高效液相色谱仪做实验为何出峰时间不断提前？
是和标准样品比较出峰晚，还是同一待测样自身重现性实验时出峰晚
高效液相色谱出峰时间由多种因素决定：
1、固定相（色谱柱填料，长短，粒径）。
2、流动相（包括有机相水相配比，pH值，有机相组成，水相中缓冲盐组成，缓冲盐浓度，是否加入表面活性剂，是否加入离子对试剂等）。
3、流速（改变全部出峰时间，不会改变出峰顺序和相对保留时间）。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
扩展资料：
高效液相色谱法有“四高一广”的特点：
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。
2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。
3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
4、高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。
5、应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。
6、柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物
7、样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。
参考资料来源：百度百科-高效液相色谱
1.你的流动相中有三乙胺或二乙胺等扫尾剂，应控制扫尾剂的用量，不要过量，严格按照标准方法配制。
2.含有扫尾剂的流动相平衡时间本身就很长，不建议每天都清洗色谱系统，可以采用在不工作的时候将废液管接回流动相瓶中低流量连续平衡色谱系统，减少每次工作的流动相平衡时间。
3.环境温度的影响也较大，应当使用柱温箱。
4.如果使用的是视差折光检测器，不但要使用柱温箱，连室温也要控制，避免人员在实验室频繁走动导致的温度变化。
5.你的检测器是否有温度控制，如果有建议与色谱柱采用相同的温度。
原因分析：
1.你的流动相中有三乙胺或二乙胺等扫尾剂，应控制扫尾剂的用量，不要过量，严格按照标准方法配制。
2.含有扫尾剂的流动相平衡时间本身就很长，不建议每天都清洗色谱系统，可以采用在不工作的时候将废液管接回流动相瓶中低流量连续平衡色谱系统，减少每次工作的流动相平衡时间。
3.环境温度的影响也较大，应当使用柱温箱。
4.如果使用的是视差折光检测器，不但要使用柱温箱，连室温也要控制，避免人员在实验室频繁走动导致的温度变化。
5.你的检测器是否有温度控制，如果有建议与色谱柱采用相同的温度。
是不是温度变化影响，温度升高，出峰时间一般会提前
液相最好处在恒温的环境中，而且色谱柱最好放在柱温箱中
注射用苯唑西林钠实验室分析法
本实验室分析法主要用于测定注射用苯唑西林钠中的苯唑西林含量，采用高效液相色谱法进行。该方法适用于所有注射用苯唑西林钠产品。方法原理是将供试品溶解并适当稀释后，通过高效液相色谱仪进行色谱分离，使用紫外吸收检测器，在波长225nm处检测苯唑西林钠的峰面积，以此计算其浓度。实验所需试剂包括乙腈、...
岛津液相色谱仪梯度程序怎么设置
做实验时，需要设置梯度洗脱。对于组分复杂的样品，采用一种色谱体系，往往很难得到理想的分离效果，要么分离时间太长，要么分离度太差。这种情况，采用梯度洗脱就可以缩短分析时间，提高分离效果。1仪器岛津LC2010CHT型高效液相色谱仪（四元泵、在线脱气、自动冷却装置、全自动进样器、紫外检测器)：梅特 ...
托西酸舒他西林颗粒实验室测定方法
该测定方法所需的试剂包括甲醇和四丁基氢氧化铵溶液。仪器设备包括高效液相色谱仪、色谱柱（以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂）以及紫外吸收检测器。色谱条件设定为流动相为四丁基氢氧化铵溶液与甲醇按60:40的比例配制，检测波长为230nm，柱温保持在室温。试样制备分为两个部分。首先，配制四丁基氢氧化铵...
如何用高效液相色谱法定性确定棉花中有无甲醛
对此,本文对高效液相色谱法测定空气中的甲醛展开了研究。1 材料与方法1.1 仪器与试剂1.1.1 仪器 本次试验仪器采AgiLent-1100高效液相色谱仪,KQ-100DB型数控超声波清洗器,超纯水制备仪,恒温水浴锅。1.1.2 试剂 乙腈、正己烷、甲醇,盐酸-氯化钠溶液:20g氯化钠,少量水溶解,加37%盐酸60ml,加水定容至1000ml;磷酸氢...
高效液相色谱法( HPLC)的流动相如何选择?
高效液相色谱仪（HPLC）中流动相的选择涉及到多种因素，甲醇与水80:20的比例是一种常见的流动相组成，被广泛用于很多分析方法。这种比例的选择主要基于以下几个原因：溶解性能和极性调节：溶解性能：甲醇和水的混合物具有较好的溶解性，能够溶解多种化合物，尤其对于不同极性的化合物有良好的溶解性，使其...
头孢呋辛酯胶囊测定方法
头孢呋辛酯胶囊的高效液相色谱测定法本实验采用高效液相色谱技术，旨在测量头孢呋辛酯胶囊中头孢呋辛的含量。这种方法适用于头孢呋辛酯胶囊的定性与定量分析。方法原理基于样品的处理：首先，将供试品研磨并用甲醇溶解，然后用流动相稀释，通过高效液相色谱仪进行分离，利用紫外吸收检测器在278nm波长处检测头...
杀虫剂毒死蜱高效液相色谱分析方法的建立
实验部分、一、仪器与试剂 型双波长双光束紫外分光光度计,日本加公司产品。一型高效液相色谱仪,日本址公司产品,检测器采用紫外分光检测器。甲基毒死蟀工业品,淡黄色结晶,含量为,由四川省化工研究所提供。甲基毒死蟀纯品,用上述工业品三次重结晶,千燥后得白色结晶,液相色谱检测为单纯组分,用作标准品。
高效液相色谱仪检测器一有震动就会有检出信号,这个正常吗,如何解决...
