ta克隆的优缺点

作者&投稿:耿颜 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
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一、缺点:

1、PCR产物的酶切和判断比较困难。

2、另外酶切连接过程本身也相当地费时费力。

二、优点:

1、克隆PCR产物较简便、快捷的方法。

2、不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理,不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。

扩展资料:

T-A克隆由于在PCR过程中,使用的DNA聚合酶不同,往往分为2种情况:

1、使用高保真的DNA聚合酶,如pfu酶,由于其不能在扩增产物的3末端加上A,得到的DNA序列为钝端,因此,需要在回收纯化后进行加A的过程,通常是以PCR回收产物为模板,加上一定量的普通Taq酶和反应液,加入dATP(或dNTP),72℃10分钟,然后将加A产物直接用于TA连接。

2、使用不同的Taq酶,在PCR扩增循环结束后,加上72℃10分钟一个过程,Taq酶可以在扩增产物的3末端加上A,因此PCR产物回收纯化后可以和T载体直接连接。

参考资料来源:百度百科-T-A克隆




克隆的利弊
三是对医疗保健工作产生重大影响,如依靠分子克隆技术,搞清致病基因,提出疾病产生的分子生物学机制;将一头奶中含有治疗血友病的药物蛋白的转基因羊进行克隆,则可以较好地满足血友病人食疗的需要;为器官移植寻求更广泛的来源,将人的器官组织和免疫系统的基因导入动物体内,长出所需要的人体器官,可降低免疫排斥反应,提高移...

关于克隆的利弊
5.可能支持克隆人的人有一个观点:解决无法生育的问题。但一个没有生育能力的人克隆的下一代还会没有生育能力。6.在克隆人研究中,如果出现异常,有缺陷的克隆人不能像克隆的动物随意处理掉,这也是一个麻烦。因此在目前的环境下,不仅是观念、制度,包括整个社会结构都不知道怎么来接纳克隆人。7.根据...

克隆的利与弊
在理论上,克隆技术还很不成熟;在实践中,克隆动物的成功率还很低,生出的部分个体表现出生理或免疫缺陷,而且动物的残废率相当高并伴有早衰现象等。此外,克隆技术(尤其是人胚胎方面的应用)对伦理道德的冲击和公众对词的强烈反应也限制了克隆技术的应用。但几年来克隆技术的发展表明,世界各科技大国...

克隆的利&弊
主要观点:克隆人具有自然人的法律主体资格 克隆人给社会带来法律主体上的混乱 克隆人研究行为是违法行为 克隆人研究者涉嫌故意杀人及伤害罪 克隆人的受监护权被抚养权得不到保护 克隆人的生命健康权和人格权结婚权得不到保护 克隆人研究是对于进一步犯罪的引诱 克隆人的研究违背人类不变的伦理道德并且也是人类的陷...

克隆技术的好处和坏处(详细点)
三是从性伦理学角度,完全改变了人类自然的、基于性爱的生育方式,使人口的产生与性爱分离,破坏人类的感情。四是从生命伦理学角度,破坏了人拥有独特基因的权利,有可能导致人种的退化,还会使正常的生与死的观念发生动摇。有的学者还从更广阔的视野批判性地反省了克隆技术有可能带来的负面后果,除了上述...

克隆的好处与坏处
三、克隆技术的福音 1. 克隆技术与遗传育种 在农业方面,人们利用“克隆”技术培育出大量具有抗旱、抗倒伏、抗病虫害的优质高产品种,大大提高了粮食产量。在这方面我国已迈入世界最先进的前列。 2. 克隆技术与濒危生物保护 克隆技术对保护物种特别是珍稀、濒危物种来讲是一个福音,具有很大的应用前景。从生物学的角度...

克隆的益处与缺点
... ...当时,曾领导克隆多利的研究的伊恩·威尔穆特教授曾表示,多利患有关节炎可能意味着克隆技术“效率低”,需要进一步研究。(完) ... 克隆技术是什么东西 克隆技术其实就是从动物A上拿一个细胞,取出细胞核!再到同种动物B的身上拿一个细胞,去掉细胞核!把取出来的细胞核放到另一个去掉细胞核的细胞中!再把...

ta克隆的优缺点
一、缺点:1、PCR产物的酶切和判断比较困难。2、另外酶切连接过程本身也相当地费时费力。二、优点:1、克隆PCR产物较简便、快捷的方法。2、不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理,不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。

克隆技术的弊端
1、克隆技术应用于人体将导致对后代遗传性状的人工控制。克隆技术引起争论的核心就是能否允许对发育初期的人类胚胎进行遗传操作。这是很多伦理学家所不能接受的。2、克隆技术的使用将使人们倾向于大量繁殖现有种群中最有利用价值的个体,而不是按自然规律促进整个种群的优胜劣汰。从这个意义上说,克隆技术...

