如何分析高效液相色谱图

高效液相色谱图分析~

高效液相色谱图分析要参考多方面因素。现在以液相色谱反相谱图C18，VWD检测器进行分析。
1，出峰越靠前，说明物质极性越大，同时说明结构中含杂原子，极性键，比如羧基，氨基，等。
2，峰响应值越高，说明有机物中共轭越多，有时物质已经带了颜色，进入可见区。
3，峰型不好时，多是含双（多）基团，尤其是氨基酸类。
4，根据PH调整看峰型，能基本判断PKA，有利于判断物质结构。
5，多种条件分离都很困难时，并且峰型相似，一般多是两种或多种异构。
6，通过出峰顺序可判断物质处理（如重结晶）所使用溶剂。
7，波长与响应值对应，来判断可能结构。（相当于四大谱之一的紫外）

看峰面积的的占比啊，前两个峰分别是33%和65.9%，不知道前两个是同一物质裂分了还是两个，如果是两个就没有分开

分析色谱图的方法：

手动进样步骤 配置好流动相，将滤嘴洗头放入流动相页面内，打开泵和检测器，快跑排除气泡，设置既定流速，稳定一段时间，让基线跑平，用液相针吸取称量融配脱气后的对照（含量已标定）。

打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中，拔出针头好立刻关闭六通阀，一般随六通阀关闭电脑自动采样，等主峰跑完整后记录其峰面积，一般跑两个对照，每个对照跑两针，共四针。

然后开始注称好溶配脱气后的样，以对照主峰的保留时间来判断样品中目标峰的位置，外标法以峰面积计算供试品中某物质的含量。 

X=[S样*K /m样（1-水分）]*对照品含量% *100

扩展资料

高效液相色谱法有“四高一广”的特点：

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。

⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

⑥柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物

⑦样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。

此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。

参考资料 百度百科高效液相色谱

色谱图，其实简单地讲，是一个横坐标是时间，纵坐标是电信号的二维图谱。

高效液相色谱法，你可以简单地想象，固定相是一个多空海绵状的柱形结构，样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同，所以才会在色谱图中拉开距离。

分析色谱图的方法：

手动进样步骤 配置好流动相，将滤嘴洗头放入流动相页面内，打开泵和检测器，快跑排除气泡，设置既定流速，稳定一段时间，让基线跑平，用液相针吸取称量融配脱气后的对照（含量已标定），打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中，拔出针头好立刻关闭六通阀，一般随六通阀关闭电脑自动采样，等主峰跑完整后记录其峰面积，一般跑两个对照，每个对照跑两针，共四针。

然后开始注称好溶配脱气后的样，以对照主峰的保留时间来判断样品中目标峰的位置，外标法以峰面积计算供试品中某物质的含量。 

X=[S样*K /m样（1-水分）]*对照品含量% *100

扩展资料：

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用

参考资料：百度百科-高效液相色谱

分析色谱图的方法：

手动进样步骤 配置好流动相，将滤嘴洗头放入流动相页面内，打开泵和检测器，快跑排除气泡，设置既定流速，稳定一段时间，让基线跑平，用液相针吸取称量融配脱气后的对照（含量已标定），打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中，拔出针头好立刻关闭六通阀，一般随六通阀关闭电脑自动采样，等主峰跑完整后记录其峰面积，一般跑两个对照，每个对照跑两针，共四针。

然后开始注称好溶配脱气后的样，以对照主峰的保留时间来判断样品中目标峰的位置，外标法以峰面积计算供试品中某物质的含量。 

X=[S样*K /m样（1-水分）]*对照品含量% *100

拓展资料：

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。

一、特点

高效液相色谱法有“四高一广”的特点：

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。

⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

⑥柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物

⑦样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。

此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间，除了柱子以外的任何死空间（进样器、柱接头、连接管和检测池等）中，如果流动相的流型有变化，被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽，柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。

二、液相色谱理论

发展简况

液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。

它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography，HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography，HSLP)。也称现代液相色谱

百度百科    高效液相色谱法

分析色谱图

手动进样步骤 配置好流动相，将滤嘴洗头放入流动相页面内，打开泵和检测器，快跑排除气泡，设置既定流速，稳定一段时间，让基线跑平，用液相针吸取称量融配脱气后的对照（含量已标定），打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中，拔出针头好立刻关闭六通阀，一般随六通阀关闭电脑自动采样，等主峰跑完整后记录其峰面积，一般跑两个对照，每个对照跑两针，共四针。然后开始注称好溶配脱气后的样，以对照主峰的保留时间来判断样品中目标峰的位置，外标法以峰面积计算供试品中某物质的含量。

1、X=[S样*K /m样（1-水分）]*对照品含量% *100；

2、X:供试品的含量(%);

3、S样:供试品的主峰面积;

4、K:单位面积对照品的质量

5、m样(1-水分):称取供试品折干后的质量(mg);

6、X对:对照品的含量(%)。

拓展资料

色谱图是指被分离组分的检测信号随时间分布的图象。样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线。色谱图形状随色谱方法和检测记录的方式不同而不同，迎头色谱和顶替色谱的色谱图为一系列台阶；在洗脱法色谱中，若采用微分型检测器时，分离组分的检测信号随时间变化的图形为近似于高斯分布的一组色谱峰群，色谱图的纵坐标为检测器的响应信号，横坐标为时间、体积或距离。

（资料来源：百度百科：色谱图）

分析色谱图的方法：

1、手动进样步骤 配置好流动相，将滤嘴洗头放入流动相页面内，打开泵和检测器，快跑排除气泡，设置既定流速，稳定一段时间，让基线跑平，用液相针吸取称量融配脱气后的对照（含量已标定），打开定量环将液相针里的液体匀速注入定量环中。

