单克隆抗体技术怎样鉴别植物病毒?

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如何利用生物学方法鉴别植物病毒?~

在植物病毒诊断中所采用的生物学方法是基本的手段,也是取得该病毒有关特性的第一手资料。生物学测定方法有:鉴别寄主或指示植物反应,传播途径测定,寄主范围测定等。
鉴别寄主(诊断寄主)是指病毒或某一株系在一些特定植物上能引起专化性症状反应,这种专化性或特殊症状反应与其他病毒在该植物上的侵染反应有差异。这些或这种植物就可作为某一病毒或株系的鉴别寄主或指示植物。如烟草花叶病毒(TMV)在心叶烟(Nicotiana glutinosa)上产生枯斑反应,马铃薯X病毒(PVX)摩擦接种到千日红(Gomphrena globosa)上产生具有红色边缘的局部枯斑,黄瓜花叶病毒(CMV)在苋色藜(Chenopodium amnticolor)上表现局部枯斑,大麦黄矮病毒(BYDV)在燕麦(Avena sativa)上表现为紫红色叶片。鉴别寄主除了对病毒进行生物学鉴定外,还可用于病毒的生物学分离。即利用植物病毒具有局部枯斑和系统症状的特点,根据症状的不同来区分单一病毒。如利用枯斑反应进行单斑分离,然后将单斑分离的病毒接种到系统症状的植物上进行繁殖,就会得到单一病毒的分离物。这一过程可以反复进行,直到确定已排除了其他病毒混杂时,就可大量繁殖和提纯,以便进行进一步鉴定。
对一些不能通过汁液摩擦接种的病毒,需要采用蚜虫、叶蝉、飞虱等介体昆虫进行传毒试验,或通过嫁接的方法将要鉴定或检测的植物标样传播接种到鉴别寄主上进行生物学鉴定。如大麦黄矮病毒(BYDV)只能通过蚜虫传毒到指示植物燕麦上进行生物学鉴定,苹果锈果类病毒(ADFVd)只通过嫁接的途径来接种到指示植物上进行鉴定。而对那些既不能通过汁液摩擦接种传播,又不知道其传播途径的病毒,则要首先进行其传播途径的测定。
生物学鉴定虽然具有较稳定的试验结果,操作简单,要求的设备和技术不高,但所需的时间较长,而且试验结果常受到环境条件的影响,如温度、光照常影响症状表现。

物理学测定方法是指用电镜、光学和荧光显微镜对植物病毒内含体的观察。许多植物病毒都在植物体内产生内含体,用电镜观察病毒引起的内含体,对快速鉴定病毒很有帮助,有些病毒就凭它们诱导的内含体就能区分开来,现将9个病毒属在分属水平上具有的诊断特征列于下表。
9个具特征性内含体的病毒属

9个具特征性内含体的病毒属(续)-1

运用细胞融合技术,将小鼠骨髓瘤细胞和小鼠脾细胞杂交,产生杂交瘤细胞。其增殖能力很强,可在体外连续培养产生抗体。选择其中能产生某单一抗体的细胞株,所产抗体称“单克隆抗体”。单克隆抗体灵敏度和专一性比多克隆抗体高,而且可以稳定地再繁殖,无需再用免疫动物,因此被广泛应用于植物病毒等病原的检测和鉴定。目前已有多种园艺花卉植物病毒的单克隆抗体应用于病毒的鉴定和检测。




多克隆抗体技术的抗体的鉴定
抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按下列公式计算交叉反应率。如果所用抗原浓度IC50浓度为pg\/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷...

多克隆抗体结果判定
在评估多克隆抗体的成果时,需要进行两项关键步骤:抗 Ig 效价测定和纯度鉴定。首先,抗 Ig 效价测定是基础步骤。当琼脂扩散法测得的抗体浓度达到 1比16 或 1比32 时,被认为是合格的。这个过程衡量了抗体对 Ig 的反应强度,确保其有效性和特异性。其次,纯度鉴定采用琼脂扩散法进行。实验中,中间孔...

单克隆抗体性质鉴定最常采用的方法是
单克隆抗体性质鉴定有放免测定、ELISA等方法,最常用的是ELISA。

单克隆抗体鉴定实验
单克隆抗体的特异性鉴定可以通过多种技术,如免疫荧光法、ELISA法、间接血凝和免疫印迹技术,以及免疫阻断试验来确保其特异性。效价测定方面,可采用凝集反应、ELISA或放射免疫测定,腹水样本的效价通常高于培养上清。亲和力和识别抗原表位的能力也是单抗鉴定的重要指标。

单克隆抗体的鉴定实验
1.杂交瘤细胞染色体的检查采用秋水仙素裂解法进行。2.单克隆抗体的类型、亚型的测定:购买兔抗小鼠Ig类型和亚型的标准抗血清,采用琼脂扩散法或ELISA夹心法测定单抗的Ig类型和亚型。ELISA夹心法测定单抗的Ig类型和亚型的试剂盒说明书 1、首先将试剂盒恢复室温(大约30分),然后用纯水把清洗液配成工作...

单克隆抗体技术怎样鉴别植物病毒?
运用细胞融合技术,将小鼠骨髓瘤细胞和小鼠脾细胞杂交,产生杂交瘤细胞。其增殖能力很强,可在体外连续培养产生抗体。选择其中能产生某单一抗体的细胞株,所产抗体称“单克隆抗体”。单克隆抗体灵敏度和专一性比多克隆抗体高,而且可以稳定地再繁殖,无需再用免疫动物,因此被广泛应用于植物病毒等病原的检测...

