qrt-pcr检测方法
牛、羊、猪口蹄疫感染情况、不同亚型口蹄疫免疫抗体水平的监测方法有哪...
(2)牛、羊口蹄疫感染情况使用非结构蛋白抗体ELISA方法检测。检测结果阳性的，采集其食道－咽部分泌物（O－P液）用RT－PCR方法检测，若检测结果为阴性应间隔15天再采样检测一次，RT-PCR检测阳性的判定为阳性畜。(3)对猪的检测：从屠宰场采集猪颌下淋巴结用RT－PCR方法进行检测，结果为阳性的判定为阳性...
rtpcr和实时荧光定量pcr区别是什么?
RTPCR和实时定量PCR应该都属于PCR，在RNA实验中，这二者都会应用到。例如你要比较2个组织中的某基因的表达差异，首先你要提取2个组织的总RNA，然后通过RT-PCR检测该基因是否在2个组织中有表达，然后通过实时定量PCR测定该基因在2个组织中的表达量是否具有显著性差异。
RT-PCR的原理是什么?有何用途?
绝对定量常用于逆转录病毒侵染细胞的检测。用途：通过逆转录，以及taq酶利用HIV的特异引物进行扩增，最终的循环数可以反应你的这群T细胞正在被多少个HIV侵染。 相对定量常用于检测实时的转录谱。1.逆转录PCR（reverse transcription PCR）或者称反转录PCR（reverse transcription-PCR, RT-PCR），是聚合酶链式...
RT-PCR实验操作的注意事项
两步法RT-PCR比较常见,在使用一个样品检测多个mRNA时比较有用。然而一步法RT-PCR具有其他优点。一步法RT-PCR在处理大量样品时易于操作,有助于减少残余污染,因为在cDNA合成和扩增之间不需要打开管盖。一步法可以得到更高的灵敏度,最低可以达到0.1pg总RNA,这是因为整个cDNA样品都被扩增。对于成功的一步法RT-PCR,...
核酸检测的方法原理和流程
在新冠疫情防控中，核酸检测作为一种重要手段，其流程和原理值得我们了解。核酸检测通过检测患者样本中是否存在新型冠状病毒的RNA，来判断是否感染。其流程主要包括样本采集、核酸提取、RT-PCR扩增和结果判断。首先，采集样本，如咽拭子、鼻拭子等，然后使用核酸提取试剂提取样本中的核酸。接着，将核酸加入...
与其他分子生物学方法相比,用荧光探针RT-PCR法检测诺如病毒有什么优势...
酶链免疫法特异性强，所含有的脂肪电镜法直接电镜法(EM)和免疫电镜法(IEM)，一是样品中病毒浓缩后的回收率，核酸提取方法的优劣取决于两个方面，PEG 把病毒沉淀下来。RIA法的灵敏度比IEM 法可 提高10～100倍，该方法改进后制成市售的TRIzol。该方法的灵敏度略低于 RT-PCR 法。 RT-PCR检测食物中...
基础实验重新认识(5)——PCR相关
逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。 3.real-time PCR\/quantitative PCR 实时荧光定量PCR技术,是指在...
求RT-PCR 流程和注意事项
解答:1.RT-PCR有两种做法:条件具备的话可用kit进行一步法进行;若条件不太好的话可分两步进行逆转录再PCR。但后来发现两步法的结果更加理想,条带特异性强且无拖尾现象,我推 测是体系更加单一比较利于PCR的进行,当然也可能是我买的kit不太好。(promega)。2.RT-PCR应具备的条件高质量的RNA(保留后可做5,3RACE...
RT-PCR(real-time pcr)在检测细胞的凋亡中与其他方法相比有何优缺点_百...
RT-PCR是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外...
几种新的pcr技术分别是哪些和介绍
Touch-down PCR Touch-down PCR又称降落PCR.即选定一个温度范围，如50—35 ℃ ，每降1-2 ℃进行1-2个循环，然后在50度下进行15个循环。RT-PCR RNA的多聚酶反应（RT-PCR）是以RNA 为模板，联合逆转录反应（reverse transcription，RT）与PCR，可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的RNA...