1、首先，你应该确定一下，你们实验室的电源是否接地了。如果没有，可能是你检测器、泵、电脑主机之间的产生了电位差。你可以用金属线将几个仪器连接一下，确保他们之间没有问题。2、你们的液相分析实验室，以及实验室周边不能有电干扰。比如对讲机，也尽量避免手机的使用。你所说的震动，如果是指高...
超高效液相色谱的应用
如今，超高效液相色谱仪主要应用于（1）药物分析 如天然产物中复杂组分的分析（2）生化分析 如蛋白质、多肽、代谢组学等生化样品（3）食品分析 如食品中农药残留的检测（4）环境分析 如水中微囊藻毒素的检测（5）其他 如化妆品中违禁品的检测超高效液相色谱仪尤其对中药研究领域的发展是一个极大的...
高效液相色谱使用步骤
高效液相色谱仪操作步骤如下：1)． 过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.2)． 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)． 打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。4)． 进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。5)． 有一段时间没用，或者换了新...
东方夏复方： 一般就是几个原因导致的:仪器、方法,或者是操作. 1.仪器:你先看看仪器的而压力是多少.是不是哪里漏液了.如果漏了肯定是检不出来了.再有就是放大看一看基线噪音,查一下氘灯的使用时间.会不会是这方面的原因. 2.方法:这个因...
辉南县19128113435： 高效液相色谱仪操作时,进样不出峰是什么原因?？
东方夏复方： 这个很多可能,首先你要确定仪器检测器是否正常,其次检测器设置有没有问题,如检测波长等,还有就是运行时间过短,目标物还没有从色谱柱洗脱下来,如果都没有问题,那可能是你自己样品问题呢,你仔细找找原因.
辉南县19128113435： 高效液相色谱的出峰时间为什么会推迟?测的是同一个样品,白天测比晚上测出峰时间推迟了. - ？
东方夏复方： 压力不会使出峰时间延后,出峰时间延后说明保留时间增长,与流动相的极性、柱温有关系.柱温不变,正相条件下,可能是流动相极性变弱了;反相条件下,可能是流动相极性变强了.流动相不变的前提下,看柱温是不是偏低.应该是流动...
辉南县19128113435： 高效液相色谱仪分析法中不出样品峰咋么办 - ？
东方夏复方： 1,流动配比,有机溶剂比例太低,倒是无法洗脱.洗脱剂太强,与溶剂峰重叠. 2,检测限,出峰面积的最小值设置过大,而样品中所含有的有效物质过少,达不到最小出峰面积的要 求,故无法出峰,解决办法:将出峰面积的最小值调低. 3,检测器,对于检测器没影响的物质在图上也看不出来峰. 4,样品是否能够通过色谱柱 柱子填充物与溶剂都是合适的么. 5,设定的波长是否正确.时间是否充分. 6,柱子是否起到分离效果.
辉南县19128113435： 高效液相色谱仪做实验为何出峰时间不断提前?我做实验时发现同一种药在不同时间进针出峰时间不断提前,这是什么原因啊? - ？
东方夏复方：[答案] 原因分析: 1.你的流动相中有三乙胺或二乙胺等扫尾剂,应控制扫尾剂的用量,不要过量,严格按照标准方法配制. 2.含有扫尾剂的流动相平衡时间本身就很长,不建议每天都清洗色谱系统,可以采用在不工作的时候将废液管接回流动相瓶中低流量...
辉南县19128113435： waters高效液相色谱仪突然不出峰了,流动相是乙腈 - 水,什么原因 - ？
东方夏复方： 不出峰有三种原因,检测器损坏,进样失败,漏液或泵不出液体.检查一下检测器出口流动相流速对吗?不对的可能是漏液或泵没有泵出液体.只要不换柱不换流动相,两个泵和一个泵的压力应该都一样.检测器的波长和灯都检查一下.
辉南县19128113435： 液相色谱时间如何修改 - ？
东方夏复方： 改出峰时间的方法:1.调流速;2.改柱温;3.更换色谱柱;4.更改流动相组成或比例. 改工作站系统时间(仅进样前改有效,通常用于作弊造假):在电脑管理员界面(像我们公司就分管理员界面和操作者界面,平时做检验都是在操作者界面中)的控制面板中修改系统时间即可.记得做完样打完图谱之后把系统时间改回来.
辉南县19128113435： 用高效液相色谱法检测阿维菌素原料不出峰是什么原因？
东方夏复方： 采用高效液相色谱法在色谱柱 Bondapak C18柱 (250 mm*4.6 mm i.d.) 上, 以V(甲醇):V(水):V(三乙胺)=87:13:0.2为流动相, 示差折光检测
辉南县19128113435： 高效液相色谱仪做过几次试验后,再检测样品时只出一个峰或不出峰是怎么回事 - ？
东方夏复方： 流动相是不是有改变? 泵的压力是不是被调过了?最坏的原因可能是柱子坏掉了!
辉南县19128113435： 在做高效液相色谱中,为什么同样的样品,物质的出峰时间差这么多呢,第一次是16min,第二次是26min - ？
东方夏复方： 要看你液相的条件前后是否一致.最主要的是流动相是否前后相同,流动相的不同最容易导致保留时间变化;另外要看一下流动相流速,柱温等···