免疫学技术知识总结 第二章
常见方法有:有限稀释法和软琼脂克隆技术 有限稀释法:从阳性分泌孔收集杂交瘤细胞。 软琼脂克隆技术:从阳性分泌孔中收集杂交瘤细胞,一适当浓度杂交瘤细胞加入到软琼脂培养基中,形成有一个细胞增殖来的细胞集群。 单克隆抗体的鉴定: (1) 抗体敏感性检测:对腹水和培养基上清进行效价测定 (2) 抗体特异性鉴定:是否与...

如何鉴别世纪元亨的单克隆抗体真假
有防伪编码跟防伪网站的啊,可以查查。有两种的,一种是出口的一种是国内的,但是都是真的

用cd单克隆抗体鉴定人辅助性t细胞,哪些cd抗原阳性a,cd3 b,cd4 c,cd8...
流式细胞术是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的现代细胞分析技术。目前,应用流式细胞仪测定全血中的CD4+T细胞亚群有两种方法:一种为多平台法,此方法操作复杂,费时,随机误差大;另一种为单平台法,较为简便、实用、省时和准确。但...

如何制备多克隆抗体
一、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:1、制备抗原。2、选择实验动物。3、动物免疫。4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。6、纯化出抗体。7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。二、抗体分类:抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激...

前进区13211724774: 单克隆抗体的应用 -
示战牛黄: 单克隆抗体,因为是肿瘤细胞和B细胞杂交而成的,所以它有肿瘤细胞无限增殖的特性,又能分泌抗体.

前进区13211724774: 单克隆抗体的鉴定实验 -
示战牛黄: 1.杂交瘤细胞染色体的检查采用秋水仙素裂解法进行.2.单克隆抗体的类型、亚型的测定:购买兔抗小鼠Ig类型和亚型的标准抗血清,采用琼脂扩散法或ELISA夹心法测定单抗的Ig类型和亚型. ELISA夹心法测定单抗的Ig类型和亚型的试剂盒说明...

前进区13211724774: 南芥菜花叶病毒怎样检疫与防治?
示战牛黄: 南芥菜花叶病毒检疫方法:1、鉴别寄主反应昆诺阿藜和苋色藜上首先出现局部褪绿,然后系统斑驳;黄瓜表现局部褪绿斑,然后系统性黄斑或沿脉变色,植物停止生长;...

前进区13211724774: 下列关于单克隆抗体的说法,不正确的是() -
示战牛黄:[选项] A. 单克隆抗体的最主要优点就是特异性强,灵敏度高,能够大量制备 B. 单克隆抗体在植物病害的诊断和病原鉴定中发挥着重要的作用 C. 单克隆抗体能准确的识别各种抗原物质的细微差别,并跟一定抗原发生特异性结合 D. 单克隆抗体最广泛的应用是作为“生物导弹”治疗癌症

前进区13211724774: 单克隆抗体的性质鉴定的方法有哪些 -
示战牛黄: 答案A 点拨:单克隆抗体是蛋白质,不是细胞,所以①不正确;其制备过程中至少有两次筛选,一次是筛选出杂交瘤细胞,第二次是筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞,所以②正确;由于是单个杂交瘤细胞无性繁殖产生的高度单一的抗体,所以叫单克隆抗体...

前进区13211724774: 下列关于单克隆抗体的说法,不正确的是 -
示战牛黄:[选项] A. 单克隆抗体的最主要优点就是特异性强,灵敏度高,能够大量制备 B. 单克隆抗体在植物病害的诊断和病原鉴定中发挥着重要的作用 C. 单克隆抗体能准确的识别各种抗原物质的细微差别,并跟一定抗原发生特异性结合 D. 单克隆抗体最广泛的应用是作为“生物导弹”治疗癌症

前进区13211724774: 植物病毒的ELISA检测方法有几种啊,能详细讲解吗?不胜感激~~ -
示战牛黄: 你是单抗还是多抗啊?如果是多抗就好办了(上下用同一抗体),一般是用夹心法.如果单抗的话,可能得两株了.把抗体包被在酶标板上.封闭.再加抗原(已知浓度的病毒或者蛋白).再加抗体(多抗加同一种,单抗加不同种),加酶标二抗.加TMB湿色液,终止,读数.实际过程也不是一两句说得清的,多查一下资料吧.浓度得自己摸索一下.各种缓冲液网上基本可以找到的.

前进区13211724774: 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 -
示战牛黄: 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...

前进区13211724774: 单克隆抗体技术能够用于什么方面? -
示战牛黄: 单克隆抗体在生物学和医学研究领域中显示了极大的应用价值,是亲和层析中重要的配体,是免疫组化中主要的抗体,是免疫检验中的新型试剂,是生物治疗的导向武器.作为医学检验试剂,单克隆抗体可以充分发挥其优势.单克隆抗体的特异性强,可将抗原抗体反应的特异性大大提高,减少了可能的交叉反应,使试验结果可信度更大.单克隆抗体的均一性和生物活性单一性使抗原抗体反应结果便于质量控制,利于标准化和规范化.

前进区13211724774: 单克隆抗体与植物体细胞杂交的比较 -
示战牛黄: 这是两个不同的概念.单克隆抗体是通过浆细胞与癌细胞杂交后产生特定的抗体.植物体细胞杂交是将两种不同的植物细胞通过一定方法将原生质体融合后形成杂种植物的过程.

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