什么是营养缺陷型,筛选的一般步骤,并举例说明如何检出缺陷型?
营养缺陷型是指某菌株经突变后,丧失了合成某营养素的功能,若在培养基上培养必须添加相应的营养素才能生长。
用加有青霉素的培养基来选择细菌的营养缺陷型的一种方法。也就是由于青霉素是细菌细胞壁的合成抑制剂,利用其可杀死正在繁殖的细菌的性质,对所有青霉素敏感菌的一种方便的选择法。例如将细菌先在完全培养基中培养24小时,离心分离菌体,即用生理盐水(0.85%—0.95%NaCl溶液)反复离心洗涤2—3次,然后在加有青霉素(100—300单位/立升)的基本培养基中于最适温度中培养24小时。这时不是营养缺陷型的原来野生型细胞会因不断分裂而被青霉素所杀死。然后将菌悬液放在完全琼脂培养基进行平面培养,在平面上长出来的菌落大多为营养缺陷型。通过与影印法并用,可高效率地分离到变异菌株。
http://baike.baidu.com/view/1030194.htm
http://www.bbioo.com/bio101/2006/7257.htm
在筛选营养缺陷型突变株的工作中,常用三种培养基:
一是基本培养基,它是仅能满足微生物野生型菌株生长要求的培养基。第二种是完全培养基,它是能满足某微生物所有营养缺陷型菌株营养要求的天然或半合成培养基。第三种是补充培养基,凡是只能满足某种营养缺陷型生长需要的合成培养基,就称为补充培养基。
1、用于诱发营养缺陷型的诱变剂有亚硝基胍,紫外线,亚硝酸等,其中亚硝基胍的诱发突变率极高,一般可达10%以上,另外,随着诱变剂量的提高突变频率也增加。
2、在诱变之后存活的菌体中,存活的营养缺陷型菌株的数量很少,而野生型细胞却大量存在,所以常采用抗生素法和菌丝过滤法来筛选营养缺陷型菌株。
3、经过第二步,野生型的细胞和营养缺陷型细胞数量比例发生很大变化,但是终究还是混合体,要设法把缺陷型菌株从群体分离检出,可用点植对照法,影印法,夹层法,限量补充培养法来分离。
4、缺陷型菌株的鉴定,实际是测定营养缺陷型菌株所需的生长因子种类。鉴定的方法可分为两大类:一种方法是在一个平皿中加入一种营养物质以测定多株缺陷型菌株(10-50)对该生长因子的需求情况。
第二种方法是在同一个平皿上测定一种缺陷型菌株对许多生长因子的需求情况,成为生长谱法。
扩展资料:
营养缺陷型菌株广泛应用于核苷酸及氨基酸等产品的生产。
1、阻断代谢途径,积累中间代谢产物。
2、阻断分支代谢,改变代谢方向,积累另一终端代谢产物。
3、解除反馈抑制,积累代谢产物。
4、利用渗漏缺陷型进行代谢调控育种。
参考资料来源:百度百科-营养缺陷型菌株
营养缺陷型菌株的筛选一般包括诱发突变,淘汰野生型菌株,检出缺陷型,鉴别缺陷种类等步骤.
什么是营养缺陷型?如何从诱变菌株中筛选出营养缺陷型。
【答案】:营养缺陷型指野生型经诱变处理后,由于发生了丧失某酶合成能力的突变形成的菌株,它只能在加入该酶合成产物的培养基中生长;可通过夹层培养法,限量补充培养法,影印接种培养法及逐个检出法筛选除营养缺陷型菌株。
什么叫做营养缺陷型菌株?在实验室中如何从原养型菌株获得营养缺陷型菌株...
【答案】:(1)营养缺陷型是野生型经诱变处理后,由于发生了丧失合成某些对该菌株生长必不可少的物质的能力,必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖的突变菌株。(2)营养缺陷型的筛选方法:一般要经过诱变、淘汰野生型、检出和鉴定营养缺陷型4个环节。第一步,诱变剂处理:用物理或化学诱变剂进行处理。第...
微生物筛选营养缺陷型有什么意义?
1、营养缺陷型有可能是突变体,要筛选基因突变体第一步一般都会从营养缺陷开始。2、主要应用于筛选转基因受体。
什么是营养缺陷型,筛选的一般步骤,并举例说明如何检出缺陷型?
营养缺陷型:野生型菌株经过人工诱变或者自然突变失去合成某种营养(氨基酸,维生素,核酸等)的能力,只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子才能生长,成为营养缺陷型(auxotroph)。营养缺陷型菌株的筛选一般包括诱发突变,淘汰野生型菌株,检出缺陷型,鉴别缺陷种类等步骤.
什么是营养缺陷型菌株,其选育机理是什么
在基本培养基中野生型孢子能萌发长成菌丝体,而营养缺陷型孢子则不生长。将经诱变处理的孢子接种于液态基本培养基中,振荡培养10h~12h,使原养型萌发(以肉眼刚能看见菌丝为度),然后以滤纸、棉花或玻璃过滤漏斗过滤,菌丝被滤除,未萌发的缺陷型孢子能顺利通过,从而达到富集营养缺陷型的目的。③检出...
