去基因组反转录步骤
逆转录病毒的基因组是? A DNA单倍体 B、RNA单倍体 C、DNA二倍体 D...
逆转录病毒，又称反转录病毒，属于RNA病毒中的一类，它们的遗传信息不是储存在脱氧核糖核酸（DNA），而是储存在核糖核酸（RNA）上，此类病毒是已知的唯一基因组不是单倍体的病毒。逆转录病毒基因组为二倍体，两条相同的单股正链RNA，其两端为长末端重复序列（LTR），内含有较强启动子和增强子，对病毒...
反转录病毒载体(trna是基因转录的产物吗)
2、反转录病毒的引物。3、反转录病毒的反转录过程以什么为引物。4、反转录病毒载体。1.因为这两种东西的分子机制和序列都有明显的同源性，既有可能是反转录转座子在进化过程中获得了一些蛋白质，从细胞里脱离出来成为逆转录病毒。2.也有可能是反转录病毒进入细胞以后整合到基因组里成了逆转录转座子。3...
转基因动物的转移方法
但需要贵重精密仪器,技术操作难度大,并且外源基因的整合位点和整合的拷贝数都无法控制,易造成宿主动物基因组的插入突变,引起相应的性状改变,重则致死。反转录病毒感染法反转录病毒具有侵入宿主细胞并整合于细胞染色体DNA的能力。将外源基因DNA插入反转录病毒载体,通过辅助细胞包装成高感染度的病毒颗粒,感染胚胎后,将感染...
怎么在基因组中找反转录转座子
怎么在基因组中找反转录转座子 反转座子的前身有可能是一种反转录病毒,但是既然是叫做转座子,它的活动范围就只限于托生的细胞内了,不能像反转录病毒那样从老的宿主细胞出来再感染新的细胞再通过反转录插入新细胞的基因组并在里面活动.反转座子只能固定在所在的细胞里通过反转录扩增,不能出来.直到1980年...
反转录时候水加多了有影响吗?
图源：百度百科 一、RT-PCR的指数扩增 RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术，可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断，并且可以用于定量监测某种RNA的含量。RT-PCR的关键步骤是在RNA的反转录，要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。在完成逆转录过程之后,通过PCR进行定量分析的...
转基因动物的制备方法有哪些?
它可直接获得纯系，所以实验周期短。但需要贵重精密仪器，技术操作难度大，并且外源基因的整合位点和整合的拷贝数都无法控制，易造成宿主动物基因组的插入突变，引起相应的性状改变，重则致死。2、反转录病毒感染法 该法整合率较高，目的基因不易破坏，多是单拷贝、单位点整合，适合于难以观察到原核的禽类...
如何从cdna文库提取目的基因
一、构建基因文库 提取总DNA。用限制性内切酶将总DNA切成小片段，连到质粒或噬菌体载体上，把这些质粒转化到细菌，随着细菌繁殖而复制，这个过程又称为基因克隆（gene clone）将总DNA包含的基因组各片段分别克隆在质粒或噬菌体载体上，便构成了该生物的基因文库（gene library）。二、反转录人工合成互补DNA...
RT-PCR的原理是什么?有何用途?
作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染。用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT 及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA，三种都可。
(转基因)基因传递的方法有几种?
1．农杆菌介导转化法 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中...
基因组学
以RNA为中介的转座序列包括 短散在核序列（Short Interspersed Nuclear Element，SINE） 、 长散在核序列（Long Interspersed Nuclear Element，LINE） 、 具有长末端重复序列的LTR元件（Retrovirus-like Element） ，又称 反转录病毒类似元件 。 大片段基因组倍增（Segmental Duplis，SDs） ，又称 低拷...
雄县美乐回答： 以目的基因转录成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA(cDNA),然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获取所需的基因.是基因工程中提取目的基因的重要方法之一.优缺点 优点:该方法专一性强,目的基因不含内含子,可合成自然界不存在的新基因.缺点:操作复杂,形成的mRNA为单链,生存时间短,很不稳定,要求的技术条件也较高.因为直接从生物体中提取的基因的编码区是不连续的有不编码蛋白质的内含子部分,而反转录来的cDNA的编码区是连续的(成熟mRNA中的序列都是由基因的编码区的外显子部分转录来的),为了节省目的基因片段的长度,选择cDNA为目的基因.
毓命13645185165问： RNA的提取和反转录的实验步骤? - ？
雄县美乐回答： 小麦总RNA的提取 实验目的 从黄化小麦苗中提取总RNA,可以为cDNA文库的构建做好准备.我们重点是要保证RNA的完整性、产率、防止修饰和纯度,尤其是完整性、防止修饰和纯度.RNA是单链,2'OH是它的化学性质远比DNA活泼.所...
