sds-page凝胶电泳原理
SDS-PAGE凝胶电泳原理是聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和交联剂N，N’一亚甲基双丙烯酰胺在催化剂过硫酸铵，N，N，N’，N’四甲基乙二胺作用下，聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。
SDS-PAGE凝胶电泳技术首先在1967年由Shapiro建立，其原理：聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和交联剂N，N’一亚甲基双丙烯酰胺在催化剂过硫酸铵，N，N，N’，N’四甲基乙二胺作用下，聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。
由于SDS-PAGE可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度，因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度，如果被鉴定的蛋白质样品很纯，只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白质，那么SDS-PAGE后，就只出现一条蛋白质区带。SDS-PAGE可分为圆盘状和垂直板状、连续系统和不连续系统。
SDS-PAGE凝胶电泳的特性
1、在一定浓度时，凝胶透明，有弹性，机械性能好。
2、化学性能稳定，与被分离物不起化学反应，在很多溶剂中不溶。
3、对pH和温度变化较稳定。
4、几乎无吸附和电渗作用，只要Acr纯度高，操作条件一致，则样品分离重复性好。
5、样品不易扩散，且用量少，其灵敏度可达10-6ug。
6、凝胶孔径可调节，根据被分离物的分子量选择合适的浓度，通过改变单体及交联剂的浓度调节凝胶的孔径。
7、分辨率高，尤其在不连续凝胶电泳中，集浓缩、分子筛和电荷效应为一体。因而较醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖电泳等有更高的分辨率。
以上内容参考：百度百科-SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
PAGE胶是什么
凝胶。溶胶或溶液中的胶体粒子或高分子在一定条件下互相连接，形成空间网状结构，结构空隙中充满了作为分散介质的液体（在干凝胶中也可以是气体，干凝胶也称为气凝胶），这样一种特殊的分散体系称作凝胶。没有流动性。内部常含有大量液体。例如血凝胶、琼脂的含水量都可达99%以上。可分为弹性凝胶和脆性凝胶...
SDS-PAGE 电泳后如何将凝胶溶解掉?
或者用kit，比如Nanosep®
中学化学的英文术语
疏水效应 hydrophobic effectSDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE 毛细管电泳(capillary eletrophoresis, CE)离子交换层析 ion exchange chromatography同源蛋白 homologous protein 构象conformation构象角 conformatiomal angle 糖脂(glycolipid)糖基甘油酯(glycosylglyceride)鞘糖脂(glycosphingolipid)脑苷脂(cerebroside)N-乙酰神经...
常见的融合蛋白表达标签有哪些呢?
在大多数情况下GST融合蛋白是完全或部分可溶的。 纯化:该表达系统表达的GST标签蛋白可直接从细菌裂解液中利用含有还原型谷胱甘肽琼脂糖凝胶亲和树脂进行纯化。GST标签蛋白可在温和、非变性条件下洗脱,因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。GST在变性条件下会失去对谷胱甘肽树脂的结合能力,因此不能在纯化缓冲液中加入强变性剂...
跪求实验方案急。关于植物小分子多肽的提取分离和分析 最好用到高效...
应用SDS-PAGE显示小分子多肽SDS-PAGE在分离、鉴定和纯化蛋白质方面有着广泛应用,其有效分离范围取决于聚丙烯酰胺的浓度和交联度,其孔径随着双丙烯酰胺与丙烯酰胺比率的增加而减小,比率接近于1:20时,孔径达到最小值。分子量低于10kD的小分子肽类,即使用较高浓度的聚丙烯酰胺凝胶的SDS-PAGE也不能完全分离,或是显不...
生物化学实验技术目录
实验九：DNA的琼脂糖凝胶电泳，观察DNA分子的迁移速度。实验十：肝糖原的提取与鉴定，学习糖类物质的处理和识别。第二部分：综合性实验实验十六：凯氏定氮法测定蛋白质含量，提升定量分析技能。实验十七：DS-PAGE测定蛋白质相对分子质量，理解电泳技术的应用。实验十八：疏水层析纯化α一淀粉酶，实验蛋白质...
