筛选营养缺陷型细菌的基本步骤和方法及其原理
营养缺陷型是指某菌株经突变后,丧失了合成某营养素的功能,若在培养基上培养必须添加相应的营养素才能生长。
在基本培养基中加入抗生素,野生型菌株被杀死,营养缺陷型不能在基本培养基中生长而被保留下来。------------------------------------下面要理解什么是完全培养基,基本培养基,补充培养基,限量补充培养基 :基本培养基:凡能满足某一菌种野生型和原养型菌株营养要求的最低成分的组合培养基。 】】
完全培养基:在基本培养基中加入一些富含生长因子的物质,以满足该微生物各种营养缺陷型要求。】】
补充培养基:在基本培养基中有针对性地加上某一种或几种其自身不能合成的成分,以满足相应营养缺陷型生长的培养基。】】
限量补充培养法: 把诱变处理后的细胞接种在含有微量(<0.01%)蛋白胨的基本培养基平板上,野生型细胞就迅速长成较大的菌落,而营养缺陷型则缓慢生长成小菌落。若需获得某一特定营养缺陷型,可再在基本培养基中加入微量的相应物质。
用加有青霉素的培养基来选择细菌的营养缺陷型的一种方法。也就是由于青霉素是细菌细胞壁的合成抑制剂,利用其可杀死正在繁殖的细菌的性质,对所有青霉素敏感菌的一种方便的选择法。例如将细菌先在完全培养基中培养24小时,离心分离菌体,即用生理盐水(0.85%—0.95%NaCl溶液)反复离心洗涤2—3次,然后在加有青霉素(100—300单位/立升)的基本培养基中于最适温度中培养24小时。这时不是营养缺陷型的原来野生型细胞会因不断分裂而被青霉素所杀死。然后将菌悬液放在完全琼脂培养基进行平面培养,在平面上长出来的菌落大多为营养缺陷型。通过与影印法并用,可高效率地分离到变异菌株。
http://baike.baidu.com/view/1030194.htm
http://www.bbioo.com/bio101/2006/7257.htm
营养缺陷型是指某菌株经突变后,丧失了合成某营养素的功能,若在培养基上培养必须添加相应的营养素才能生长。用加有青霉素的培养基来选择细菌的营养缺陷型的一种方法。也就是由于青霉素是细菌细胞壁的合成抑制剂,利用其可杀死正在繁殖的细菌的性质,对所有青霉素敏感菌的一种方便的选择法。
例如将细菌先在完全培养基中培养24小时,离心分离菌体,即用生理盐水(0.85%—0.95%NaCl溶液)反复离心洗涤2—3次,然后在加有青霉素(100—300单位/立升)的基本培养基中于最适温度中培养24小时。
这时不是营养缺陷型的原来野生型细胞会因不断分裂而被青霉素所杀死。然后将菌悬液放在完全琼脂培养基进行平面培养,在平面上长出来的菌落大多为营养缺陷型。通过与影印法并用,可高效率地分离到变异菌株。
筛选营养缺陷型菌株般步骤和方法①诱变 ②淘汰野生型③检出缺陷型④鉴定营养缺陷型——生长谱法
怎样筛选营养缺陷型菌株
④鉴定营养缺陷型——生长谱法 将检出的缺陷型菌株接种在完全培养基上培养,把生长的菌体或孢子洗下,离心清洗后制成浓度为107个/ml~108个/ml的菌悬液.取0.1ml该悬液与基本培养基混匀倒皿,冷凝并稍干燥后,分区加沾有各种营养物的圆滤纸片,培养,观察生长反应.在筛选营养缺陷型的过程中必须注意...
筛选营养缺陷型细菌的基本步骤和方法及其原理
例如将细菌先在完全培养基中培养24小时,离心分离菌体,即用生理盐水(0.85%—0.95%NaCl溶液)反复离心洗涤2—3次,然后在加有青霉素(100—300单位\/立升)的基本培养基中于最适温度中培养24小时。这时不是营养缺陷型的原来野生型细胞会因不断分裂而被青霉素所杀死。然后将菌悬液放在完全琼脂培养基...
论述获得微生物营养缺陷型菌株的方式?
第二步,淘汰野生型:在诱变后的存活个体中,营养缺陷型的比例一般较低。通过以下的抗生素法或菌丝过滤法就可淘汰为数众多的野生型菌株即浓缩了营养缺陷型。抗生素法 有青霉素法和制霉菌素法等数种。青霉素法适用于细菌,青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成,杀死正在繁殖的野生型细菌,但无法杀死正处于休...
影印培养试验如何筛选亮氨酸缺陷型菌株
1、了解营养缺陷型突变株选育的原理。学习并掌握细菌氨基酸营养缺陷型的诱变、筛选与鉴定方法。2、基本原理营养缺陷型是指野生型菌株由于某些物理因素或化学因素处理,使编码合成代谢途径中某些酶的基因突变,丧失了合成某些代谢产物(如氨基酸、核酸碱基、维生素)的能力,必须在基本培养基中补充该种营养成分,...
生物题,在筛选细菌的营养缺陷型菌株时,为了淘汰野生型菌株,常在什么培 ...
