蓝白斑筛选的原理及步骤
Blue-whitescreening蓝白斑筛选
【答案】： 指利用携带半乳糖苷酶α段重组质粒转化对应缺陷型大肠杆菌，产生β-半乳糖苷酶可将无色化合物X-gal切割出深蓝色的物质，使菌落产生颜色变化，从而根据颜色变化鉴定和筛选重组子的方法。
抗生素的蓝白斑插入失活筛选的原理。
可使菌落或噬菌斑呈兰色 你的空载提转进去的话，IPTG诱导lacZ' 表达α肽，互补体内缺陷的酶，然后可降解底物X-gal，产生蓝斑；如果你则载体的多克隆位点插入了片段，导致编码的α肽错误，或者不能编码α肽，也就不能产生正常功能的酶，无法分解X-gal，所以长白斑。
蓝-白斑筛选简介
在基因工程的工具箱中，蓝白斑筛选扮演着重要的角色。这种方法主要应用于重组菌的筛选过程。通常，我们从野生型的大肠杆菌开始，这种细菌天然具备产生β-半乳糖苷酶的能力。这种酶具有特殊的功能，能够将无色的化合物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）分解为半乳糖和一种深蓝色的化合物，即...
蓝白斑筛选挑蓝斑还是白斑
蓝斑。蓝白斑筛选是一种根据菌落颜色筛选重组子的方法，用于从细菌中筛选质粒，是通过在含有X-Gal-IPTG的LA培养基中，观察菌落颜色来筛选白色菌落中含有的重组子质粒，同时丢弃含有野生型质粒的蓝色菌落，所以挑选蓝斑。
蓝白斑筛选,怎样使蓝斑快速显色
选择正确的斑点：在开始蓝白斑筛选之前，第一步就是选择正确的斑点，这些斑点会最大化图案细节，使其更加清晰。1、选择正确的斑点：在开始蓝白斑筛选之前，第一步就是选择正确的斑点，这些斑点会最大化图案细节，使其更加清晰。2、调整斑点大小：在确定斑点位置后，接下来就要调整斑点的大小，以使图案...
简述α互补和蓝白斑筛选的原理
可将50ul的X-Gal和100 ulIPTG贮液直接加入到平板中，扩散到整个平板中，在37oC保温30分钟使液体扩散。IPTG溶于水中，贮液浓度为100mM，X- Gal溶于DMF，贮液浓度为50mg\/ml。IPTG和X- Gal需分装后保存在-20 oC，可保存2-4个月 重组质粒转化宿主细胞后，还需对转化菌落进行筛选鉴定。利用α互补...
求助弱弱的问如何挑取单菌落
1、培养皿底部向上，在酒精灯火焰20厘米内操作；2、操作时不要讲话，在无风处操作；3、挑斑器具要求无菌；4、挑选远离群菌落的单菌落，菌落不要过大；5、蓝白斑筛选原理，挑取大小合适的白斑即可。
蓝白斑筛选问题!!
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蓝白班筛选的实验试剂和步骤是什么?~~
我用的是DH5α甘油菌和PUC19做蓝白斑筛选，做了几次实验，(培养基是LB首先X-gal要避光保存，以免失效;其次培养时间确定够吗?我们前两天做的，
蓝白斑筛选适用方面
蓝白斑筛选通常结合抗性筛选进行，以增加筛选的准确性。在含有X-gal和抗生素的平板上，未转化的菌不具有抗性，无法生长；空载体转化的菌表现为蓝色，表明未成功重组；而目的重组菌因为α互补作用被阻断，表现为白色菌落，说明已成功筛选出目标基因的插入。这种筛选技术在基因工程实验中扮演了重要角色，帮助...
北江区蛇胆回答： 在这之前先说一下做蓝白斑筛选必备条件 (1)首先定义 LacZ:B(beta,打不出来,下同)-半乳糖苷酶 LacZ':含有B-半乳糖苷酶的启动子和5'端的编码的a肽链. 那么LacZ'是没有功能的(是指能表达没有功能的蛋白质),只有和失去正常氨基...
抄弯19492269309问： 基因克隆中蓝白斑筛选法筛选阳性克隆的原理. - ？
北江区蛇胆回答： 蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等.现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息.在这...
抄弯19492269309问： 蓝白斑筛选 - ？
北江区蛇胆回答： α-互补 的原理 载体上带有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸的编码序列.这个编码区中插入了一个多克隆位点,但并没有破坏lacZ的阅读框架,不影响其正常功能.E. coli DH5α菌株带有β-半乳糖苷酶C端部分...
抄弯19492269309问： 阳性克隆 - 简述分子克隆的基本步骤,试说明蓝白斑筛选阳性克隆的原理? ？
北江区蛇胆回答： 1.带有目的基因的DNA片段的获得2.重组DNA分子的构建3..重组DNA分子的构建转化和重组克隆的筛选4.特定重组克隆的鉴别
抄弯19492269309问： 简述信息包筛选的工作原理 - ？
北江区蛇胆回答： 包过滤是在IP层实现的,因此,它可以只用路由器完成.包过滤根据包的源IP地址、目的IP地址、源端口、目的端口及包传递方向等报头信息来判断是否允许包通过.过滤用户定义的内容,如IP地址.其工作原理是系统在网络层检查数据包,与...
抄弯19492269309问： 筛选阳性克隆的方法和原理?我需要至少两种方法和原理,两种. - ？
北江区蛇胆回答：[答案] 最常见的就是蓝白斑筛选,详细的楼主可参考这个http://baike.baidu.com/view/161221.htm 方法很多,除蓝白斑筛选外,像 菌落PCR验证:详见http://baike.baidu.com/view/4118663.htm 从细菌里提取质粒后双酶切验证:用构建重组质粒时的两种限制...
抄弯19492269309问： 大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因,其编码的产物β半乳糖苷酶在Xgal和IPTG存在时,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色,该过程称为蓝... - ？
北江区蛇胆回答：[答案] A、根据题意可知,蓝白斑筛选是菌落呈现的颜色,因此不属于个体水平的筛选,而属于种群水平的筛选,A正确;B、转化过程中,大肠杆菌通常用碳酸钙溶液处理,使其处于能吸收周围DNA的状态,B正确;C、用限制酶EcoRI切...
抄弯19492269309问： 筛选产β - 半乳糖苷酶的菌种 - ？
北江区蛇胆回答： 1.平板筛选培养基:胰蛋白胨15g,蛋白胨5g,K2HPO4 2.5g,酵母浸膏1g,NaCl 5g,琼脂15g,X-gal0.1g,蒸馏水1 000ml,pH 7.0~7.2.2.摇瓶筛选培养基:乳糖1%,胰蛋白胨15g,豆蛋白胨5g,K2HPO4 2.5g,酵母浸膏3g,NaCl 5g,蒸馏水1000...
抄弯19492269309问： 转化子筛选的原理是什么? - ？
北江区蛇胆回答： 抗性筛选,蓝白斑