2、拔出针头好立刻关闭六通阀，一般随六通阀关闭电脑自动采样，等主峰跑完整后记录其峰面积，一般跑两个对照，每个对照跑两针，共四针。

3、开始注称好溶配脱气后的样，以对照主峰的保留时间来判断样品中目标峰的位置，外标法以峰面积计算供试品中某物质的含量。 

X=[S样*K /m样（1-水分）]*对照品含量% *100

X:供试品的含量(%);

S样:供试品的主峰面积;

K:单位面积对照品的质量；

m样(1-水分):称取供试品折干后的质量(mg);

X对:对照品的含量(%);

拓展资料

1、高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。

2、该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。

3、高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点：

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

②高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

③高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。

④应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

⑤分析速度快、载液流速快：较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

4、此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱相比各有所长，相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。

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赣县18866883379： 请问如何分析高效液相色谱图啊?最近要写论文,做实验时得到的产物是用高效液相色谱仪分析的,得到的谱图我不知道怎么分析,希望能得到您的帮助, - ？
毅辉威乐：[答案] 液相色谱图很简单啊.就一个一个的峰.是按照面积归一法算纯度的.他的出峰时间和峰高 是和你进样 和流动相 浓度 还有机器流速有关的.只要你取样进样 以及分析步骤正确.结果误差很小的. 色谱图完成后是要修的.不...

赣县18866883379： 高效液相色谱图分析 - ？
毅辉威乐：[答案] 高效液相色谱图分析要参考多方面因素.现在以液相色谱反相谱图C18,VWD检测器进行分析.1,出峰越靠前,说明物质极性越大,同时说明结构中含杂原子,极性键,比如羧基,氨基,等.2,峰响应值越高,说明有机物中共轭越多,有时物质...

赣县18866883379： 高效液相色谱怎么分析分析色谱图和数据,计算含量,有色谱条件 - ？
毅辉威乐：[答案] 计算含量的方法很多: 面积归一化法,外标法,内标法 常用的: 面积归一化法那很简单,配制一个供试品,进样分析.一个色谱峰代表一个物质,最大的那个通常是你的主峰,其余的基本都是杂质. 杂质(%)=杂质的峰面积/主峰峰面积*100%(这个...

赣县18866883379： 高效液相色谱的原理及分析方法 - ？
毅辉威乐： 分析色谱图 手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定),打开定量环将液相针里的液体匀速...

赣县18866883379： 紧急求助:请问如何分析高效液相色谱图啊???？
毅辉威乐： 液相色谱图很简单啊.就一个一个的峰.是按照面积归一法算纯度的.他的出峰时间和峰高 是和你进样 和流动相 浓度 还有机器流速有关的.只要你取样进样 以及分析步骤正确.结果误差很小的. 色谱图完成后是要修的.不同物质跑出的峰是不同的,一般来说一个主峰(主要物质)若干杂峰(杂质).这得根据你的反应以及需要的结果来分析.~~~~~~~~~~额.我是化工的分析员.整天液相打样.主要是苯胺类的.一般分析,主要是2类.一个成品 一个是工序产品.工序样品打样是为了下一步反应服务的

赣县18866883379： 高效液相色谱的数据结果该怎么看? - ？
毅辉威乐： 关键是你要它什么时间的峰,你想测量样品中那些物质的含量,它的数据很多,你还能在图中看到它的斜率,分离效果的好坏,数据只是一部分,你得跟据你样品的性质用的方法,算出你需要的

赣县18866883379： 求分析高效液相色谱图啊 - ？
毅辉威乐： 没有说清楚啊.你的标准品是什么,后两张图是你的样品吗?目前的情况我只能简单分析一下,标准品中有两个物质,保留时间5.1min的物质(称之为物质A)和保留时间6.8min的物质(称之为物质B).第一张图的供试品溶液中含有保留时间是6.8min的那个物质A,其他的色谱峰应该大多为溶剂峰、辅料峰和杂质峰.没有写出峰面积,但是从峰高上面判断,供试品的浓度要比标准品的浓度略低一些.第二章色谱图的供试品中含有保留时间为5.1min的那个物质B,其他的色谱峰应该大多为溶剂峰、辅料峰和杂质峰.也是没写出峰面积,但是从峰高上面判断,供试品的浓度要比标准品的浓度低一些.

赣县18866883379： 如何建立好药物含量的高效液相色谱分析方法 - ？
毅辉威乐： 1,首先必须去进行配制药物溶液前处理的工作.找出该药物的溶解性,探索出该药物的有效溶剂,使该药物能在该溶剂中充分溶解,这是药物溶液配制的前处理必然途径,也是进行高效液相色谱含量分析的首要条件.2,然后就是...

赣县18866883379： 高效液相色谱仪测定分析要用哪些公式和参数? - ？
毅辉威乐： 色谱图 最主要的几个参数:保留时间 峰面积 分离度 拖尾因子 理论塔板数前面两个(保留时间Rt,峰面积A)可以直接得到;分离度(resolution):表示两个相邻色谱峰的分离程度.计算公式:R=2(Rt2-Rt1)/(W1+W2)Rt1 Rt2 分别表示 峰1 ...

赣县18866883379： 请问如何判断此色谱图为高效液相色谱图? - ？
毅辉威乐： 应该是吧. 色谱图的横轴是保留时间,单位是分钟min.纵轴是电信号,单位是mAu,或者是mV. 每一个色谱峰代表一个物质,峰高是浓度的表示.