荧光rt-pcr检测
RT-PCR是什么
RT-PCR简介 RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA...
一文搞懂 PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR 及优缺点
(3)数字PCR 数字PCR(Digital PCR,Dig-PCR,dPCR)即第三代PCR技术,是对原始PCR的另一种改进,是一种能够实现核酸绝对定量的精准检测技术。三、易混淆的PCR概念 很多人误以为RT-PCR是Real-time PCR的缩写,因此将二者混为一谈,但实际上是不一样的,国际上的约定俗成的是:RT-PCR特指反转录...
做RT-PCR的目的是什么?
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行,PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们...
PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR傻傻的我分不清楚
具有极高精确性。逆转录PCR(RT-PCR)针对RNA分子,先逆转录成cDNA,再进行DNA扩增。RT-qPCR结合了RT-PCR和qPCR,可同时实现RNA的逆转录和定量分析。PCR反应体系包括模板DNA、引物、底物、DNA聚合酶和PCR缓冲液等基本成分。每种PCR变体因其特性,适用于不同的研究领域,如基因表达、病毒载量检测等。
请写出3-4种pcr技术及其应用。
基因检测与诊断: 常规PCR可用于检测遗传疾病、肿瘤基因、传染病等。医学上,它常被用来进行病原体的检测,例如病毒、细菌等。DNA克隆: 常规PCR可用于扩增特定基因片段,然后将其插入到载体中,进行基因克隆。2. 逆转录PCR(RT-PCR)技术:RT-PCR是在PCR技术基础上,加入了逆转录步骤,将RNA转录为cDNA...
rtpcr和qpcr区别
关于qpcr与rtpcr区别,qpcr和rt pcr的区别这个问题很多朋友还不知道,今天小六来为大家解答以上的问题,现在让我们一起来看看吧!1、RT-PCR是real-time PCR的话,和qPCR是一样的,都是荧光定量PCR。2、相比普通PCR,会加入染料,便于收集荧光信号。3、结果可以得出相对\/绝对 浓度等多组数据,然后根据你...
RT-PCR,QRT-PCR,real-timePCR之间什么区别
PCR:一种快速的DNA复制方法,由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成。RT-PCR:反转录PCR(reverse transcription-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA(cDNA),再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。QRT-PCR在RT-PCR体系中同时加入内参...
荧光定量RT-PCR与 实时荧光RT-PCR说的是一码事吗
Time-PCR在本实验中的作用而命名的,若实验中只要求定性(比如用探针法检测某物种的特异性基因),作者一般会将其翻译为实时PCR或实时荧光PCR,但也有不太专业的人会翻译为荧光定量PCR;若实验中要求定量,作者都会将其翻译成什么什么定量PCR。所以楼主要区分问题中的两种RT-PCR是不是一回事,关键还是要...
我要做荧光定量RT-PCR,产物长度是73bp,可以吗?
可以的,50bp到150bp都可以,只要你设计的引物探针特异性好,是可以做出来的;不过一般都是100bp-150bp左右比较好,我研究过中山达安公司09年的H1N1检测试剂盒,通过TA克隆得知,他们的检测H1N1病毒的H1跟N1两管混合液中扩增目的片段的长度都是70bp左右。如果你的引物探针以及合成好的了话,就做实验吧...
real-time RT-PCR是什么意思
外文简称 【RT PCR】【实时荧光定量PCR技术】,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的...
静安区大扶回答:[答案] 你所说的PCR应该就是最常规的PCR,以DNA为模板,通过上下游引物,实现DNA的扩增 RT-PCR一般情况下是指反转录PCR(reverse transcription),尽管有些资料上说实时荧光定量PCR也(realtime fluores-cence quantitative PCR)也简称RT-...
才蓝15853232029问: 与其他分子生物学方法相比,用荧光探针RT - PCR法检测诺如病毒有什么优势? - ?
静安区大扶回答: 方法包括等温核酸扩增(NASBA)、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、荧光染料RT-PCR、荧光探针RT-PCR、多重RT-PCR等,是目前检测诺如病毒应用最广泛的方法,被称为检测诺如病毒的“金标准”. NASBA直接扩增RNA来进行检测...
才蓝15853232029问: 荧光定量PCR的前试验准备及流程首先是获取菌体,再提总RNA,然后分离mRNA,之后进行RT - PCR,还是可以直接进行荧光定量PCR呢? - ?
静安区大扶回答:[答案] 首先是获取菌体,再提总RNA,不用再分离mRNA,直接做反转录RT-PCR,得到cDNA后直接进行荧光定量PCR. 得到的得到cDNA可以保存的时间比较长.这样荧光定量PCR就可以集中一起做.
才蓝15853232029问: 论述RT - PCR检测基因表达的实验步骤及如何判断并消除DNA污染所造成的影响. - ?
静安区大扶回答: RT-PCR实验,主要分为3步: 1. total RNA的提取 2. mRNA的反转录 3. 荧光定量PCR 由于字数限制,详细步骤可以参考下面网址. 消除DNA污染: 1. 按照说明书加入足量的Trizol,细胞过多会引起DNA污染. 2. 现在已经有去除基因组污染的反转录试剂盒,已经在很多实验室常用.你可以尝试一下.
才蓝15853232029问: real - time RT - PCR是什么意思 - ?
静安区大扶回答: real-time RT-PCR 实时荧光定量RT-PCR 双语对照词典结果: 网络释义 1. 荧光定量RT-PCR 2. 实时定量RT-PCR 3. 荧光RT-PCR
才蓝15853232029问: 荧光定量PCR的前试验准备及流程 - ?
静安区大扶回答: 首先是获取菌体,再提总RNA,不用再分离mRNA,直接做反转录RT-PCR,得到cDNA后直接进行荧光定量PCR. 得到的得到cDNA可以保存的时间比较长.这样荧光定量PCR就可以集中一起做.