PAGE胶是什么
称为SDS-PAGE.若在凝胶中加入两性电解质产生pH梯度,用以测定蛋白质等电点称为聚焦电泳；若使凝胶产生一定的浓度梯度,适用于蛋白质分子量测定,称为梯度凝胶电泳.电泳方式常用单向电泳,亦可使用两种原理不同的电泳如-DS-PAGE和聚焦电泳结合起来进行双向电泳.电泳装置多采用垂直板型,操作简便.
跪求实验方案急。关于植物小分子多肽的提取分离和分析 最好用到高效...
为了能在SDS-PAGE上显示测定小分子量的多肽,通常采取两种方法:一是增加凝胶的浓度和交联度,在制胶时加入一些可以降低聚丙烯酰胺凝胶网限孔径的溶质分子,使用尿素、甘油或蔗糖等物质;二是选择缓冲液中的拖尾离子的种类和浓度以达到改善多肽的分离效果。操作步骤1.电泳缓冲液的配制如下表所示缓冲液Tris(mol\/L)Tricine(...
万宝迪扶： SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N'一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,N,N',N' 四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此...
邻水县17662753402： 请问能否用最通俗的话去解释SDS凝胶电泳的原理? - ？
万宝迪扶： 最大的不同是 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)用的蛋白质不做任何变性处理 SDS-PAGE中的SDS是十二烷基磺酸钠,是蛋白质变性剂,SDS能拆散蛋白质的折叠结构,然后沿伸展的多肽链的表面吸附.使肽链带净负电荷,蛋白质在电场中的泳动速度仅与蛋白质颗粒大小有关.
邻水县17662753402： SDS - PAGE电泳的工作原理 - ？
万宝迪扶：[答案] SDS-PAGE:蛋白质的相对分子质量决定了SDS-蛋白复合物在凝胶电泳中的迁移率,聚丙烯酰胺凝胶中的去垢剂SDS带有大量的负电荷,与之相比,蛋白质所带电荷量可忽略不计.因此,蛋白质在SDS凝胶电场中的运动速度和距离完全取...
邻水县17662753402： SDS - PAGE电泳的原理是什么? - ？
万宝迪扶：[答案] 作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷. 而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离...
邻水县17662753402： SDS - PAGE原理 分子生物学 - ？
万宝迪扶：[答案] SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基磺酸钠), SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中,...
邻水县17662753402： SDS - 聚丙烯酰胺凝胶电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳原理上有何不同?如题说具体点 - ？
万宝迪扶：[答案] 最大的不同是 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)用的蛋白质不做任何变性处理 SDS-PAGE中的SDS是十二烷基磺酸钠,是蛋白质变性剂,SDS能拆散蛋白质的折叠结构,然后沿伸展的多肽链的表面吸附.使肽链带净负电荷,蛋白质在电场中的泳动速度...
邻水县17662753402： SDS - 聚丙烯酰胺凝胶原理 - ？
万宝迪扶： SDS使蛋白质变性,变成条状分子.消去了分子形状差异.在胶中的移动速度取决于电压和分子量大小. 不同浓度聚丙烯酰胺孔径不同.浓度大的交联程度大,孔径小,分离的分子小. 分子量大的跑得慢,分子量小的跑得快.染色脱色,紫外观察.根据条带可知有几种蛋白.根据marker还可知道蛋白的分子量.
邻水县17662753402： 解释聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理,最好清晰点 - ？
万宝迪扶： 聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳是以聚丙烯酰胺凝胶做支持物的一种区带电泳,由于此种凝胶具有分子筛的性质,所以本法对样品的分离作用,不仅决定于样品中各组分所带净电荷的多少,也与分子的大小有关.其次,聚丙烯酰胺凝胶电泳还有一种...
邻水县17662753402： SDS - PAGE测定蛋白质分之量的基本原理是什么?简述一下主要步骤?同志们帮帮忙,我出200分 - ？
万宝迪扶： 原理SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二烷基磺酸钠), SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白...
邻水县17662753402： SDS - PAGE和分子筛过滤层析测定蛋白质分子量在原理和方法上有何不同. - ？
万宝迪扶： sds分离靠的是在电场中蛋白质分子跟page的结合后的分子量大小从而在凝胶中跑的速度不同而分开的. 分子筛是根据不同分子量的分子大小不同,从而进行蛋白质分离,达到测量分子量的目的的. SDS-PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳,作用:...
