单克隆抗体制备过程中的ELISA检测环节的结果怎么分析？
ELISA关键是订一个可靠的试剂盒。
如果盒子已经订了，剩下的就是自己操作了。
一个，尽量用八道或者十二道移液器加样。对于相同的试剂，经如二抗，酶，显色液，终止液等。
另一个，自己的样品，因为每一孔的样品不一样，用排枪加有些麻烦，如果一次的样品比较少，而自己加样又比较快，可以一个孔一个孔的加，但如果想一次把96或者48T的做完，可以先摆好一些PCR管或者准备一个96孔细胞培养板。将自己的样品先加到PCR管或者培养板中（此板间距与酶板板相同）。记得加一定的余量，如一次加样是50ul，可以先加70ul。加完后再用排枪加样，这样可以缩短加样时间，减小每个孔间的时间误差。
另一个，如果有多余的孔，标准品孔可以做复孔，在自己的样品前加一次标准品，加完样品后再加一次标准品。
如果孔不够，那么可以将标准品放在样品中间加（比如先加四十个孔，加完标准品再加五十孔）
用杂交瘤技术制备单克隆抗体的过程中,可在HAT选择培养基长期存活的是...
作用下，利用胸腺嘧啶和次黄嘌呤合成DNA，缺少其中一种，DNA合成不能发生。由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的杂交瘤细胞，其合成DNA的主要途径虽然被甲氨蝶呤阻断，但由于与脾细胞融合，可获得其HGPRT，利用次黄嘌呤合成嘌呤碱，最终与嘧啶一起合成DNA。因此，只有杂交瘤细胞才能在HAT培养液中生长繁殖。
制备单克隆抗体过程中为什么B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合不完全,产生多...
此外，还有瘤B融合但是不会产生符合要求的抗体的融合细胞。因为，制备融合细胞的时候，是B淋巴细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液混合后，采用一些物理的，化学的或生物的方法，使细胞融合，它们相互之间的融合是随机的，甚至会出现多个细胞融合成一个细胞，但这种细胞一般寿命很短。其他的融合细胞经过筛选之后，可以...
单克隆抗体的制备步骤
3、选择性培养：选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选择性培养基。4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化：在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备：...
单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
(2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现，大大提高了抗体的生产量。单克隆抗体制备的意义：用于以下各种生命科学...
单克隆抗体
单克隆抗体是采用克隆技术产出的抗体，对于很多疾病的诊断、治疗具有很重要的作用，特别是在恶性肿瘤领域，为免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。因此，很多人对单克隆抗体的产生非常的好奇。那么，单克隆抗体制备过程是怎样的？下面咱们就来详细看看吧。制备过程 1. 免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，...
多克隆抗体抗 Ig 抗体制备
多克隆抗体的制备过程包含一系列精细步骤：首先，抗原的制备是关键，免疫球蛋白（Ig）因其异种性，能够作为优质的抗原，激发异种动物产生针对Ig的血清反应。经过提取处理后，这将生成抗Ig抗体，也就是我们熟知的第二抗体或抗抗体。这种抗体在许多间接标记实验中起着重要作用。在材料和试剂准备方面，需要以下...
制备单克隆抗体的过程
（一）脾细胞 1．材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb\/c鼠。 (2)1640培养液 单克隆抗体制备流程 (3)2.5％FCS－1640营养液 2．操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。 (2)将小鼠放于70％酒精中浸泡消毒，取出固定于板上，在无菌条件下取脾。 (3)把脾放入5ml含有2...
下面为制备单克隆抗体和多克隆抗体
（1）由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中动物细胞融合和动物细胞培养两大技术．（2）据图可知，向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物，这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低、而且纯度低．与多克隆抗体相比，单...
单克隆抗体淋巴b细胞是浆细胞还是记忆细胞
单克隆抗体制备过程中的淋巴细胞是经过免疫的B细胞，实际上是效应B细胞，也就是浆细胞。
单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义
过程 1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb\/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞不能...
施娄解毒： 一、实验目的1.深入了解ELISA 法测定抗体效价的原理.2.掌握ELISA 法测定单克隆抗体效价的方法.二、实验原理 ELISA 是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术...
大名县17748569741： ELISA实验检测抗体的实验步骤? - ？
施娄解毒： 操作步骤: (1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原.洗涤除去未结合的抗原及杂质. (2)加稀释的受检血清,保温反应.血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物.经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,...
大名县17748569741： 如何鉴定单克隆抗体的性质? ？
施娄解毒： 单克隆抗体分离纯化后需对其抗体性质作最后鉴定.目前已有许多鉴定方法,如夹心法的放射免疫测定、补体介导的溶血实验、ELISA、免疫酶染色以及玫瑰花结形成实验等.亦可用沉淀实验和凝集实验.现以ELISA方法最为常用.根据抗体产生,应制备、纯化已知的可溶性抗原或颗粒性抗原,用于检测单克隆抗体,一般先作定性测定,如阳性进一步做定量检测.常用的检测程序是在纯化前对上清液单克隆抗体定性和定量检测,若阳性并且效价较高,纯化后再进一步定量检测,确定其工作浓度.
大名县17748569741： 单克隆抗体制备的基本原理与过程?有什么意义? - ？
施娄解毒： 哈哈~我们刚考到这题 原理: B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力.B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的.将这种B细胞与...
大名县17748569741： 单克隆抗体的鉴定实验 - ？
施娄解毒： 1.杂交瘤细胞染色体的检查采用秋水仙素裂解法进行.2.单克隆抗体的类型、亚型的测定:购买兔抗小鼠Ig类型和亚型的标准抗血清,采用琼脂扩散法或ELISA夹心法测定单抗的Ig类型和亚型. ELISA夹心法测定单抗的Ig类型和亚型的试剂盒说明...
大名县17748569741： 请问;检测 衣原体 抗原(ELISA)法是什么? - ？
施娄解毒： 酶联免疫吸附剂测定enzyme linked immunosorbent assay,ELISA.指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法.基本原理1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked ...
大名县17748569741： 求助做夹心ELISA时,夹心抗体的选择 - ？
施娄解毒： 做双抗体夹心ELISA 夹心抗体的选择 单克隆抗体制备时很多朋友会遇到这样的问题,即我们免疫用的蛋白为原核表达蛋白而目的蛋白是真核蛋白或病毒等,因为没有标准品我们做出来的抗体没有办法用标准品来验证是否与其发生反应,最终导...
大名县17748569741： 关于单克隆抗体的不正确叙述是() - ？
施娄解毒： B 单克隆抗体的优点(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体.(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体.(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等.(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗.
大名县17748569741： 单克隆抗体的制备过程中,检验阳性是什么意思?？
施娄解毒： 单抗的制备中,经筛选后的杂交瘤细胞产生的抗体是不一样的,其中有些是我们所需要的单克隆抗体,所以要把筛选后的杂交瘤细胞在多孔板上培养,每个小孔中只有一个细胞,然后用抗原去试,呈阳性的就是能产生特定抗体的杂交瘤细胞.
大名县17748569741： ELISA里一抗和二抗的区别 - ？
施娄解毒： 二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品.检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也...
