聚丙烯酰胺凝胶为什么要引发剂?

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过硫酸铵就是引发剂,而TEMED可以催化过硫酸铵产生自由基,从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。

聚丙烯胺凝胶由单体丙烯酰腋甲叉双丙烯酰胺聚合而成,催化聚合的常用方法有两种: 化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(AP)为催化剂,以四甲基乙二胺(TEMED)为加速剂。

聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PAGE ,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术,用于分离蛋白质和寡核苷酸。

扩展资料:

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳经常应用于提纯过程中纯度的检测,纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一条带,但如果蛋白质是由不同的亚基组成的,它在电泳中可能会形成分别对应于各个亚基的几条带。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高的灵敏度,一般只需要不到微克量级的蛋白质,而且通过电泳还可以同时得到关于分子量的情况,这些信息对于了解未知蛋白及设计提纯过程都是非常重要的。

参考资料:百度百科-聚丙烯酰胺凝胶电泳




...聚丙烯酰胺凝胶在相对较高温度下凝胶较快,为什么?
琼脂糖凝胶凝结是物理过程,其中的琼脂糖长链在整个过程中没有变化,有所变化的是氢键等次级键的结合情况。温度越低,氢键结合越牢固。聚丙烯酰胺凝胶的凝结是化学过程,其中的丙烯酰胺单体通过化学反应聚合成高聚物,化学反应的特点就是温度越高,反应速度越快。

聚丙烯酰胺凝胶聚合的影响因素?
1、AP、核黄素、TEMED:增加AP和TEMED可加快聚合速率,但过量的AP和TEMED会引起电泳时烧胶和谱带变形。应选择合适的配方使聚合在40-60min内完成。2、pH:碱性条件下聚合快,但碱性过强时胶硬而脆,需高pH时应减少AP和TEMED用量,制酸性胶可加AgNO3等促进聚合。3、温度:温度高聚合快,但高浓度凝...

使SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳具有高分辨率的三个因素是什么
使SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳具有高分辨率的三个因素是:1、电荷效应;2、分子筛效应;3、浓缩效应。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS),N,N,N’,N’ 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以...

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理
2006年生化考研题目,简答第五题。蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验原理 聚丙烯酰胺凝胶,是由丙烯酰胺单体(Acr)和少量的交联剂N,Nˊ-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂(过硫酸胺或核黄素)和加速剂(N, N,NˊNˊ-四甲基乙二胺)的作用下聚合交联成的三维网状结构的凝胶。以此凝胶为支持物的电泳称...

聚丙烯酰胺凝胶的介绍
丙烯酰胺单体和甲叉双丙烯酰胺交联剂按一定比例混合,在催化剂(如过硫酸铵)作用下聚合而成的交叉网状结构的凝胶,使其产生分子筛效应。凝胶孔径大小可以通过制备时所使用的浓度和交联度控制。常用做层析介质、电泳分离支持材料等。

为什么琼脂糖凝胶在低温下凝胶而聚丙烯酰胺凝胶在高温下凝胶
琼脂糖凝胶是固体,只不过熔的时候加热了,冷却下来自然就凝胶了 聚丙烯酰胺凝胶是丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺在催化剂加速剂作用下交联形成的,高温催化活性强,所以凝的快。其实温度低点也能凝,就是慢点

聚丙烯酰胺凝胶电泳
而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。该技术最初由shapiro于1967年建立,他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂(SDS即十二烷基硫酸钠)后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小(可以忽略电荷因素)。作用SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂...

聚丙烯酰胺凝胶作为电泳支持物,有何优缺点?
3.聚丙烯酰胺的作用:丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否,与促凝剂及环境密切相关。4. 出现拖尾现主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。 5.通常胶在30MIN-1H内凝。如果凝的太慢,可能是TEMED,APS剂量不够或者失效。APS应该现配现用,TEMED不稳定,易被...

sds聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量是什么?
如下:SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键,并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺 (简称Acr) 和交联剂N,N’—亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂作用下,聚合...

有谁知道电泳
而SDS-PAGE仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白质。该技术最初由shapiro于1967年建立,他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小(可以忽略电荷因素)。1.大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophor...

藁城市18955263699: SDS - 聚丙烯酰胺凝胶的聚合原理是什么 -
卢食八味: 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法.在这种支持介质上可根据被分离物质分子大小和分子电荷多少来分离. 聚丙烯酰胺凝胶有以下优点: ①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N,N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子...

