影响pcr检测结果的因素

作者&投稿:将良 (若有异议请与网页底部的电邮联系)

pcr 是什么意思 医疗?
虽然PCR技术在医疗领域得到了广泛应用,但也需要注意它的局限性。首先,PCR检测结果存在假阳性或假阴性的可能性,因此需要与其他检测方法相结合进行分析;其次,PCR技术需要丰富的实验室条件和专业技能的支持,成本也相对较高。因此,在医疗实践中,需要针对不同的疾病和病情选择合适的检测方法,综合考虑利弊...

pcr假阳性是什么意思
PCR假阳性是指在进行多聚酶链式反应(PCR)检测时,结果显示样本中存在病原体的DNA,但实际上该样本中没有病原体或病原体的数量过低,无法引起感染。 PCR假阳性可能由多种原因造成,包括样本质量、污染、标记物的选择和PCR条件等。由于PCR检测广泛应用于许多医学领域,正确地识别PCR假阳性至关重要,以...

pcr需要注意的问题
Mg2+浓度:Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特 异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。反应体积的改变:通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul,应用多大体积进行PCR扩增,是根据科研和临床检测不同目的而设定,在做小体积如20ul ...

RT-PCR中cDNA的量多了会不会导致没有条带
RNA甲醛变性电泳只是检测RAN的完整性(是否有讲解),而对其提取的质量(有无蛋白质、糖类污染)、RNA浓度,则需要分光光度计来检测。孵育的目的,在于使其在某一情况下(如加热),使RNA分子呈现一致或类似的结构状态,那样再跑电泳,则会发现RNA完整性很好。影响PCR的结果很多,核心是引物(特异性)、...

影响FFPE样本RNA质量的因素
1.4、逆转录引物的选择影响RT-PCR的检测结果 2、Influence of Fixation Time 2.1、固定时间长不直接导致RNA片段化,但RT-PCR产物的长度受影响 2.2、固定时间长可能致蜡块保存时RNA片段化速度更快 3、Influence of Specimen Size 3.1、固定时组织厚,包埋后提取的RNA质量差,效果显著 4、RNA from Pathology Samples 4....

送去测序前pcr产物检测时没换枪头会影响测序结果吗
你没换枪头前加的别的样品吗?加的别的样品会的,送出去测序他们会给你扩增的

PCR的原理是什么 的原理是什么,它有什么用途
用途:1、核酸的基础研究:基因组克隆 2、不对称PCR制备单链DNA用于DNA测序 3、反向PCR测定未知DNA区域 4、反转录PCR(RT-PCR)用于检测细胞中基因表达水平、RNA病毒量以及直接克隆特定基因的cDNA 5、荧光定量PCR用于对PCR产物实时监控 6、cDNA末端快速扩增技术 7、检测基因的表达 8、医学应用:检测细菌...

荧光pcr检测原理
荧光染料的优点:使用简便;可以与任何PCR产物结合;价格便宜;荧光染料的缺点:不能区分不同的双链DNA 引物二聚体会影响检测的敏感性 非特异性产物会影响结果的敏感性 引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线 (Melting curve) 进行识别,进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。总的来说...

定量PCR实验后,一般要得到什么样的结果?
将PCR和检测做成一体,就形成了定量PCR仪。还可以与荧光技术结合,同时在每个扩增过程都能实施监控。【应用】 :定量PCR可以得出准确的定量结果,改变了PCR只用作微量物定性测定的历史,并可进行动态检测和病程疗效分析。同时让质控的建立成为可能,以保证结果的准确性。能对基因突变进行分析。

核酸检测一般多少时间出结果啊?
使用专门的快检仪器,核酸检测的时间要快很多,一般检验的样本在0.5~1.5小时之间出结果。对于一般医院核酸检测来说,使用的是PCR这种检测方式。因为一个批次可以同时进行多个样本的检测,可以更好的减少医院资源的浪费,减少医院的工作量。核酸快速检测主要适用于特殊情况,一般医院都会特事特办。使用快检...

桓珍17711314543问: PCR结果不稳定的原因是什么 -
西双版纳傣族自治州百令回答:[答案] 1、操作者不熟练,加样时存在取样误差 2、PCR仪器不稳定,如温度,湿度影响 3、试剂不稳定,如你的DNA模板降解,Taq酶活性下降等

桓珍17711314543问: 影响PCR扩增结果的因素 -
西双版纳傣族自治州百令回答: 最重要的应该就是引物的特异性了,要不然连PCR出来的片段是不是所需的片段都不能确定...引物的设计很有技巧的,既要保证特异性,又不能过长,两端的引物退火温度还要相似才好.现在有很多软件可以帮助你设计软件,推荐Primer Premier 5,很好用~ ps 注意事项就是东西都要加全了,一般要设计对照组,PCR仪的稳定性和你使用的不同公司的酶的效率很不同,不成功也不要灰心.反应的条件不是所有都一样的,你要看你使用的那个公司的酶给的说明书,上面很详细~生物实验失败还是很常见的,千万不要轻易放弃,耐心找原因,祝你成功~!

桓珍17711314543问: 影响pcr反应效率的因素有哪些 -
西双版纳傣族自治州百令回答: 影响 PCR 的主要因素 PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA,然后才进行自动热循环,最后进行产物鉴定与分析.引物设计与合成目前只能在少数技术力量较强的研究院、所进行,临床应用只需购买PCR检测试剂盒就可开展工...

桓珍17711314543问: 影响PCR反应效率的因素有?以及如何有效地提高PCR反应效率? -
西双版纳傣族自治州百令回答:[答案] 引物的设计:引物的设计不好可能产生非特异,造成假阳性. 聚合酶:酶是影响PCR的关键,酶的失活造成PCR的失败,不同的酶扩增的片段也有差异. 其次就是PCR反应体系,不现成份的尝试对PCR也造成影响.例如Mg2+,dNTP,

桓珍17711314543问: 有哪些条件可影响PCR反应 -
西双版纳傣族自治州百令回答: PCR反应条件为温度、时间和循环次数.温度与时间的设置: 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点.在标准反应中采用三温度点法,双链DNA在90~95℃变性,再迅速冷却至40 ~60℃,引物退火并结合到靶序列上,然后快速...

桓珍17711314543问: 影响PCR的主要因素是什么?
西双版纳傣族自治州百令回答: 一般错掺率为1.25*10-4~1*10-5(4*dNTPs浓度分别为200μmol/L,Mg2为1.5mmol/L,在55℃退火)

桓珍17711314543问: 影响PCR最终产物的因素有哪些 -
西双版纳傣族自治州百令回答: pcr扩增产物的特异性与哪些因素有关 pcr产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失. 假阴性,不出现扩增条带 pcr反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④pcr循环条件.寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究. pcr非特异性扩增指的是你进行pcr所扩增出来的条带不是所要的,引物与模板在非目的条带处有错配,导致延伸产物不是目的条带.非特异性扩增在琼脂糖电泳时可以看到在目的条带外出现了其他条带. 引起非特异性扩增的原因有很多,mg2+浓度过高、退火温度太低、引物特异性不好等等原因

桓珍17711314543问: 百度同一个样 PCR 结果为什么不同
西双版纳傣族自治州百令回答: 我也经常做pcr,我觉得很多因素都会影响到PCR结果,如温度,酶的量,酶的活性,主要还有模板的质量. 向我们做RNA的PCR 把样品从冰箱里拿出来每次冻融之后PCR结果都不太一样,因为样品会被降解,效果一次不如一次,而酶经过反复冷冻活性也会降低


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