细菌总数检查时细菌一般以多少小时的菌落数报告

细菌总数检查时细菌一般以多少小时的菌落数报告~

国标是48h

一、菌落总数介绍：

菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。

菌落总数就是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等）每克（每毫升）检样所生长出来的细菌菌落总数。按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。

菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。


二、检验方法

菌落总数的测定，一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。

基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告。

国内外菌落总数测定方法基本一致，从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同，只是在某些具体要求方面稍有差别，如有的国家在样品稀释和倾注培养进，对吸管内液体的流速，稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。

检验方法参见：
GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定》
SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品菌落计数》


三、说明

（一）样品的处理和稀释：

1．操作方法：以无菌操作取检样25g（或25ml)，放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内，经充分振要或研磨制成1：10的均匀稀释液。

固体检样在加入稀释液后，最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min，制成1：10的均匀稀释液。

用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。

另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。

2．无菌操作：操作中必须有“无菌操作”的概念，所用玻璃器皿必须是完全灭菌的，不得残留有细菌或抑菌物质。所用剪刀、镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装，应用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。

操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15分钟，每个平板不得超过15个菌落。

3．采样的代表性：如系固体样品，取样时不应集中一点，宜多采几个部位。固体样品必须经过均质或研磨，液体样品须经过振摇，以获得均匀稀释液。

4．样品稀释误差：为减少样品稀释误差，在连续递次稀释时，每一稀释液应充分振摇，使其均匀，同时每一稀释度应更换一支吸管。

在进行连续稀释时，应将吸管内液体沿管壁流入，勿使吸管尖端伸入稀释液内，以免吸管外部粘附的检液溶于其内。

为减少稀释误差，SN标准采用取10mL稀释液，注入90mL缓冲液中。

5．稀释液：样品稀释液主要是灭菌生理盐水，有的采用磷酸盐缓冲液（或0.1％蛋白胨水），后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食品（如酱油）进行稀释，可以采用灭菌蒸馏水。

（二）倾注培养

1．操作方法：根据标准要求或对污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度，分别在制10倍递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。

将凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml，并转动平皿，混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。

待琼脂凝固后，翻转平板，置36±1℃温箱内培养48±2h，取出计算平板内菌落数目，乘以稀释倍数，即得每克（每毫升）样品所含菌落总数。

2．倾注用培养基应在46℃水浴内保温，温度过高会影响细菌生长，过低琼脂易于凝因而不能与菌液充分混匀。如无水浴，应以皮肤感受较热而不烫为宜。

倾注培养基的量规定不一，从12~20ml不等，一般以15ml较为适宜，平板过厚可影响观察，太薄又易于干裂。倾注时，培基底部如有沉淀物，应将底部弃去，以免与菌落混淆而影响计数观察。

3．为使菌落能在平板上均匀分布，检液加入平皿后，应尽快倾注培养基并旋转混匀，可正反两个方向旋转，检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过20min，以防止细菌有所死亡或繁殖。。

4．培养温度一般为37℃（水产品的培养温度，由于其生活环境水温较低，故多采用30℃）。培养时间一般为48h，有些方法只要求24h的培养即可计数。培养箱应保持一定的湿度，琼脂平板培养48h后，培养基失重不应超过15％。

5．为了避免食品中的微小颗粒或培基中的杂质与细菌菌落发生混淆，不易分辨，可同时作一稀释液与琼脂培基混合的平板，不经培养，而于4℃环境中放置，以便计数时作对照观察。

在某些场合，为了防止食品颗粒与菌落混淆不清，可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC），培养后菌落呈红色，易于分别。

（三）计数和报告

1．操作方法：培养到时间后，计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数，计算处原始样品中每克（或每ml）中的菌落数，进行报告。

2．到达规定培养时间，应立即计数。如果不能立即计数，应将平板放置于0－4℃，但不得超过24h。

3．计数时应选取菌落数在30~300之间的平板（SN标准要求为25~250个菌落），若有二个稀释度均在30~300之间时，按国家标准方法要求应以二者比值决定，比值小于或等于2取平均数，比值大于2则其较小数字（有的规定不考虑其比值大小，均以平均数报告）。

4．若所有稀释度均不在计数区间。如均大于300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如均小于30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告之。如菌落数有的大于300，有的又小于30，但均不在30~300之间，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如所有稀释度均无菌落生长，则应按小于1乘以最低稀释倍数报告之。有的规定对上述几种情况计算出的菌落数按估算值报告。

5．不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比（同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近），即稀释倍数愈高菌落数愈少，稀释倍数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象，则应视为检验中的差错（有的食品有时可能出现逆反现象，如酸性饮料等），不应作为检样计数报告的依据。

6．当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开计数。如有片状菌落生长，该平板一般不宜采用，如片状菌落不到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘2代表全平板的菌落数。

7．当计数平板内的菌落数过多（即所有稀释度均大于300时），但分布很均匀，可取平板的一半或1/4计数。再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。

8．菌落数的报告，按国家标准方法规定菌落数在1~100时，按实有数字报告，如大于100时，则报告前面两位有效数字，第三位数按四舍五入计算。固体检样以克（g)为单位报告，液体检样以毫升（ml）为单位报告，表面涂擦则以平方厘米（cm2）报告。

按国标规定培养48正负2小时的时候报告

国标应该是72小时的数吧!

