tubulin内参蛋白
GAPDH,Tubulin,Actin选哪个做WB内参更好?
探索WB实验中的上样内参:GAPDH、Tubulin与Actin的选择指南 欢迎来到“医学科研小坑”公众号,这里我们将深入探讨三种常用WB内参:GAPDH、Tubulin和Actin。这些“管家基因”因稳定表达,常用于校准实验误差,确保结果的准确性。然而,它们各有特性,如何选择?让我们一起揭秘吧!首先, Actin,作为肌动蛋白...
蛋白内参大小tublin出现在100为什么
首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于β-Tubulin的检测分子量大约在55kD,因此该内参抗体不是很适合用于检测50kD-60kD大小目标蛋白的WB实验中。另外,不同的组织来源的样本在选择内参时...
WB的无敌战神之路——WB的内参选择
首先,理解什么是内参——它就像实验中的稳定罗盘,帮助校准误差并监控整个蛋白表达系统。GAPDH、Tubulin和Actin是你的内参好友,各有其特性:GAPDH作为糖酵解酶,稳定但易受条件影响,Tubulin适合微管结构研究,而Actin分布广泛,但某些组织中表达可能较低。选择内参时,要考虑目标蛋白的定位、分子量,以及实...
内参抗体和标签抗体有哪些
内参抗体(Internal Control Antibody)是对内参蛋白进行检测,以校正蛋白定量过程中的实验误差以及验证转膜、显色等步骤是否正常!常用的内参包含 GAPDH、β-actin和 β-tubulin;及线粒体内参 COX IV和核内参 Histone H3和 PCNA等 内参抗体:Beta-Actin mAb (1C7) 细胞总蛋白 42 kD Abbkine ...
新时代下对于Western Blotting发表文章的新要求(一)
☑ 总蛋白比看家基因等内参的线性检测范围更宽。☑ 在整个实验和系统中更加稳定。☑ 能有效排除实验条件和体系对结果的影响。☑ 更真实地反映目标蛋白表达量的变化。图2.总蛋白归一化和定量三个靶标蛋白. Tubulin 红色通道, Actin 蓝色通道,GAPDH绿色通道, AzureRed\/total ...
β-Actinβ-Actin用途
β-Actin, 作为PCR实验中的常见内参,其在Western Blot分析中的作用不可忽视。内参,即内部对照,对于哺乳动物细胞表达研究,通常指的是由管家基因编码、在各组织和细胞中稳定表达的蛋白,如β-Actin、β-Tubulin和GAPDH等。这些蛋白的表达量相对恒定,常被用来监测蛋白表达水平的变化。β-Actin抗体因其在...
western 抗体是根据物种选的么
1、哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、Lamin B、Histone H3、Na,K atpase等。2、植物来源实验样本,则可以选择plantactin、Rubisco等。3、其他来源样本研究较少,所以就应该参照文献报导,选择合适的蛋白作为内参。二.目的蛋白分子量:选择内参抗体时,应该考虑目的蛋白分子...
GAPDH和GAPDHS的区别是什么?
其他常用的内参蛋白伙伴 尽管GAPDH是常见的选择,但科学家们也会利用其他内参蛋白如细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin。它们同样因为其稳定的表达水平和易于检测,被广泛用于实验对比和误差校正。在实际操作中,根据研究对象和实验需求,科学家会灵活地选用最适合的内参蛋白组合,以获得最准确的结果。总...
osactin内参的作用
常用的蛋白质内参有 GAPDH 和细胞骨架蛋白 beta-actin 或 beta-tubulin。 一般要选择一个在处理因素作用的条件下蛋白含量不会发生改变的蛋白作内参。——厚百 Western Blot试剂以下是常见的内参:内参名称 分子量大小 适用范围Beta-actin 43 kDa 胞浆和全细胞GAPDH 30-40 kDa 胞浆和全细胞...
在WB中心肌细胞蛋白应该用什么做内参
常用的蛋白质内参有GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)和细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin。一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。因此你要知道你检测的蛋白的分子量来选择合适的内参!actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织...
汤旺河区醋酸回答: 微管蛋白 组成微管的蛋白质称为微管蛋白.微管蛋白是球形分子, 有两种类型:α微管蛋白(α-tubulin)和改侍伏β微管蛋白(β-tubulin), 这两种微管蛋白具有相似的三维结构, 能够紧密地结合成二聚体, 作为微管组装的亚基.α亚基由450个...
季卸15579635320问: 一抗内参tubulin是a还是b - ?
汤旺河区醋酸回答: 微管蛋白 组成微管的蛋白质称为微管蛋白.微管蛋白是球形分子,有两种类型:α微管蛋白(α-tubulin)和β微管蛋白(β-tubulin),这两种微管蛋白具有相似的三维结构,能够紧密地结合成二聚体,作为微管组装的亚基.α亚基由450个氨基酸组成,...
季卸15579635320问: 在WB中心肌细胞蛋白应该用什么做内参 - ?
汤旺河区醋酸回答: 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...
季卸15579635320问: 以actin为内参,同种细胞不同处理,蛋白会产生变化吗 - ?
汤旺河区醋酸回答: 用内参照是为了评价你的各个上样孔内蛋白的总量是否基本一致,通常使用一些看家蛋白,比如β-actin、GAPDH等等.这些蛋白在所有细胞中的表达量基本一致,所以用他们来作为你加样量的对照.这样western结果中你的目的蛋白经过处理后...
季卸15579635320问: 14 - 3 - 3蛋白western选用什么内参 - ?
汤旺河区醋酸回答: 要检测蛋白分子量是在28~33kD之间?那内参可以选用a-tubulin(56kD)或者β-actin(42kD)GAPDH(36kD)可能稍微小了的
季卸15579635320问: 血清western blot怎样选择内参 - ?
汤旺河区醋酸回答: 网络搜索了解到:1. 由于血浆或血清中很难找到一个稳定表达的蛋白,常见的在组织中比较常用的内参蛋白如肌动蛋白,GAPDH等,严格讲并不适合血浆或血清;2. 可以考虑用立春红染色 或考染做loading control(这种方法在不少文献中都有报道,是大家认可的)3. Blood上有些文章 用的是立春红染色做control
季卸15579635320问: beta Tubulin Antibody 的亚型beta I ,beta II ,beta III Tubulin Antibody 有什么不同? - ?
汤旺河区醋酸回答: Actin即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.同时Actin在细胞分泌、吞噬、移动、胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用.Actin在不同物种之间高度保守,以至于很难获得较好的针对actin的抗血清.Actin大致可分为六种,其中四种是不同...
季卸15579635320问: 请问内参β - actin在血细胞里面也有表达吗?特别是红细胞,里面有吗? - ?
汤旺河区醋酸回答: 都表达,他们的基因都是组成型基因,每种组织都会表达.所以红细胞里面也有.
季卸15579635320问: 什么时候选择线粒体内参抗体? ?
汤旺河区醋酸回答: 我们知道,在Western Blotting中使用内参其实就是在WB过程中的另外用内参对应的抗体检测内参蛋白,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在各组...
季卸15579635320问: elisa需要actin对照吗 - ?
汤旺河区醋酸回答: WB中会设置内参,Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白.β-actin的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照.