藁城市18955263699: 在SDS - PAGE中,配胶时需加入TEMED和过硫酸铵,它的作用是什么?但将凝胶液加入在制胶器后需在其上慢慢加入一层乙醇或异丙醇或水,其目的是什么? -
卢食八味:[答案] 聚丙烯酰胺(PAGE)是由丙烯酰胺聚合形成的高分子 这个聚合反应是自由基聚合,需要有引发剂产生自由基将反应引发 过硫酸铵就是引发剂,而TEMED可以催化过硫酸铵产生自由基,从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合.

藁城市18955263699: 简述聚丙烯酰胺凝胶聚合的原理及如何调节凝胶的孔径 -
卢食八味: 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶为载体的一种区带电泳.该凝胶由丙烯酰胺(Acr)和交联剂N,N—甲叉双丙烯聚酰胺(Bis)聚合而成.聚丙烯酰胺凝胶电泳利用电泳和分子筛的双重作用分离物质. Acr和Bis单独存在或混合在一起时是稳定的,但在具有自由基团体系时就能聚合.引发自由基团的方法有化学法和光化学法两种.化学法的引发剂是过硫酸胺(Ap),催化剂是四甲基乙二胺(TEMED);光化学法是以光敏感物核黄素来代替过硫酸胺,在紫外光照射下引发自由基团.采用不同浓度的Acr、Bis 、A p、TEMED使之聚合,产生不同孔径的凝胶.因此可按分离物质的大小,形状来选择凝胶浓度.

藁城市18955263699: SDS - 聚丙烯酰胺凝胶原理 -
卢食八味: SDS使蛋白质变性,变成条状分子.消去了分子形状差异.在胶中的移动速度取决于电压和分子量大小. 不同浓度聚丙烯酰胺孔径不同.浓度大的交联程度大,孔径小,分离的分子小. 分子量大的跑得慢,分子量小的跑得快.染色脱色,紫外观察.根据条带可知有几种蛋白.根据marker还可知道蛋白的分子量.

藁城市18955263699: 聚丙烯酰胺凝胶电泳预电泳相关问题1.为什么要预电泳?2.预电泳的条件是什么? -
卢食八味:[答案] 预电泳是除去凝胶中没有聚合的单体和双体和聚合引发剂,提高分辨率,电泳30-60分钟后上样

藁城市18955263699: 聚丙烯酰胺凝胶的化学式是? -
卢食八味: 聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成凝胶,是以丙烯酰胺为单位, 由甲叉双丙烯酰胺交联成的,经干燥粉碎或加工成形制成粒状,控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶.交联剂越多,孔隙越小. 聚丙烯酰胺简称PAM,分子式:[C3H5ON]n ,结构式为[-CH2-CH(CONH2)]n-,分子量100~ 500万.

藁城市18955263699: 为什么用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白变性 -
卢食八味: 需要用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,一般是加入SDS,有多条肽链的蛋白质由于变性彼此分离,又因为不同的分子量在凝胶的迁移速度不同,因此形成不同的条带.

藁城市18955263699: 聚丙烯酰胺凝胶聚合的影响因素? -
卢食八味: 最重要的是引发体系的确定,不同型号的聚丙烯酰胺产品即有相同的影响因素,比如去离子水的纯度,单体的活性.氮气保掮,PH值,等.不同的因素就是功能单体比例及引发体系中药品配方,当然同一配方在工业化生产中由于环境因素的影响也会不同,比如冬季和夏季生产就有很大的区别.

藁城市18955263699: 啥能加速聚丙烯酰胺凝胶 -
卢食八味: 1 忘记加催化基过硫酸铵,或者过硫酸铵失效,最好现配现用;2 忘记加加速剂TEMED;3 溶液的pH不对,偏酸性.4 温度过低过硫酸铵-TEMED(四甲基乙二胺)系统 :在Acr 和Bis的溶液中放入这个催化系统后,过硫酸铵[(NH4)2S...

藁城市18955263699: 絮凝剂聚丙烯酰胺为什么会变黄? -
卢食八味: 你用的是氧化还原体系的引发剂吧.主要是引发剂残留造成的.另外如果你的单体不纯,里面有铁离子,或者使用丙烯酸共聚,也有可能发黄.

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