菌落总数：48h±2h
霉菌及酵母菌总数：72h±2h

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赫山区15028183241： 细菌总数是怎么检验的? - ？
鱼秀核酪： 细菌总数是水质参数之一,指单位体积水中的细菌总量.其检验方法是:在玻璃平皿内,接种一毫升水样或稀释水样于加热液化的营养琼脂培养基中,冷却凝固后在37°C培养24小时,培养基上的菌落数或乘以水样的稀释倍数即为细菌总数.有...

赫山区15028183241： 细菌总数怎么检测? - ？
鱼秀核酪： 一般有两种方法,一种是比较泛泛而谈的,就是测一下菌液的OD600,大致获得细菌的生长数量,比如OD600=1.0时,标准菌株的细菌数是10^9个/mL.第二种就是比较精确的,也就是平板计数,这是最基本的,把菌液稀释以后,涂布于平板培养基上,培养18-24小时以后,菌落计数,再乘以你的稀释倍数,就能得到原菌液的细菌数

赫山区15028183241： 统计菌落数时每隔多少时间统计一次 - ？
鱼秀核酪： 菌落总数计数并不是每过一段时间统计一次,而是培养到既定时间后进行计数并报告结果.一般来说,细菌菌落总数需要培养48小时,霉菌菌落总数需要培养7天.

赫山区15028183241： 细菌总数和菌落总数是怎么样测定的? - ？
鱼秀核酪： 一、菌落总数介绍: 菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成.当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形...

赫山区15028183241： 纯净水的大肠菌群的检测方法 - ？
鱼秀核酪： 2.7细菌总数:(详见卫标) 2.7.1方法:以无菌操作方法用已灭菌过1 ml吸管,吸取已摇匀的水样1 ml注入已经过121℃20分钟灭菌的90ml生理盐水的三角烧瓶中,摇匀,称1:10的供试液.另取灭菌吸管1支,从三角烧瓶分别吸取为1:10的供试液1 ml注入经160℃2小时灭菌平皿中(共注三个平皿).然后各平皿倒入已灭菌熔化的肉汤琼脂培养基约15ml,摇匀.另再倒空白平皿,作对照.待冷却凝固后,翻转平皿(底朝上)置36.5℃恒温培养箱内培养48小时后进行细菌计数. 2.7.2细菌计数: 将三个平皿中的平均菌落数,以稀释度的选择乘以其稀释倍数,即为水样的细菌总数. 一般都是检测细菌总数的!

赫山区15028183241： 液体如何测定细菌总数 - ？
鱼秀核酪： 不同的水是有不同的检测标准的. 如果是生活饮用水,则应该按照国家标准GB/T5750.12-2006上面的方法进行检测. 简单地说,就是吸取1ml水样注入无菌平皿中(如果水样比较脏,则需要做10倍、100倍……稀释),然后倾注灭菌好的并冷却到45度左右的营养琼脂15ml左右,经过48h培养,计算所生长的菌落总数,即为测得的每毫升菌落数(稀释者需要乘以稀释倍数). 具体您应该看标准GB/T5750.12-2006

赫山区15028183241： 1.细菌的数量以每小时2倍的数量增长,多少时间后将增长十倍 - ？
鱼秀核酪： 1、细菌的数量以每小时2倍的数量增长,那1个小时后就是原来的2倍,2个小时后就是原来的4倍,3个小时后就是原来的8倍,4个小时后就是原来的16倍,也就是说,3小时后再稍微等一会儿就将增长十倍,明白了吗? 2、每过80分钟变为原来的2倍,过两个80分钟就是原来的4倍,过6个80分钟是原来的64倍,过7个80分钟是原来的128倍,所以大约过500分钟就是原来的100倍.

赫山区15028183241： 初始污染菌检测周期 - ？
鱼秀核酪： 您好,一般培养48±2h.标准如下:1.目的 测定样品细菌总数可用来判明样品细菌污染的程度,以及生产单位工具设备、工艺流程、生产人员的卫生状况,是对样品进行卫生学评价的综合依据,确定灭菌前产品中微生物的数量和性质,为下一...

赫山区15028183241： 检测生活饮用水细菌总数,培养皿在烘箱中培养时间是多少?24小时还是48小时 - ？
鱼秀核酪：[答案] 48,用培养箱不是用烘箱.

赫山区15028183241： 双歧杆菌总数测定方法 - ？
鱼秀核酪： 方法:菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀...