hat培养基筛选原理

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玫瑰组织培养的方法有哪些
培养基中添加蔗糖有增加丛芽数量的作用(Langford和wainwright,1987);加入低浓度的GA能进一步改善芽繁殖,95%的外植体能产生7个以上的不定芽(Rout等1990)。能提高芽繁殖数量的物质还有月桂酸甲酯(Voyiatzi等,1995)、乙烯(Kevers等,1992)等。诱导不定芽的培养基为MS培养基添加低浓度的激素BAP03~05mg\/...

生物破胶酶的发酵生产及其破胶性能研究
摘要 针对中低温油藏压裂破胶施工的需求,筛选出生物破胶酶生产菌株——地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)BG1,通过两水平试验设计确定了该菌株产酶培养基中的显著因素(碳源、有机氮源和无机氮源),在此基础上,又通过中心法则试验设计对该菌株的产酶培养基组成做进一步优化,最终确定了发酵培养基组成为4.08g\/L碳源,11....

微生物与自然界中物质循环的转换关系
菌种筛选主要步骤 调查研究及查阅充分的资料↓设计实验方案↓确定采集样品的生态环境采样↓确定特定的增殖条件增殖培养↓确定特殊的选择培养基及可能的↓定性或半定量快速检出法平板分离↓原种斜面↓确定发酵培养基础条件筛选↓初筛(1株1瓶)↓复筛(1株3~5瓶)↓结合初步工艺条件摸索再复筛(1株3~5瓶)↓3~5株↓...

用ATCC网站查培养基配方怎么查,比如ATCC medium1991,请告知具体方法,谢 ...
之后回车就能找到你要的菌种的信息了,我给你贴了图,你的细菌在ATCC上的编号是51935,然后找到它并打开,里面会有你细菌的相关信息,然后在Growth Conditions: 这栏里点击 ATCC medium1991: 就会出现他的培养基配方了,你自己试试看吧,要是还找不到的话,我再把配方发给你,希望对你有帮助 ...

如何初步判断配制的培养基正常,符合实验要求
琼脂粉般加15gLB固体培养基配置 LB固体培养基倒制培养基温度宜高否则冷却平板产量冷凝水 LB(Luria-Bertani)固体培养基 950ml ddH2O加入 胰化蛋白胨(tryptone) 10g;酵母提取物(yesat extract)5g;NaCl 10g 用1MNaOH调节pH值7.0定容至1L 加入15g琼脂粉 121℃20min高压灭菌待冷却至50-60℃倒...

肺炎支原体的培养基和血平板
M. pneumoniae cells were cultured at 37°C under a 5% CO2 atmosphere for 7 days in PPLO broth containing mycoplasma supplement-G (Oxoid) for the preparation of soluble M. pneumoniae antigens.配制PPLO固体培养基:PPLO肉汤21g\/L, 5%水解乳蛋白Hank‘s液400ml\/L,0.4%酚红5ml\/L,1.5%...

木质素如何出去
这些菌种可在稻草为唯一碳源的培养基中生长,具有各不相同的木质素增溶能力。生长所需的温度在27 ~69 ℃之间, 有6 种菌可在66 ℃下生长。González 等用新技术从富含木质素的造纸厂废水中筛选能降解木质素和木质素类芳香单体的细菌,发现并描述了一种新的细菌属( Sagittula) 。其中细菌S agittula ...

酵母双杂的自激活现象
在某些情况下,在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1ml的SD\/–Trp,接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD\/–Trp平板,在30℃下温浴,直至平板上的克隆相互粘在一起。用5ml 0.5X YPDA刮下每块板上的克隆,并收集到一管中,这样就可以使用这个细胞重悬液进行...

谁知道B11培养基以及BM培养基配方~ 急用~~
MS培养基配方 成分 分子量 使用浓度(mg\/L)大量元素 硝酸钾 KNO3 101.11 1900 硝酸铵 NH4NO3 80.04 1650 磷酸二氢钾 KH2PO4 136.09 170 硫酸镁 MgSO4.7H2O 246.47 370 氯化钙 CaCl2.2H2O 147.02 440 微量元素 碘化钾 KI 166.01 0.83 硼酸 H3BO3 61.83 6.2 硫酸锰 MnSO4.4H2O 223...

有没有关于基因敲除的论文啊
AT1又可细分为AT1a和 aT1b两个亚型,它们高度同源但组织分布不同,由于缺乏有效的方法来分别两者生理分工[12],Masaki等[13]用基因敲除培养出缺乏AT1a受体基因小鼠纯合子和杂合子与野生型相比,两种基因型小鼠的生长发育及心、脑、肾、血管组织结构正常,肾组织Ang-AT1受体结合为阴性,杂合子为野生型50%,杂合子及...

