄嘌呤合成DNA,缺少其中一种,DNA合成不能发生。由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的...
HAT medium HAT培养基
通常只有一部分骨髓瘤细胞融合成为杂交瘤细胞。因此必须设法把杂交瘤细胞从未融合的细胞中筛选出来。目前通用的办法是利用次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型(HGPRT)和胸腺核苷激酶缺陷型(TK)骨髓瘤细胞株,这两种缺陷型细胞在HAT选择培养基中不能存活,而被淘汰。选择培养基对淋巴细胞无效,但淋巴细胞在...
什么是HAT?他和单克隆抗体技术有什么关系?
1.按常规取免疫小鼠脾细胞与SP2\/0小鼠骨髓瘤细胞,在50%聚乙二醇作用下融合,以含20%小牛血清的HAT选择性培养基培养;2.ELISA间接法筛选能分泌抗体的杂交瘤细胞孔,选取OD值最大的阳性孔细胞,予以有限稀释克隆化培养,直到克隆化细胞抗体阳性率为100%;3.将最后选出的阳性单克隆细胞将扩大培养,接种...
乾安县蓉生回答:[答案] 用于筛选具有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)或胸苷激酶(TK)活性缺陷细胞的培养基.是含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)和甘氨酸的完全培养基.在氨基蝶呤(二氢叶酸类似物)存在下,这种酶缺陷的细胞不能通过核苷酸合...
捷枝15844072622问: HAT选择培养基的作用是筛选出什么(在单克隆抗体制备过程中). - ?
乾安县蓉生回答:[答案] HAT选择培养基的作用是筛选出(杂交瘤细胞).HAT选择培养基含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶,其中氨基喋呤可阻断DNA合成的主要途径.主要途径阻断后,依靠应急途径即在HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)和TK(胸...
捷枝15844072622问: HAT选择培养基 - ?
乾安县蓉生回答: 是用来培养微生物的,化学成分那得要看你想要培养什么微生物了
捷枝15844072622问: 什么是HAT?他和单克隆抗体技术有什么关系? - ?
乾安县蓉生回答: HAT系次黄嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶呤(aminopterin)和胸腺嘧啶脱氧核苷(thymidin)三种物质各英文首字之缀列,HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基.对具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在细胞内具有起始合成途径...
捷枝15844072622问: HAT培养基是什么培养基? - ?
乾安县蓉生回答: 用于筛选具有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)或胸苷激酶(TK)活性缺陷细胞的培养基.是含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)和甘氨酸的完全培养基.在氨基蝶呤(二氢叶酸类似物)存在下,这种酶缺陷的细胞不能通过核苷酸合成旁路合成次黄嘌呤和胸苷.HPRT和TK缺陷细胞可以在此培养基中生存.是常用的骨髓杂交瘤细胞选择性培养基.
捷枝15844072622问: 杂交瘤细胞怎么筛选分离方法 - ?
乾安县蓉生回答: 利用选择性培养基hat筛选hat培养基,用次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)配置,其中氨基蝶呤(A)能阻断dna合成的主要途径,而用于杂交的瘤细胞都是次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)或胸苷激酶(TK)活性缺陷细胞,而脾细胞中有这种酶,所以骨髓瘤细胞和瘤-瘤细胞会无法合成dna死去,而脾细胞和脾-脾都知道会无法无限长时间存活而死去,希望对你有帮助
捷枝15844072622问: 脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么? - ?
乾安县蓉生回答: 放在选择性培养基上培养..杂交到的细胞有 3种 脾细胞和脾细胞, 脾细胞和瘤细胞, 瘤细胞和瘤细胞.3种 ..放在选择性培养基上连续培养. 比如说有什么脾细胞可以分泌出抗体那种抗原的物质...而其他细胞不能够抵抗..脾细胞和脾细胞 一般不会培养到50代..就会死了..放在选择性培养基上的瘤细胞和瘤细胞 没有相应的抗体 所以自动被消灭掉..脾细胞和瘤细胞..因为具有无限繁殖和有抗体产生 所以能够存活.存活下来的 就是合格的杂交瘤细胞.. 一般筛选2次...