密山市纳欣回答： 我知道和使用过的U6内参基因只有两个: RNU6-1和RNU6-2.前一个就是常见的u6,后一个有时被称为u6b. 在我的大鼠RNA样本当中,u6表达量有些太高,u6b的Cq值与我的目标miRNA比较接近,稳定性也很好.
祗严13251257112问： RT - PCR的原理是什么?有何用途? - ？
密山市纳欣回答： RT-PCR有两种解释:1,最常用的理解:RT 是'逆转录'(reverse transcription)的缩写2,现在也有人这么用:RT是'实时'(real time)的缩写1,先说逆转录PCR:这项技术使用的'逆转录酶'来自逆转录病毒,是一种能按照碱基互补配对原则...
祗严13251257112问： 反转录PCR和荧光定量PCR - ？
密山市纳欣回答： 一个是RT-pcr,reverse transcription pcr的简写 一个是real-time,一般不会简化为“rt-pcr”,又称实时定量pcr,Q-pcr,应该就是你说得荧光定量 而你要测mRNA的量,就是先反转录成cDNA,再作定量pcr,就是前两者的合,常称为qRT-PCR 有很多real-time的试剂盒,你可以网上看下说明书
祗严13251257112问： qrt - PCR 全称,英文的? - ？
密山市纳欣回答： qRT-PCR(定量反转录聚合酶连锁反应)quantificational rt-PCR
祗严13251257112问： qRT - PCR和RT - PCR是一种吗? - ？
密山市纳欣回答： 当然不是一种,一般qRT-PCR就是你后边提到的那一串英文,中文叫做实时定量PCR,这个不是半定量,southern杂交和Northern杂交才属于半定量.而RT-PCR通常指的是反转录PCR,英文是reverse transcription PCR,就是先将mRNA反转录成cDNA,然后再以cDNA为模板,用PCR方法加以扩增.
祗严13251257112问： 求助miRNA QRT - PCR引物设计 - ？
密山市纳欣回答： miRNA引物设计(茎环法+染料法检测) 设计方法:通用茎环后端加miRNA后面6个碱基的反向互补序列为反转录引物,正向引物为miRNA去除后面6个碱基的序列,反向引物在茎环上.反转录茎环通用序列:...
祗严13251257112问： 基因表达的检测方法有哪些 - ？
密山市纳欣回答： 老兄.我扫个盲哈.检测基因表达的方法主要有:表达谱,全转录组的信息,目前最流行平台包括47,000个转录本,检测全基因组的表达变化.简单的经典的方法有Northern Blot,常用的有反转录PCR,定量分析表达的变化qRT-PCR这些都是检测单一转录子的方法.
祗严13251257112问： 基因检测有哪些方法 - ？
密山市纳欣回答： 检测基因表达的方法: 转录水平检测:RT-PCR,real-time PCR,northern blot 翻译水平检测:western blot 还有直接检测,如报告基因、融合荧光蛋白等.
祗严13251257112问： 用qRT - PCR测某转录因子的mRNA,该蛋白具有三种不同亚型,引物要如何设计我要测某转录因子Sc,S有三个亚型abc,但一般报道里见ac较多.NCBI上只找... - ？
密山市纳欣回答：[答案] 这个我和很久以前的一个课题很接近啊. 首先,你要很明确你用来做实验的细胞这三种亚型都有充分的表达,或者某种细胞系,某种亚型的表达高. 然后,如果只是翻译位点不同的话,那就和PCR无关了,应该改用western,可以测到不同的蛋白(一...
祗严13251257112问： qRT - PCR结果用什么统计学方法分析 - ？
密山市纳欣回答： 生存分析(Survival analysis)是指根据试验或调查得到的数据对生物或人的生存时间进行分析和推断,研究生存时间和结局与众多影响因素间关系及其程度大小的方法,也称生存率分析或存活率分析.
