qpcr中cq值多少合理
如何看QRT-PCR 结果中的Cq值
新版的软件都叫Cq值，不叫Ct值了，不必理会。Ct值15－25是最好，10－30之间也接受。如果超过30了，得看一下复孔是否一致，如果一致，也接受。如果不一致，基本就是废的。
cq值超过30还能用吗
不能。根据查询中华医学网，CQ值超过30意味着目标基因的起始浓度较低或者未能成功扩增不能再使用。CQ值是实时荧光定量PCR（实时定量聚合酶链反应）中的一个指标，用于判断扩增曲线的质量和可靠性。CQ值越低，表示目标基因的起始浓度越高。
搞定qPCR数据分析
Cq值表示扩增产物达到设定阈值所需的循环数，与起始浓度呈线性关系。定量分析时，Cq值范围一般为15-35，过小或过大可能导致不准确。同时，分析扩增效率及相关系数也非常重要。扩增效率在90-110%之间为理想状态，R²值大于0.98表明数据相关性很好。重复性反映了实验结果的一致性，通过标准偏差衡量。...
什么是qPCR表达量的Cq值?
在实时荧光定量PCR (qPCR) 中，Cq 值代表着 PCR 反应的阈值。Cq 值越低，说明模板开始翻倍的时间越早，即样本中的目标基因含量越高。因此，Cq 值可以用来估计目标基因表达量的相对水平。在 qPCR 中，表达量通常使用 2^-ΔΔCt 方法进行分析，其中ΔΔCt 是指两个基因，如目标基因和参考基因，在...
荧光阈值和循环阈值的特点
如果荧光强度值低于阈值，说明实验中该靶序列的数量太少无法检测到。循环阈值Cq是实时定量PCR数据分析方法中的另一个参数，是指在PCR反应过程中，荧光信号触发荧光探针发出的信号强度值达到一个特定的标准值时，PCR产物数量达到了一个起始阈值。循环阈值通常用于测量反应量，即PCR产物数的变化，是靶序列的...
PCR扩增效率的评估
使用一系列稀释样品，采用标准qPCR程序进行扩增获得Cq值，最后根据各样品浓度及相应的Cq值绘制标准曲线，得到线性方程Cq= -klgX0+b，扩增效率E=10(-1\/k)-1。利用qPCR进行定量分析时，要求扩增效率范围在90%-110%（3.6＞k＞3.1）。影响扩增效率的关键因素 PCR的效率取决于许多因素，包括以下方面：...
定量PCR实验中的Ct值与Cq 值是什么?
Cq值与样本中目标核酸的数量成反比，与样本中的目标拷贝数相关。较低的Cq值（通常低于29个循环）表示大量的目标序列。较高的Cq值（超过38个循环）意味着较低的目标核酸量。高Cq值可能表示目标或PCR设置存在问题，如PCR效率低、模板不足或样品处理不当等。影响Cq值的因素包括生物事件、PCR反应准备和PCR...
qpcr原理及应用是什么?
此时的循环数称为CT(Threshold Cycle)，Ct值与起始的模板量成反比，起始的核酸量越多，达到阈值的循环数就越少，换句话说CT值会越小。如果要确定量的话，需要做出标准曲线，以Ct值为纵坐标，起始模板数为横坐标作图。在新的MIQE规范中Ct这个惯用的名词被重新定义为Cq值(quantification cycle)。
qpcr原理及应用是什么?
反应的 Cq主要由扩增反应开始时存在的模板量决定。如果在反应开始时存在大量模板，则需要相对较少的扩增循环来积累足够的产物以产生高于背景的荧光信号。因此，反应将具有低的或早期的 Cq。二、应用 实时荧光定量 PCR\/qPCR 检测已成为快速、灵敏地测定和定量各种生物样品中核酸的首选工具，具有多种应用，...
做完realtimePCR后具体数据怎么分析?看到给给出了RQ,Cq,Delta Cq mean...
分析的时候只看一个，就是Ct (Cq) 值。先把内参的Cq值的平均数相减（假设你同一个样本一次做了3个孔，就取3个孔的平均数），算出加样的差别。然后再把目标基因的Cq值相减，算出差别，再除以内参的差别，就得到目的基因的差别倍数。统计学分析要等到你重复至少3次以上完全独立的试验，再做PCR后...