怎样用营养缺陷型筛选重组子与非重组子
该筛选方法如下:1、突变型受体细胞上缺乏合成某种必需营养物质,而载体分子上携带了这种营养物质的生物合成基因,利用缺少该营养物质的合成培养基进行涂布培养时,阳性转化子能够长出菌落。2、已经诱变产生的合成Lys的缺陷型菌株为受体细胞,当载体分子上含有Lys合成基因时,转化后利用不含Lys(即Lys-)的...
筛选营养缺陷型细菌的基本步骤和方法及其原理
营养缺陷型是指某菌株经突变后,丧失了合成某营养素的功能,若在培养基上培养必须添加相应的营养素才能生长。用加有青霉素的培养基来选择细菌的营养缺陷型的一种方法。也就是由于青霉素是细菌细胞壁的合成抑制剂,利用其可杀死正在繁殖的细菌的性质,对所有青霉素敏感菌的一种方便的选择法。例如将细菌先在...
怎样用营养缺陷型筛选重组子和非重组子
1、将外源DNA片段与载体DNA的连接反应物不经分离直接用于转化,再加上重组率和转化率的不理想,因此必须通过筛选和鉴定来区分转化子与非转化子。2、在不含目标营养组分的培养基上,只有转化子才能生长。因此,通过观察菌落在特定培养基上的生长情况,就可以初步判断哪些是转化子。3、为了进一步确认哪些是...
微生物问题:营养缺陷性的筛选方法有什么??举例说明。。
营养缺陷型微生 物是 指经过诱变处理,使某一菌株丧失合成某些 必需 的营养物质(氨基酸、维生素和碱基等)的能力,从而必须在培养 基中加人相应 的营养成 分才能 正常生 长 的变异菌株。分离:1、青霉素浓缩法。青霉素 能抑 制细菌 细胞壁 的合 成,因此,用青霉素只能杀死生 长繁殖 中的细 菌,而 不...
筛选营养缺陷型突变株的步骤
第一步,诱变剂处理,与一般诱变处理相同。第二步,淘汰野生型:通过抗生素法或菌丝过滤法就可淘汰为数众多的野生型菌株,从而达到浓缩极少数营养缺陷型的目的。第三步,检出缺陷型:有夹层培养法,限量补充培养法,逐个检出法,影印平版法。第四步,鉴定缺陷型,可借生长谱法进行。
林言滋补:[答案] 第一步,诱变剂处理,与一般诱变处理相同 第二步,淘汰野生型:通过抗生素法或菌丝过滤法就可淘汰为数众多的野生型菌株,从而达到浓缩极少数营养缺陷型的目的 第三步,检出缺陷型:有夹层培养法,限量补充培养法,逐个检出法,影印平版...
津南区13670902516: 怎样筛选营养缺陷型菌株 - ?
林言滋补:[答案] 一.筛选营养缺陷型菌株的一般步骤和方法①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株.用15W或20W紫外灯管,距离15cm~30cm,照射10sec~20min.在照射受试菌前,灯管须预热20min,使灯光稳定.菌...
津南区13670902516: 怎样筛选营养缺陷型菌株 - ?
林言滋补: 一.筛选营养缺陷型菌株的一般步骤和方法 ①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株.用15W或20W紫外灯管,距离15cm~30cm,照射10sec~20min.在照射受试菌前,灯管须预热20min,使灯光稳定.菌悬液...
津南区13670902516: 筛选高表达菌株的最简便方法是什么 一般通过哪两种手段实现 - ?
林言滋补: 一.筛选营养缺陷型菌株的一般步骤和方法 ①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株. 用15W或20W紫外灯管,距离15cm~30cm,照射10sec~20min.在照射受试菌前,灯管须预热20min,使灯光稳定.菌悬液要磁力搅拌,使所.
津南区13670902516: 营养缺陷型在微生物代谢调节的应用 - ?
林言滋补: 主要是用来改变代谢途径. 具体应用可以参考“不能合成高丝氨酸脱氢酶的黄色短杆菌” 高丝氨酸脱氢酶是合成苏氨酸过程中不可缺少的一种酶,不能合成高丝氨酸脱氢酶的黄色短杆菌,就不能合成苏氨酸.这就解除了苏氨酸等对天冬氨酸激酶的抑制作用,使黄色短杆菌能不断合成赖氨酸.
津南区13670902516: 药物多晶型筛选具体应该怎么操作 - ?
林言滋补: 选中栏目,点筛选工具,会出现一个倒三角的图标,点击你所要筛选的东东
津南区13670902516: 如何淘汰野生菌体原理及方?在营养缺陷型突变菌株筛选中,如何淘汰野 ?
林言滋补: .筛选营养缺陷型菌株般步骤和方法①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株用15W或20W紫外灯管距离15cm~30cm照射10sec~20min...
津南区13670902516: 营养缺陷性的筛选方法有什么?举例说明. - ?
林言滋补:[答案] 营养缺陷型微生 物是 指经过诱变处理,使某一菌株丧失合成某些 必需 的营养物质(氨基酸、维生素和碱基等)的能力,从而必须在培养 基中加人相应 的营养成 分才能 正常生 长 的变异菌株.分离:1、青霉素浓缩法.青霉素 能...
津南区13670902516: 微生物筛选营养缺陷型有什么意义 - ?
林言滋补: 微生物中筛选营养缺陷型一般有两个意义: 1、营养缺陷型有可能是突变体,要筛选基因突变体第一步一般都会从营养缺陷开始. 2、主要应用于筛选转基因受体.