毓命13645185165问： 论述RT - PCR检测基因表达的实验步骤及如何判断并消除DNA污染所造成的影响. - ？
雄县美乐回答： RT-PCR实验,主要分为3步: 1. total RNA的提取 2. mRNA的反转录 3. 荧光定量PCR 消除DNA污染: 1. 按照说明书加入足量的Trizol,细胞过多会引起DNA污染. 2. 现在已经有去除基因组污染的反转录试剂盒,已经在很多实验室常用.你可以尝试一下.
毓命13645185165问： 请问AIDS病毒的RNA逆转录过程是什么 - ？
雄县美乐回答： AIDS的病原体HIV(人类免疫缺陷病毒)借助其薄膜蛋白刺突gp120与易感细胞表面CD4结合并进一步介导包膜与宿主细胞膜的融合,核衣壳进入细胞,与细胞质内脱壳释放出RNA.在病毒逆转录酶和病毒体相关DNA多聚酶的作用下,病毒RNA...
毓命13645185165问： 基因工程中 目的基因的提取 如果用人工方法(转录法和反转录法) 分别是怎么实现的？
雄县美乐回答： 这是中心法则 转录 已知DNA,通过转录得到mRNA 反转录和转录的过程正好相反,已知RNA,反转录出DNA 转录和反转录都是有模版链,通过基因互补配对得到另一条链,并非人工合成.
毓命13645185165问： 有关单细胞提取RNA,看大多都说直接裂解细胞后反转录,然后PCR.这样PCR时会有DNA污染吗? - ？
雄县美乐回答： 这要看你引物设计如何了,跨内含子与否..? 如果引物设计的好,DNA污染对反转录是没有任何影响的.. 不过还是建议你用DNA酶消化一下..北京华越洋的RNA提取试剂盒,在RNA提取过程中清楚了DNA污染,所以得到的RNA没有任何DNA污染,可满足苛刻的荧光定量PCR对DNA无残留的要求.. 北京华越洋生物..外源RNA酶清除剂,代替致癌的DEPC,..RNA提取必备!
毓命13645185165问： 外显子的操作步骤 - ？
雄县美乐回答： 操作步骤及其基本原理是: ⑴基因组DNA经“霰弹法”切成小片段后,克隆在位于“外显子捕捉序列”下游的克隆位点上. ⑵将这些重组载体汇总后感染反转录病毒的专宿包装细胞系(ecotropicretroviralpackagingcellline)——ψ2细胞系.ψ2细...
毓命13645185165问： 反向 - PCR如何操作？
雄县美乐回答： 反向PCR在研究转座因子、反转录病及其他 能与基因组DNA整合或易位的DNA序列中有许多重要应用.这些应用包括序列的易位、 转座和基因融合,其中之一是已知序列,例如癌基因或免疫系统的基因组成.在所有 这些情况中,如已知序列插入未知序列或与未知序列并列,反向PCR可用于测定未知 边侧序列.反向PCR的主要优点是简单快速,可以研究许多独立克隆.其某些应用适 合于临床诊断. 反向PCR的局限之一是由未知边侧序列性质引起的,需用几种酶试验以选择产生大小合适的片段的内切酶.另一局限是许多常用内切酶也在不适当位点裂解载体序 列.但一旦确定合适的内切酶,反向PCR方法是直接了当和可靠的.
毓命13645185165问： 目的基因分离最常用的方法及原理? 急急急 - ？
雄县美乐回答： 1.从生物基因组群体中分离目的基因原核生物基因组较小,基因容易定位,用限制性内切酶将基因组切成若干段后,用带有标记的核酸探针,从中选出目的基因.真核生物一般通过基因组文库的方法获得目的基因.图10-3-1 限制性内切酶限...
毓命13645185165问： 反转录病毒的基因组复制方式是 - ？
雄县美乐回答： 反转录病毒有一个从RNA到DNA的逆转录过程,即病毒在反转录酶的作用下,以病毒RNA为模板,合成互补的负链DNA(与mRNA互补的DNA)后,形成RNA-DNA中间体.中间体的RNA被RNA酶水解,进而在DNA聚合酶的作用下,由DNA复制产生+DNA,形成双链DNA.再进行正常的转录和翻译.双链DNA也可整合入宿主DNA,一起复制.最后转录,分离出+RNA,形成新病毒.
