聚丙烯酰胺凝胶配方
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验步骤
样品缓冲液: 2ml浓缩胶缓冲液+1mL 87%甘油+0.1mg溴酚蓝,稀释至10mL,-20°C保存6个月。2. Native-PAGE配方:分离胶: 6.6ml双蒸水, 8.0ml 30%丙烯酰胺溶液, 5.0ml 1.5mol\/L Tris(pH8.8), 200μl 10%过硫酸铵溶液, 15μl TEMED。浓缩胶: 6.8ml双蒸水, 1.7ml 30%丙烯酰胺...
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验步骤
1、PAGE胶电泳缓冲液配置1)丙烯酰胺单体贮液:14.55g丙烯酰胺加上0.45g N,N'-甲叉双丙烯酰胺,先用40mL双蒸水搅拌溶解,直到溶液变成透明,再用双蒸水稀至50mL,过滤。用棕色瓶4°C保存备用。2)浓缩胶缓冲液贮液(0.5mol\/L Tris-HCl,pH6.8):3.03gTris溶解在40mL双蒸水中,用4mol\/L...
聚丙烯酰胺凝胶电泳原理
1、聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(以后简称单体)在水溶液中聚合而成的亲水性高聚物,是一种透明而不溶于水并有韧性的凝胶。2、制备凝胶时需要的原料是:丙烯酰胺,亚甲基双丙烯酰胺(双体,用作交联剂)在水溶液中用催化剂引发聚合。常用的催化剂有:二甲氨基丙腈(DMAPN);过硫酸铵,四甲基乙二...
配聚丙烯酰胺凝胶的时候加的试剂30%Acy是什么
丙烯酰胺(acrylamide,ACR)。 30% acrylamide-bisacrylamide(丙烯酰胺:双丙烯酰胺=29:1)的水溶液是你说的那个东西,标准的叫法是30%Acr-Bis,但有时为了简便就直接叫30%ACR了,不过为了与丙烯酰胺区别开(毕竟还含有双丙烯酰胺嘛)就把y也加上了。
水凝胶的制法
一种保水凝胶的制法,即先将氢氧化钠溶于水中,并加入丙烯酸进行预处理;再依次加入玉米淀粉、丙烯酰胺和碳酸钙,搅拌加温反应后,加入引发剂进行接枝聚合反应;然后将反应后的液体倒入模具中,恒温干燥即可。其产品组分(重量百分比)包括:玉米淀粉4.5-4.7,丙烯酸21.4-22.5,丙烯酰胺9-9.5,过...
聚丙烯酰胺凝胶为什么要引发剂?
聚丙烯胺凝胶由单体丙烯酰腋甲叉双丙烯酰胺聚合而成,催化聚合的常用方法有两种: 化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(AP)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGE ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。
凝胶色谱聚丙烯酰胺凝胶
聚丙烯酰胺凝胶是一种合成的凝胶,主要由丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺通过交联剂连接而成。通过控制交联剂的用量,可以制造出不同型号的凝胶,孔隙大小随交联剂含量增加而减小。生物胶-P Bio-Gel P是其常见的商品形式,由日本Tosoh的TSKGEL pw系列提供,适用于蛋白和多糖的纯化。聚丙烯酰胺(PAM)分子量范围...
怎样制备聚丙烯酰胺凝胶?
配制 Tris- 甘氨酸 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液 溶液成分 不同体积( ml )凝胶液中各成分所需体积( ml )5 10 15 20 25 30 40 50 6% SDS-PAGE 水 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9 21.2 26.5 30% 丙烯酰胺溶液 1 2 3 4 5 6 8 10 10% SDS 0.05 0.1...
sds-page凝胶电泳原理
SDS-PAGE凝胶电泳技术首先在1967年由Shapiro建立,其原理:聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺在催化剂过硫酸铵,N,N,N’,N’四甲基乙二胺作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。由于SDS-PAGE可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或...
有人有western blot的Tris-乙酸胶的配方吗?还有相关电泳液的配方?急...
配制不同体积和浓度凝胶所需各成分的体积\/mL 5 10 15 20 25 30 40 50 10 %胶 水 1.9 4.0 5.9 7.9 9.9 11.9 15.9 19.8 30 %丙烯酰胺混合液 1.7 3.3 5.0 6.7 8.3 10.0 13.3 16.7 1.5 mol\/L Tris(pH8.8)1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 10.0 12.5 10...
