96孔板细胞计数方法

作者&投稿:自洪 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

六孔板可以每孔加入不同的细胞?一共加五个孔?
你要进行细胞计数的~~用胰酶消化好后,把细胞悬浮在1ml培养基里,吸取5微升至1ml离心管中,加入45微升提前配好的含有台盼蓝的pbs,吹打均匀,然后用20微升的枪吸10微升至细胞计数板,显微镜下计数,计数后乘以10,此时的细胞数是1ml细胞培养皿中。

细胞周期检测方法即PI法的操作步骤
1. 细胞培养:取对数生长期的细胞,按1×106cells\/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内,进行所需的处理(比如加入药物),特定时间后终止培养,进行下一步的实验。2. 细胞固定: 800rpm离心5min,收集细胞沉淀,弃上清,用预冷PBS洗涤两次,加入预冷75%乙醇,于4℃固定4h以上。3. 细胞染色:1...

六孔板一个孔多少细胞
6孔板每孔种1.2*10^6细胞量。细胞量大于40是TCT报告单中的术语,意思是说取标本的时候所取的细胞量大于40%,说明标本取得好,达到了检查的要求。如果细胞量小于40%,那么在临床上所观察的标本是不合格的。另外建议每年都要做1次tct的检查及HpV的化验,并且最好是在月经干净3天到7天的时候检查,这...

毫无保留,教你2种细胞集落形成实验
2. 步骤一:细胞准备 - 取出贴壁率大于90%的对数生长期细胞,消化离心后,重悬并计数。3. 步骤二:接种与培养 - 实验分组,每个孔中加入1000个细胞,放入CO2培养箱中静待一周。待肉眼可见集落形成,取出6孔板,先用甲醇固定30分钟,再用0.1%结晶紫染色3分钟,洗净后用数码相机拍摄,光镜下精确计数...

平板克隆实验中途需要换液么
一、6孔板:1。将处于对数生长期的细胞胰酶消化后,完全培养基(基础培养基+10%胎牛血清)重悬成细胞悬液,并计数,2。细胞接种:于6孔板培养板中各实验组接种400-1,000个细胞\/孔(根据细胞生长情况确定,一般为700个细胞\/孔),3。继续培养到14天或绝大多数单个克隆中细胞数大于50为止,中途每隔3...

超详细细胞计数步骤
细胞存活率的测定 细胞计数的同时,我们还可以测定存活率。通过将细胞与台盼蓝染料混合,活细胞不会被染色,而死细胞则会被标记为蓝色。计数时,需考虑染料的稀释倍数,以此调整细胞总数的计算。步入自动化:铺板计数 对于大批量的细胞处理,96孔板是一种高效的选择。每个孔的布局和计算过程精确到微米级,...

请问如何将培养皿的细胞接种在六孔板中?心肌细胞不是原代培养么_百度知 ...
1、将细胞消化下来(胰酶消化的方法),离心、收集细胞沉淀、用PBS洗,再离心、收集细胞;计数后即可接种在各种规格的培养板;2、是啊。

悬浮细胞病毒转染铺6孔板要多少细胞
1、慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞以1×10^5\/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5\/孔左右。2、第二天,用含有6 μg\/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。3、(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)4小时后加入2ml新鲜培养基以稀释...

如何将细胞接种到六合板
我一般是一个25cm2的培养瓶种四个孔,种好之后放两天后再接着处理,其实我觉得在六孔板接种细胞方面还是可以有据可依的。不怕麻烦可依把细胞拿来计数,然后每个孔接种不同数量的细胞,然后观察细胞的生长情况,这样就可以得到自己的细胞比较准确的资料了。不过在接种板子的时候细胞生长容易出现一个现象,...

如何养细胞——细胞克隆形成实验
离心处理后,去除上清,加入新鲜培养基重新悬浮细胞,确保活性。使用台盼蓝染色法,精确计数细胞悬液中的活细胞数量,为接种密度把控提供依据。将细胞梯度稀释,如1×104\/mL,分别接种到6孔板的不同孔中,兼顾不同增殖潜力的细胞研究。定时换液,维持2周,观察细胞克隆形成过程。在实验尾声,用结晶紫染色...