补充培养基:在基本培养基中有针对性地加上某一种或几种其自身不能合成的成分,以满足相应营养缺陷型生长的培养基。】】限量补充培养法: 把诱变处理后的细胞接种在含有微量(<0.01%)蛋白胨的基本培养基平板上,野生型细胞就迅速长成较大的菌落,而营养缺陷型则缓慢生长成小菌落。若需获得某一特定...
怎么“应用青霉素法筛选青霉敏感菌中的营养缺陷变异株?”
一楼不懂的就不要瞎扯淡。青霉素法算不上一个专有名词,就是一种筛选营养缺陷型菌株常用的方法。就是在基本培养基中添加青霉素,野生型因为能够在基本培养基上生长所以代谢旺盛,能够被青霉素杀死。而缺陷型的因为不能生长,所处以休眠期,所以不会被青霉素杀死。
如何利用营养缺陷型回复突变测定法定性定量测定某种化学物质的诱变作用...
称为营养缺陷型。紫外线可以诱导细菌发生突变,产生营养缺陷型菌株。筛选营养缺陷型菌株必须经过如下几个步骤:诱变处理、营养缺陷型的检出、划线复证、生长谱鉴定、缺陷型菌株纯化。又因处理的细菌所得到的突变菌仍然是很少的部分,因此必须采用有效的筛选方法,才能分离到突变型 ...
Nature Communications:基因组最小的细菌胃口最大
微生物生态学的一项新研究发现,尽管一些最小的基因组细菌可能看起来不显眼,但它们对营养的需求却出人意料地大。在Nature Communications上发表的文章揭示了营养缺陷型细菌在特定栖息地的分布情况,以及这种缺陷与基因组精简之间的联系。在微生物世界中,氨基酸合成能力的缺失并不罕见,特别是在资源稀缺的环境...
,如何从现成的谷氨酸野生型菌株中选育 出生物素营养缺陷型,请设计...
产谷氨酸的野生型菌株本身就是生物素缺陷型,用不着再费力地选育。谷氨酸向细胞外分泌,存在膜的通透性问题。如果细胞膜是完整的,谷氨酸就不能分泌到培养液中。而生物素是细菌合成细胞膜必需的营养素,只要生物素供给充足,培养液中就不会有谷氨酸。正是由于这个原因,野生型谷氨酸产生菌,都是生物素缺陷型...
细菌中丧失合成某种营养物质能力的突变型为
营养缺陷型是指野生型菌株由于基因突变,致使细胞合成途径出现某些缺陷,丧失合成某些物质的能力,如氨基酸、维生素、碱基等的合成能力出现缺陷,必须在基本培养基(野生型菌株最低营养要求)中添加缺陷的营养物质(补充培养基)才能正常生长的一类突变株.基本培养基中加入一些营养物质,可以满足该微生物的各种...
杭中抗感:[答案] 一.筛选营养缺陷型菌株的一般步骤和方法①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株.用15W或20W紫外灯管,距离15cm~30cm,照射10sec~20min.在照射受试菌前,灯管须预热20min,使灯光稳定.菌...
团风县19593391713: 怎样筛选营养缺陷型菌株 - ?
杭中抗感: 一.筛选营养缺陷型菌株的一般步骤和方法 ①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株.用15W或20W紫外灯管,距离15cm~30cm,照射10sec~20min.在照射受试菌前,灯管须预热20min,使灯光稳定.菌悬液...
团风县19593391713: 如何更快筛选到高表达菌株 - ?
杭中抗感: 一.筛选营养缺陷型菌株的一般步骤和方法 ①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株.用15W或20W紫外灯管,距离15cm~30cm,照射10sec~20min.在照射受试菌前,灯管须预热20min,使灯光稳定.菌悬液要磁力搅拌,使所.
团风县19593391713: 如何淘汰野生菌体原理及方?在营养缺陷型突变菌株筛选中,如何淘汰野 ?
杭中抗感: .筛选营养缺陷型菌株般步骤和方法①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株用15W或20W紫外灯管距离15cm~30cm照射10sec~20min...
团风县19593391713: 筛选营养缺陷型突变株的步骤 - ?
杭中抗感:[答案] 第一步,诱变剂处理,与一般诱变处理相同 第二步,淘汰野生型:通过抗生素法或菌丝过滤法就可淘汰为数众多的野生型菌株,从而达到浓缩极少数营养缺陷型的目的 第三步,检出缺陷型:有夹层培养法,限量补充培养法,逐个检出法,影印平版...
团风县19593391713: 如何从野生型和营养缺陷型混合菌液中检出营养缺陷型菌株?至少俩种方法~并说明其原理 - ?
杭中抗感:[答案] 1,将稀释的待测样品与基本培养基混匀倒平板,适宜条件下培养长出菌落,用记号笔在皿底做好标记,再在原平板上倒一层完全培养基,适宜条件培养,一段时间后原来没有长出菌的地方长出了菌落,就证明有营养缺陷型存在. 2,影印法,将稀释...
团风县19593391713: 论述获得微生物营养缺陷型菌株的方式? - ?
杭中抗感:[答案] 采用辐射,化学试剂等因素处理细菌,以提高其变异几率,关键步骤是进行营养缺陷型微生物的筛选工作,营养缺陷型是指通过诱变产生的,由于发生了丧失某酶合成能力的突变,因而只能在加有该酶合成产物的培养基中才能生长的突...