内参蛋白gapdh
自噬专题---待续
(1)HSC70 70 kDa的热休克同源蛋白, 它是分子伴侣, 在胞浆识别带有KFERQ样序列的CMA底物;(2) LAMP-2a CMA的速率直接依赖于溶酶体膜上LAMP-2a的含量,LAMP-2a在胞内的水平可由于转录水平改变或降解速率改变而发生变化。抑制LAMP-2a将引起CMA底物GAPDH的聚集; 过表达LAMP-2a...
HPV高危型基因16有何危险
用250μl消化液(50mmol\/L Tris,pH8.5,200mg\/L蛋白酶K)悬浮组织,37℃反应过夜或55℃ 3h,直到组织消化到透亮。然后煮沸10min,灭活蛋白酶K,12 000r\/min离心5min,吸上清直接做PCR或分装后放在-20℃保存。用GAPDH引物进行PCR扩增验证DNA提取成功与否。1.2.2 HPV16.18.33.58.DNA 检测 ...
念呋ede有那些作用?
利尿,消除水肿。呋塞米的功效具有利尿的作用,临床用于治疗充血性心力衰竭,肺水肿,各种类型的水肿,是可以起到利尿,消除水肿,改善心力衰竭的效果。呋塞米还可以用于治疗高血压,预防各种原因导致肾脏血流灌注不足引起了肾衰竭,用于治疗高钾血症,高钙血症,是可以起到治疗效果的。如果是有疾病的发生...
请帮忙解释一下,PCR,RT-PCR,GAPDH。real time之间的联系。
现在的real time PCR往往 与 reverse transcription PCR 相结合,能用微量的RNA来找出特定时间、细胞、组织内的特别表达的遗传基因。那么,这个时候GAPDH就派上用场了,GAPDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶的缩写,这个酶的基因是看家基因,也就是在机体各组织中的表达都趋于稳定和接近,类似的还有actin蛋白,可以...
什么是GAPDH?它的作用是什么?
GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的,因此在使用GAPDH内参抗体时,将每个样品测得的...
GADPH是什么
GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的,因此在使用GAPDH内参抗体时,将每个样品测得的...
GAPDH基因是做什么的?
GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的,因此在使用GAPDH内参抗体时,将每个样品测得的...
gapdh是什么意思
常用的内参有,ACTB(β-actin、β-肌动蛋白)、GAPDH或18S等。目的是在于避免RNA定量误差、加样误差以及各PCR反应体系中扩增效率不均一、各孔间的温差等所造成的误差、这些都是管家基因,在各个组织中的表达量相对稳定,其中18S同整个基因谱有关(负责装配),它在总RNA中占的比例最高。
GAPDH基因的检测原理是什么?
GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的,因此在使用GAPDH内参抗体时,将每个样品测得的...
gapdh内参基因贴抗体
Gapdh内参基因贴抗体的特点 Gapdh内参基因贴抗体是用于检测Gapdh表达量的抗体,通常是由兔、小鼠或大鼠制备的多克隆抗体。这些抗体的特点主要包括以下几个方面:高灵敏度:Gapdh内参基因贴抗体能够检测到非常低浓度的Gapdh蛋白,因此可以在极低表达的样本中使用;高特异性:Gapdh内参基因贴抗体能够与Gapdh蛋白的...
临猗县赛奇回答: 常用的蛋白内参有 beta actin 和 GAPDH,它们是有区别的 GAPDH分子量为146KD,检测条带大约在36kD,beta actin分子量为42KD.一般选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上另外,细胞总蛋白的Western Blot的内参蛋白一般用 beta actin ,膜蛋白的Western Blot一般用GAPDH为内参
寿伦17056675127问: 请问,GAPDH作为RT - PCR内参的原理是什么呀?我知道为什用它做内参了,就是不清楚怎么用它, - ?
临猗县赛奇回答:[答案] 一般认为一些持家基因的表达量在不同状态下变化不大,所以可以认为它们表达是恒定的,故而用来做内参 简而言之,就是你有两个样品(譬如不同生长条件或者不同组织的),要比较其中某基因A表达转录变化,就分别比较两个样品中A相对于...
寿伦17056675127问: GADPH是什么 - ?
临猗县赛奇回答: GAPDH是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa.GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参.因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者...
寿伦17056675127问: 看家基因GApDHmRNA引物是什么东西?有什么用?成分 - ?
临猗县赛奇回答: 有,GAPDH是三磷酸甘油醛脱氢酶,是糖酵解途径中的关键酶.糖酵解途径就是将葡萄糖转化为ATP的过程,负责为生物体提供能量,几乎所有的生物都有该途径.因此GAPDH常常被用来作为内参基因,另外还有β-actin、Ubqutin等由于其广泛存在,也可作为内参基因.
寿伦17056675127问: western blot 的内参不一致,急求助 - ?
临猗县赛奇回答: 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...
寿伦17056675127问: Western blot 内参跑不齐怎么调整 - ?
临猗县赛奇回答: 第一,应该确认每个样品表达GAPDH的量一样,虽然是持家基因,本人觉得不同细菌可能表达量不一样,造成信号强弱不一样.可以通过考马斯亮蓝染色来确定上样量的差异,调整上样量一样再检测GAPDH. 第二,内参跑不齐.一般是跑胶...
寿伦17056675127问: Western Blot为什么必须要用内参 - ?
临猗县赛奇回答: 内参作为一个参考物选用一个表达量相对稳定的蛋白,如actin,GAPDH等.不同方法处理细胞时内参的表达量不变,目的蛋白有可能会有变化.western中各泳道的内参的条带一样,那说明蛋白浓度一样.总蛋白浓度一样,目的蛋白条带宽度差异才能体现出目的蛋白表达量的差别.
寿伦17056675127问: 哪位知道GAPDH内参有什么优点? - ?
临猗县赛奇回答: ◆Real-time PCR技术的原理就是用一种标准对照能够估计出一种特异性靶DNA或RNA分子的相对含量. ◆这种标准对照就是参照物,在定量PCR中,用它来作为扩增系统的阳性对照,并作为未知样品定量的标准,同时通过竞争性作用校正扩增...
寿伦17056675127问: 做WB时GAPDH可以用作核蛋白内参吗 - ?
临猗县赛奇回答: 可以