如何分析高效液相色谱图

作者&投稿:种菲 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
高效液相色谱图分析~

高效液相色谱图分析要参考多方面因素。现在以液相色谱反相谱图C18,VWD检测器进行分析。
1,出峰越靠前,说明物质极性越大,同时说明结构中含杂原子,极性键,比如羧基,氨基,等。
2,峰响应值越高,说明有机物中共轭越多,有时物质已经带了颜色,进入可见区。
3,峰型不好时,多是含双(多)基团,尤其是氨基酸类。
4,根据PH调整看峰型,能基本判断PKA,有利于判断物质结构。
5,多种条件分离都很困难时,并且峰型相似,一般多是两种或多种异构。
6,通过出峰顺序可判断物质处理(如重结晶)所使用溶剂。
7,波长与响应值对应,来判断可能结构。(相当于四大谱之一的紫外)

如何分析高效液相色谱图
分析色谱图 手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取.

色谱图,其实简单地讲,是一个横坐标是时间,纵坐标是电信号的二维图谱。
高效液相色谱法,你可以简单地想象,固定相是一个多空海绵状的柱形结构,样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同,所以才会在色谱图中拉开距离。
和实验相关的参数:
1、保留时间-也就是可以定性的数据参数
如果使用同样的色谱柱,同样的流动相,分析同样的样品,那么这个样品的保留时间,应该是固定的。不同保留时间的色谱峰,应该表现出的是不同的物质。如果你跑的是反相色谱,那么色谱峰越靠后,它对应物质的极性也就越小。
2、峰面积-也就是可以定量的数据参数
这是你在色谱图中可以读出来的参数,在同一个色谱条件下,同一个物质的浓度和峰面积是成正比的。也就是说,如果你配制1.0mg/ml的X物质,进样后峰面积是10000,那么,你配制0.5mg/ml的X物质,进样后峰面积差不多就是5000
3、波长-这个是可以顺利进行试验的前提条件
同一样品,同一方法,同一色谱柱,在不同波长的峰面积是不同的。一个物质指在某些特殊波长下有吸收。比如一个物质在210nm和254nm处有吸收。那么波长在280nm处可能无法检出该物质。所以一个实验方法开始时要进行波长扫描。


高效液相的原理,最好详细点
高效液相色谱按其固定相的性质可分为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、反相高效液相色谱、高效离子交换液相色谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相色谱等类型。用不同类型的高效液相色谱分离或分析各种化合物的原理基本上与相对应的普通液相层析的原理相似。其不同之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率高、重复性好,且...

高效液相色谱操作步骤是怎样的?
高效液相色谱仪操作流程为开机、超声、排气、走基线。1、开机前先将流动相过滤和超声:水流动相用混合滤膜(0.2μm)过滤,有机流动相用有机滤膜过滤,之后超声脱气15-20分钟。(过滤的目的是除去流动相里的杂质,以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱;超声的目的是排除流动相里面的气体,以防气体进入色谱柱...

做高效液相色谱时如何做标准曲线
做标准曲线首先有标准物质,然后有一个曲线的浓度范围。比如说,标准物质X,浓度是0.1mg\/ml-2mg\/ml。配制样品的时候,取X适量,配制成浓度为10mg\/ml的母液,然后逐级稀释,配制成浓度为0.1mg\/ml,0.2mg\/m,0.5mg\/ml,1.0mg\/ml,2.0mg\/ml的样品,然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。(由...

高效液相色谱与经典液相色谱有何异同?
二、特点不同 1、高效液相色谱法如下:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。③高效:分离...

高效液相色谱法( HPLC- UV)如何测定化合物含量?
1. 在使用高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)测定化合物含量时,化合物的化学稳定性是基本要求,确保在色谱分析过程中不会发生降解或反应,从而保证分析结果的准确性。2. 化合物的分子结构应当具有一定的对称性,这有助于提高色谱柱中化合物的扩散系数,使得分离更为均匀,便于准确测定含量。3. 化合物...

请问HPLC是做什么的?原理?操作方法?
用途:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。原理:高效液相色谱以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的...

气相色谱法与高效液相色谱法相同点和不同点
一、高效液相色谱法与气相色谱法的相同点 最基本的原理相同,都是吸附-脱附平衡,利用组分在固定相和流动相中的分配系数不同达到分离的目的。一、不同点 (一)应用范围不同 1、气相色谱法 分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等。受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难...

液相色谱仪使用步骤是什么?
现代高效液相色谱仪配备了数据处理系统,能够记录和分析色谱图,自动积分计算峰面积,并根据预设程序进行计算和报告分析结果。高效液相色谱仪使用过程中常见问题及解决方法 1. 液相色谱仪系统问题 高效液相色谱仪的核心部件包括色谱柱、泵和检测器,这些也是容易出现问题的部位。2. 常见问题及解决方法 - 柱压...