鼎城区十味回答: 去百度文库,查看完整内容>内容来自用户:艾渠5*TBE(组份浓度:5*TBE,pH 8.3;配制量:1 L):称取53.9 g Tris,27.5 g硼酸,量取20 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0),置于1 L烧杯中;加入约800 ml超纯水,充分搅拌溶解;加超纯水将溶液定...
赧雄15839933134问: 聚丙烯酰胺凝胶制备 - ?
鼎城区十味回答: (1)30%丙烯酰胺溶液 取丙烯酰胺60g与亚甲基双丙烯酰胺1.6g,加水至 200ml,滤纸滤过,避光保存. (2)分离胶缓冲液 取三羟甲基氨基甲烷36.3g、加水70ml,用盐酸调节pH值至8.8,加水至100ml. (3)浓缩胶缓冲液 取三羟甲基...
赧雄15839933134问: 怎样把聚丙烯酰胺制备成凝胶 - ?
鼎城区十味回答: 聚丙烯酰胺易溶于冷水,质量分数超过10%以后,会形成凝胶状结构
赧雄15839933134问: 怎样制备聚丙烯酰胺凝胶?在制备时,所用试剂都有哪些,配制时各试剂的比例是多少以及在配制过程中都需要注意哪些问题? - ?
鼎城区十味回答:[答案] 聚丙烯酰胺凝胶电泳凝胶的配制 配制 Tris- 甘氨酸 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离胶所用溶液 溶液成分 不同体积( ml )凝胶液中各成分所需体积( ml ) 5 10 15 20 25 30 40 50 6% SDS-PAGE水 2.6 5.3 7.9 10.6 1...
赧雄15839933134问: 聚丙烯酰胺凝胶的PAM - ?
鼎城区十味回答: 聚丙烯酰胺简称PAM、结构式为[-CH2-CH(CONH2)]n-,分子量100~ 500万.聚丙烯酰胺主要有两种商品形式,一种是粉末状的,另一种是胶体,还有聚丙烯酰胺乳液(上海合成树脂研究所研制).易溶于冷水,速度很慢,高分子量的聚丙烯酰...
赧雄15839933134问: 聚丙烯酰胺凝胶的化学式是? - ?
鼎城区十味回答: 聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成凝胶,是以丙烯酰胺为单位, 由甲叉双丙烯酰胺交联成的,经干燥粉碎或加工成形制成粒状,控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶.交联剂越多,孔隙越小. 聚丙烯酰胺简称PAM,分子式:[C3H5ON]n ,结构式为[-CH2-CH(CONH2)]n-,分子量100~ 500万.
赧雄15839933134问: 6% 聚丙烯酰胺变性凝胶配方? - ?
鼎城区十味回答: 30%聚丙烯 24ml 10*TBE 8ml 双蒸水 40ml APS 650ul TEMED 80ul左右 初始电压250V大约15分钟,之后180V跑两个小时就可以了!
赧雄15839933134问: 8%聚丙烯酰胺凝胶中过硫酸铵,TEMD,5*TBE,水如何配比 - ?
鼎城区十味回答: 我用的是这个 你可以试试 母液:39gAcr+1gBis定容100ml 配成40%母液母液 12MLDDh2o 36ML5*TBE 12MLTEMED 30UL20% APS 300UL
赧雄15839933134问: 6% 聚丙烯酰胺凝胶是什么意思 - ?
鼎城区十味回答: 6%是泡药比例,例如1000ml就加60g的聚丙烯酰胺,百分之六的比例泡出来的聚丙烯酰胺就是胶体状的了.
赧雄15839933134问: 凝胶酶谱的SDS聚丙烯酰胺凝胶和western中的配制方法有什么区别? - ?
鼎城区十味回答: 凝胶酶谱的SDS-PAGE含0.1%明胶 配方: 分离胶 ddH2O 4.5ml 30%储备胶(0.8%甲叉+29.2%丙烯酰胺) 1.5mol/l Tris(PH 8.8) 10% SDS 10%过硫酸铵 TEMED 1%明胶(1g明胶-->100ml,37°C水浴溶解)0.5ml浓缩胶 ddH2O 30%储备胶 1mol/...