宗卖15013739428问: HAT选择培养基的作用是筛选出什么(在单克隆抗体制备过程中). -
贵港市复方回答:[答案] HAT选择培养基的作用是筛选出(杂交瘤细胞).HAT选择培养基含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶,其中氨基喋呤可阻断DNA合成的主要途径.主要途径阻断后,依靠应急途径即在HGPRT(次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)和TK(胸...

宗卖15013739428问: 脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么? -
贵港市复方回答: 放在选择性培养基上培养..杂交到的细胞有 3种 脾细胞和脾细胞, 脾细胞和瘤细胞, 瘤细胞和瘤细胞.3种 ..放在选择性培养基上连续培养. 比如说有什么脾细胞可以分泌出抗体那种抗原的物质...而其他细胞不能够抵抗..脾细胞和脾细胞 一般不会培养到50代..就会死了..放在选择性培养基上的瘤细胞和瘤细胞 没有相应的抗体 所以自动被消灭掉..脾细胞和瘤细胞..因为具有无限繁殖和有抗体产生 所以能够存活.存活下来的 就是合格的杂交瘤细胞.. 一般筛选2次...

宗卖15013739428问: 杂交瘤细胞怎么筛选分离方法 -
贵港市复方回答: 利用选择性培养基hat筛选hat培养基,用次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)配置,其中氨基蝶呤(A)能阻断dna合成的主要途径,而用于杂交的瘤细胞都是次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)或胸苷激酶(TK)活性缺陷细胞,而脾细胞中有这种酶,所以骨髓瘤细胞和瘤-瘤细胞会无法合成dna死去,而脾细胞和脾-脾都知道会无法无限长时间存活而死去,希望对你有帮助

宗卖15013739428问: 什么是hat选择系统,说明利用其筛选杂交瘤细胞的理论基础 -
贵港市复方回答: 楼主你好, 上清液中的我们关心的成分应该是杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体~ 希望对你有帮助~望采纳~谢谢~~

宗卖15013739428问: HAT培养基是什么培养基? -
贵港市复方回答: 用于筛选具有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRT)或胸苷激酶(TK)活性缺陷细胞的培养基.是含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)和甘氨酸的完全培养基.在氨基蝶呤(二氢叶酸类似物)存在下,这种酶缺陷的细胞不能通过核苷酸合成旁路合成次黄嘌呤和胸苷.HPRT和TK缺陷细胞可以在此培养基中生存.是常用的骨髓杂交瘤细胞选择性培养基.

宗卖15013739428问: 为什么HAT培养基可以把杂交瘤细胞选择出来 -
贵港市复方回答:[答案] 单克隆抗体技术中人工诱导小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,细胞将以多种形式出现,如脾细胞-瘤细胞、脾细胞-脾细胞、瘤细胞-瘤细胞、细胞多聚体、未融合的脾细胞和瘤细胞等,其中只有脾细胞-瘤细胞的融合体是有用的.正常...

宗卖15013739428问: 细胞融合问题请问两种细胞融合后,在筛选融合细胞是怎 -
贵港市复方回答: 选择性筛选的参照标准是自己定的,可以由融合前细胞的特性出发,找出其中之一的代谢特点.比如在筛选杂交瘤细胞时,B细胞是可以进行细胞外途径的DNA合成的,但是寿命很短.而骨髓瘤细胞是没有细胞外源合成DNA这一途径的.所以我们提供的培养基可以是阻断细胞内源合成DNA途径的选择培养基,这样,单一的瘤细胞会合成不了DNA而死亡,单一的B细胞在一段时间后,也死亡.剩下的只有需要的杂交瘤细胞了.这是经典的HAT选择培养基的原理.缺失基因的细胞,是不能正常代谢的,一般是会死亡的,但在某些特殊实验中,人工培养一些缺陷型细胞,以便于标记特征,便于筛选也是可以的.找出的代谢特点还可以包括,温度差异,PH差异等,很灵活,也很困难.

宗卖15013739428问: 怎么筛选稳定的高表达的杂交瘤细胞? -
贵港市复方回答: 单克隆抗体技术中人工诱导小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,细胞将以多种形式出现,如脾细胞-瘤细胞、脾细胞-脾细胞、瘤细胞-瘤细胞、细胞多聚体、未融合的脾细胞和瘤细胞等,其中只有脾细胞-瘤细胞的融合体是有用的. 正常的脾细胞在培...


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