PCR产物克隆的方法和优缺点
正好与PCR产物上突出的A配对,所谓的T\/A克隆就是将带有突出A尾巴的PCR产物与T载体连接,然后转化宿主菌的克隆,这种克隆效率非常高,很容易成功,应用也非常广泛,常用于下游克隆操作前的PCR产物测序鉴定和方便对PCR产物进行酶切处理。2.Restriction stick end cloning 翻译过来就是限制性粘末端克隆,就是...

临西县13333019621: ta克隆的优缺点 -
产司种复: 一、缺点: 1、PCR产物的酶切和判断比较困难. 2、另外酶切连接过程本身也相当地费时费力. 二、优点: 1、克隆PCR产物较简便、快捷的方法. 2、不需使用含限制酶序列的引物,不需将 PCR 产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理...

临西县13333019621: 如何提高PCR产物克隆的效率 -
产司种复: 【TA 克隆的优缺点】1、优点:(1)是目前克隆 PCR 产物最简便、快捷的方法.(2)不需使用含限制酶序列的引物,不需将 PCR 产物进行优化,不需把 PCR 产物做平端处理,不需在 PCR 扩增产物上加接头,即可直接进行克隆.(3)TA克隆选...

临西县13333019621: RT - PCR出一段目的基因,为什么要把它先TA克隆呢?为什么不能直接把它连接到相应的质粒上呢 -
产司种复: 确实可以不一定要TA克隆.你可以在设计引物的时候在引物的5'端加上酶切位点,比如你选中XXXYYY位点你可以把引物设计为AA-XXXYYY-AGCT(AGCT 代表你原来的引物序列).我一般在头上加2个A,这样酶切效果好一些.两个引物可以加相同,也可以不同酶切位点.取决于2点: 1.扩增区没有该位点,(必须知道你扩增区的序列) 2.对应于你的目标分子.TA克隆的好处在于选择灵活,万一一个位点不好使,同一批质粒还可以用其他酶再切.随时可以扩增.还有方便下游作业,比如说你要连接两端PCR产物,先克隆会比较方便一些.所以2种方法各有优缺点,你可以根据情况选用.

临西县13333019621: T - A克隆的介绍 -
产司种复: TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)把PCR片断与一个具有3'-T突出的载体DNA连接起来的方法.

临西县13333019621: 如何确定TA克隆的方向 -
产司种复: 一般只能通过测序才能确定目的基因的插入方向.

临西县13333019621: TA克隆的具体原理是什么? -
产司种复:[答案] TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)把PCR片断与一个具有3-T突出的载体DNA连接起来的方法.因为PCR反应中所适用的聚合酶具有末端转移的活性,通常在3加上A.例如:Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产...

临西县13333019621: 克隆的利弊?
产司种复: 克隆的坏处:对伦理学界来说,克隆人行为关涉到一个很严重的伦理问题,因为它侵犯了伦理学的基本原则,比如不伤害原则,自主原则,平等原则等等.一、克隆人违背了伦理学的不伤害原则 伤害了被克隆者.被克隆的是另外一个个体,这...

临西县13333019621: 克隆的利与弊400字 -
产司种复: 我们所说的生物技术的利和弊主要指的是克隆,其利和弊是 利:1) 克隆技术可解除那些不能成为母亲的女性的痛苦. 2) 克隆实验的实施促进了遗传学的发展,为“制造”能移植于人体的动物器官开辟了前景. 3) 克隆技术也可用于检测胎儿...

临西县13333019621: 克隆人的利与弊辩论 -
产司种复: 先给你讲一下好处: 克隆人的好处第一是可以让那些得不到孩子而非常痛苦的不育患者有自己的孩子.其二,这样的克隆是只用丈夫妻子自己的精子卵子,这就避免了伦理上和心理上的阴影.还有,克隆还可以挽救濒危动物,保持人群性别的合...

临西县13333019621: 克隆的缺点 -
产司种复: 弊:1) 克隆将减少遗传变异,通过克隆产生的个体具有同样的遗传基因,同样的疾病敏感性,一种疾病就可以毁灭整个由克隆产生的群体. 可以设想,如果一个国家的牛群都是同一个克隆产物,一种并不严重的病毒就可能毁灭全国的畜牧业....

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