萧会17396873279问: 生物化学上常用的“96孔板”上的孔数是怎么确定的,为啥如此不整? -
新兴县新雪回答: 作为一只生物在读…… 我只想说,因为要一般平行试验要设3组啊…… 所以要有一个3的倍数会比较好排孔 所以细胞版都是6,12,24,48,96,384 这些对我来说都是整数呢→_→ 买10块钱儿的饼要加个2块酸奶凑个整才开心好么→_→

萧会17396873279问: 细胞 在96孔板 怎么 挑取单个克隆细胞 -
新兴县新雪回答: 无限稀释法,就是铺到96板的一个孔,然后倍数稀释下去,到最后就会有一个细胞的孔,还有就是细胞计数,然后再铺96孔,也会出现一个细胞,但是对于挑单克隆来说,我觉得没必要单个细胞,单个细胞也不容易长起来,虽然挑克隆可能是混转的,但是不会影响实验需求.

萧会17396873279问: 96孔板培养板能否代替酶标板测吸光度? -
新兴县新雪回答: 博凌科为解答:1.最好是用酶标板,因为96孔板的各孔透光性不一致;2.拆成一条条的方便使用一些.MTT法计数细胞的相对数,可以对96孔板培养的细胞在用药物刺激后的直接计数;也可以把细胞制备成细胞悬液,加到96孔板中,然后加MTT孵育、 计数.所以,如果是前者,必须用培养板;如果是后者,可以用酶标板.平底的,酶标板好一些.

萧会17396873279问: 如何把六孔板细胞铺的均匀 -
新兴县新雪回答: 6孔板,采用将第一个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔一次类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多,...

萧会17396873279问: MTT 如何计算细胞活力 -
新兴县新雪回答: 设置用来计算活细胞数的对照孔没有?具体方法:将一定数量活细胞按照梯度稀释加入96孔板(注意设置复孔和空白孔;最好与你的实验细胞同板检测;否则重复性不好);加入MTT作用后测各孔OD值,做...

萧会17396873279问: 96孔板的使用注意事项 -
新兴县新雪回答: 和普通细胞培养一样,使用96孔板请注意你的细胞、培养基、用具无菌,尤其注意操作时气流方向,可能带菌的物品、手不要在上风处移动.

萧会17396873279问: MTT比色法测细胞活力的步骤 -
新兴县新雪回答: 四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝操作步骤一、接种细胞1、用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞,将细胞收集到含血清的培养基中. 2、离心细胞悬液,使细胞沉积下来.用培养基重悬细胞,计数. 3、将细胞稀释至2.5*103-50*103 个/ml,每...

萧会17396873279问: 台盼蓝染色原理 -
新兴县新雪回答: 细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA 结合,使其着色.而活细胞能阻止染料进入细胞内.故可以鉴别死细胞与活细胞.严格来说,台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性, 通常认为细胞膜丧失完整性,即可认为细胞已经死亡.这被称为染料排除测试. 通过显微镜很容易就能识别出死亡的被台盼蓝染色的细胞,并可使用细胞计数器进行计数.

萧会17396873279问: 实验细胞的活力测定MTS法 -
新兴县新雪回答: BrdU标记法 1.细胞以1.5*105/ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片),培养1天,用含0.4% FCS培养液同步化3天,使绝大多数细胞处于G0期. 2.终止细胞培养前,加入BrdU(终浓度为30μg/L),37℃,孵育40min. 3.弃培养液...

萧会17396873279问: 做SKOV3和SMMC - 7721的MTT实验,请问MTT实验中96孔板中的合适细胞数或者浓度. -
新兴县新雪回答: 博凌科为解答:调整细胞浓度至1*105/ml,分别加入96孔板,每孔加200μL使每孔细胞数目是2*104个.


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