遵化市弥诺回答： 新版的软件都叫Cq值,不叫Ct值了,不必理会.Ct值15-25是最好,10-30之间也接受.如果超过30了,得看一下复孔是否一致,如果一致,也接受.如果不一致,基本就是废的.
阿治15585593715问： 荧光PCR的cDNA的量不同会影响结果吗 - ？
遵化市弥诺回答： 相同样品相同基因cDNA的量不同,得到的Cq值就不同.基因的表达量少,Cq值就会偏大.如果这个基因的表达量很小且加入的cDNA量又不足的话就可能由于反应循环数过多导致反应体系中的酶活性下降,从而使得结果不稳定和可重复性差.所以想要得到一个可信的结果就需要使得得到的Cq值在一定的范围之内,不能太大也不能太小.
阿治15585593715问： q - pcr,关于cDNA加的多少量的问题 - ？
遵化市弥诺回答： 这个没有明确的规定,一般用的最多的是1-100ng/ul(工作浓度).浓度太低和太好都会影响扩增效率,但并不是绝对的.因为有一些基因表达水平极低,有一些在特殊情况下又极高.qPCR很多时候仅仅反映的是几个样品之间的趋势,而不是绝对值.
阿治15585593715问： cq 值 超过30 基因还能敲除么 - ？
遵化市弥诺回答： 基因敲除是将细胞基因组中某基因去除或使基因失去活性的技术.去除原核生物细胞、真核生物的生殖细胞、体细胞或干细胞基因组中的基因等.广义的基因敲除包括某个或某些基因的完全敲除、部分敲除、基因调控序列的敲除以及成段基因组序列的敲除.常用同源重组的方法.敲除的基因用以观察生物或细胞的表型变化,是研究基因功能的重要手段.
阿治15585593715问： 什么是总RNA 和Poly A RNA - ？
遵化市弥诺回答： 你说的实验应该是RT-qPCR,这个实验的主要目的就是检测RNA的含量的,所以一开始其实是很难给出一个具体的值的.通常建议根据所用的逆转录酶每个反应的RNA的量的大致需求,先完成逆转录反应,例如,下面就列出了某一种逆转录酶要求的模板范围.逆转录酶越好,这个范围就会越宽,主要是可以用的RNA量就可以更少.totalRNA——1pg-5μgpoly(A)RNA——0.1pg-500ngspecificRNA——0.01pg-500ng等到将RNA都逆转录为cDNA后,再进行qPCR的实验.这时候可以将cDNA稀释几个梯度,以获得理想的Cq值.
阿治15585593715问： 如何对qPCR数据进行统计分析 - ？
遵化市弥诺回答： 如果避免了预扩增,数据可转换成绝对的cDNA数量,否则数据分析可以Cq值来开展,因为每个细胞的转录本水平呈对数正态分布.一开始,可以各种方法对数据作图,此外,基本的统计分析也应开展(如阳性细胞的数量、平均值和偏差).细...
阿治15585593715问： ct值是什么意思 深入解析PCR检测中的关键参数ct值? - ？
遵化市弥诺回答： 总之,ct值是PCR检测中的一个关键参数,可以用来判断样本中目标基因的数量.在实际应用中,需要对PCR反应的效率进行校准,以保证检测结果的准确性.颤裂PCR技术是一种基于DNA扩增的方隐洞仿法,可用于检测病原体、基因突变、...
阿治15585593715问： poly(A) RNA 是什么意思 - ？
遵化市弥诺回答： 多聚腺嘌呤核糖核苷酸就是很多个A连在一起组成的RNA啦原核生物信使RNA的尾部就是POLY A
阿治15585593715问： 用qPCR验证RNA - Seq挑多少个基因合适 - ？
遵化市弥诺回答： 做完RNA-Seq测序之后,往往会用QPCR来验证一下结果.因为RNA-Seq测序数据得到的结果作为定量参考,参数的改变也会造成结果的不同.所以需要进行qPCR验证,表达水平的结果最终以实时定量PCR为准.一般需要验证基因的数目:20...
阿治15585593715问： 什么是qPCR引物? - ？
遵化市弥诺回答： 就是quantitative PCR(定量PCR) 引物 实时定量PCR可以用于DNA技术,RNA及蛋白质分析和诊断