高效液相色谱的应用范围有哪些?
5.食品和饮料中的添加剂和污染物:例如防腐剂、色素、甜味剂等。6.环境样品中的污染物:例如土壤、水体和大气中的有机和无机污染物。总的来说,HPLC在分析各种化合物的组成、浓度、纯度和反应动力学等方面都具有广泛的应用价值。高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种分离和...

高效液相色谱适宜的分析对象是
高沸点大分子有机化合物。高效液相色谱法特点是高压、高速、高效、高灵敏度、适应范围宽,高效液相色谱法最适宜的分析对象是高沸点、不稳定的大分子有机化合物。高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达29.4MPa)。

平江县18338331535: 请问如何分析高效液相色谱图啊?最近要写论文,做实验时得到的产物是用高效液相色谱仪分析的,得到的谱图我不知道怎么分析,希望能得到您的帮助, -
严居山海:[答案] 液相色谱图很简单啊.就一个一个的峰.是按照面积归一法算纯度的.他的出峰时间和峰高 是和你进样 和流动相 浓度 还有机器流速有关的.只要你取样进样 以及分析步骤正确.结果误差很小的. 色谱图完成后是要修的.不...

平江县18338331535: 高效液相色谱图分析 -
严居山海:[答案] 高效液相色谱图分析要参考多方面因素.现在以液相色谱反相谱图C18,VWD检测器进行分析.1,出峰越靠前,说明物质极性越大,同时说明结构中含杂原子,极性键,比如羧基,氨基,等.2,峰响应值越高,说明有机物中共轭越多,有时物质...

平江县18338331535: 高效液相色谱怎么分析分析色谱图和数据,计算含量,有色谱条件 -
严居山海:[答案] 计算含量的方法很多: 面积归一化法,外标法,内标法 常用的: 面积归一化法那很简单,配制一个供试品,进样分析.一个色谱峰代表一个物质,最大的那个通常是你的主峰,其余的基本都是杂质. 杂质(%)=杂质的峰面积/主峰峰面积*100%(这个...

平江县18338331535: 高效液相色谱的原理及分析方法 -
严居山海: 分析色谱图 手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定),打开定量环将液相针里的液体匀速...

平江县18338331535: 紧急求助:请问如何分析高效液相色谱图啊???
严居山海: 液相色谱图很简单啊.就一个一个的峰.是按照面积归一法算纯度的.他的出峰时间和峰高 是和你进样 和流动相 浓度 还有机器流速有关的.只要你取样进样 以及分析步骤正确.结果误差很小的. 色谱图完成后是要修的.不同物质跑出的峰是不同的,一般来说一个主峰(主要物质)若干杂峰(杂质).这得根据你的反应以及需要的结果来分析.~~~~~~~~~~额.我是化工的分析员.整天液相打样.主要是苯胺类的.一般分析,主要是2类.一个成品 一个是工序产品.工序样品打样是为了下一步反应服务的

平江县18338331535: 高效液相色谱的数据结果该怎么看? -
严居山海: 关键是你要它什么时间的峰,你想测量样品中那些物质的含量,它的数据很多,你还能在图中看到它的斜率,分离效果的好坏,数据只是一部分,你得跟据你样品的性质用的方法,算出你需要的

平江县18338331535: 求分析高效液相色谱图啊 -
严居山海: 没有说清楚啊.你的标准品是什么,后两张图是你的样品吗?目前的情况我只能简单分析一下,标准品中有两个物质,保留时间5.1min的物质(称之为物质A)和保留时间6.8min的物质(称之为物质B).第一张图的供试品溶液中含有保留时间是6.8min的那个物质A,其他的色谱峰应该大多为溶剂峰、辅料峰和杂质峰.没有写出峰面积,但是从峰高上面判断,供试品的浓度要比标准品的浓度略低一些.第二章色谱图的供试品中含有保留时间为5.1min的那个物质B,其他的色谱峰应该大多为溶剂峰、辅料峰和杂质峰.也是没写出峰面积,但是从峰高上面判断,供试品的浓度要比标准品的浓度低一些.

平江县18338331535: 如何建立好药物含量的高效液相色谱分析方法 -
严居山海: 1,首先必须去进行配制药物溶液前处理的工作.找出该药物的溶解性,探索出该药物的有效溶剂,使该药物能在该溶剂中充分溶解,这是药物溶液配制的前处理必然途径,也是进行高效液相色谱含量分析的首要条件.2,然后就是...

平江县18338331535: 高效液相色谱仪测定分析要用哪些公式和参数? -
严居山海: 色谱图 最主要的几个参数:保留时间 峰面积 分离度 拖尾因子 理论塔板数前面两个(保留时间Rt,峰面积A)可以直接得到;分离度(resolution):表示两个相邻色谱峰的分离程度.计算公式:R=2(Rt2-Rt1)/(W1+W2)Rt1 Rt2 分别表示 峰1 ...

平江县18338331535: 请问如何判断此色谱图为高效液相色谱图? -
严居山海: 应该是吧. 色谱图的横轴是保留时间,单位是分钟min.纵轴是电信号,单位是mAu,或者是mV. 每一个色谱峰代表一个物质,峰高是浓度的表示.

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