请问HPLC是做什么的?原理?操作方法?
HPLC是高效液相色谱,英文全称是HighPerformanceLiquidChromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。
用途:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。
原理:高效液相色谱以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析和分离。
操作方法:如下图所示,溶剂贮器中的流动相被泵吸入,经梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出,经测其压力和流量,导入进样阀(器)经保护柱、分离柱后到检测器检测,由数据处理设备处理数据或记录仪记录色谱图,馏分收集器收集馏分,废液瓶收集废液。
扩展资料:
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为经典液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。高效液相色谱法(HighperformanceLiquidChromatography,HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
HPLC根据固定相和流动相的成分分为正相色谱和反向色谱。
正相色谱法
采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与腈基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正已烷、环已烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。
反相色谱法
一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。RPC在现代液相色谱中应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。
参考资料:百度百科-高效液相色谱
关于HPLC 和 UPLC 的 6 个基本问题
探索高效液相色谱 (HPLC) 和超高效液相色谱 (UPLC):六问六答揭示神秘世界<\/ 1. 高效液相色谱 (HPLC):技术基础<\/ HPLC,即High Performance Liquid Chromatography<\/,也称高压液相色谱,是过去30年中实验室分析的主力军。它在分析过程中能承受高达6000 psi<\/的压力,为复杂样品的分离提供了强大工具。
uplc存在的问题不包括
HPLC是指高效液相色谱(HPLC)。第二,技术原理不同 1、UPLC 借助HPLC(高效液相色谱)的理论和原理,涵盖了小颗粒填充、极低系统体积、快速检测手段等新技术,提高了分析的通量、灵敏度和色谱峰容量。2、高效液相色谱 以液体为流动相,用高压灌注系统将不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流...
高效液相色谱鉴别法利用什么进行鉴别
高效液相色谱一般用作含量测定。鉴别的话一般都是定性的做一做,比如理化、薄层。当然HPLC也可以用作鉴别,比如说指纹图谱之类的种种。原理无非是根据样品在固定相和流动相之间分配系数不同的差异,来分离不同化合物。
高效液相色谱法答辩时会提哪些问题?
我的实验最后一步也是做HPLC测定含量,首先应该知道HPLC的原理及使用范围,其次,应该会问你是怎么摸索色谱条件的吧?还有就是使用高效液相色谱仪的注意事项。如果说得不恰当,希望大家互相交流交流。
...比较正规的,我想问下仪器的操作一般考哪几种,考什么题目_百度...
如果是面试,到公司里边的话,一般你可以看一看关于GC、HPLC、ABS、IR、UV等经常应用得到的分析仪器,建议尽量看进口仪器,一般国产仪器质量真的不怎么样,而且,如果你能把进口机子弄明白,别的基本上不会有什么问题了;操作的话,一般只是问一些常规操作,理论考试一般比比较注重于方法的选择方面的以及...
急!HPLC问题
按药典规定应该平行取两份样品,每份样品用HPLC测两次,也就是进样两次,总计四张样品色谱图,必须同时做对照品,对照品在同一保留时间内两张土以上,一般是三张对照品图,对照品取三张平均值,样品两两求平均值,计算,得两份样品的含量,再求平均值,才是你的药材最接近真实值的含量结果。中国药典是...
...规格:HPLC\/500ml 和AR\/500ml 分别是什么级别的醇?
HPLC级别是色谱级别,具体是高效液相色谱级别的试剂,AR级别是分析纯级别,比HPLC低一个级别,如果只是为了做实验就使用AR的即可,HPLC的级别较高,一般是HPLC设备专用的试剂
HPLC问题,请帮忙。
应该是固定的。不同保留时间的色谱峰,应该表现出的是不同的物质,如果你跑的是反相色谱,那么色谱峰越靠后,它对应物质的极性也就越小。如果你这个图样品浓度不高的话,选220nm或再高点也没关系,主要看你的供试浓度和峰面积紫外吸收情况,不过既然有药典做参照,215nm就OK。
离子色谱是干什么的,能为用户解决什么问题?
离子色谱是高效液相色谱HPLC的一种,是分析阴阳离子的一种液相色谱方法,该方法具有选择性好、灵敏、快速、简便等优点,并且可以同时测定多种组分。通常情况下,离子色谱可以分为三种类型:离子交换色谱、离子排斥色谱、离子对色谱。离子交换色谱 离子交换色谱以离子间作用力不同为原理,主要用于有机和无机阴...
间二异丙苯检测方法 液相.具体的操作方法
您好很高兴为您解答。如图所示,您可参考以下内容【回答】【回答】【回答】【回答】【回答】可以有简单的具体可操作的检测方法?【提问】有么?人要诚实,你的回答对我有帮助么?【提问】稍等【回答】建立了用高效液相色谱(HPLC)分析间二异丙苯(DIPB)氧化制备间苯二酚反应的中间产物的方法;考察了HPLC...
保净低分: 简单的说,和小学做的叶绿素展开实验是一样的. 色谱柱中有固定相,把样品溶在流动相里,经过色谱柱,(流动相一直在走)样品会在流动相与固定相之间徘徊:)不同样品性质不同,在各相中停留的时间比例也不同,就造成速度不同,最后到达检测器的时间就不同,在显示器上的图形就会出峰,实现了分离,也可用于定性定量分析,很精确,用途很多. 这是大白话说出来的,我想你肯定能听懂,如果想知道详细的,百度一下:)
芦溪县13058185803: 什么叫HPLC法 - ?
保净低分: 液相色谱仪:=High Performance Liquid Chromatography 高性能液体色谱HPLC是高效液相色谱的英文缩写,其与普通的液相色谱的区别在于其分析时间短、理论塔板数高、样品用量少等.但其基本原理与普通液相色谱是相同的,都是根据待分析混合样品中各个组分在流动相和固定相(即色谱柱)中的分配系数不同来达到分离目的的.最简单的比喻是几个人赛跑,在相同时间内速度不同的人就会拉开距离. http://www.sdrug.com/dd/Html/200412554017-4.Html纯度:不纯物中含纯物质的质量分数 =(纯物质的质量/不纯物质的质量)*100% 其他建议看看化学试剂网!
芦溪县13058185803: HPLC仪的工作原理是什么? - ?
保净低分: 高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几...
芦溪县13058185803: 请问HPLC是做什么的?原理?操作方法? - ?
保净低分: HPLC培训教程 我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比较表: 方法 项目 数量 1985年版 1990年版 1995年版 2000年版 HPLC法 鉴别 9 34 150 检查 12 40 160 含量测定 7 60 117 387 鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分...
芦溪县13058185803: HPLC原理是什么 - ?
保净低分: (通常用的最多的是第二种,即分配平衡,)色谱分离原理 高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法. 1.液固色谱法 使用固体吸附剂,被分离...
芦溪县13058185803: 高效液相色谱?
保净低分: 现在一般说的就是高效液相色谱(HPLC),原理如下文,但具体的操作就要看具体的仪器了,因为国内外的不同厂家生产的操作方案可能有所不同,而且你去面试要使用HPLC的话建议你最好先去找台能使用的熟悉下,毕竟这玩意的价格不是一般的.而有些普通的液相色谱就很简单了,只要你看懂了原理就能进行操作,没有什么特别的难度.
芦溪县13058185803: 如何使用液相色谱 - ?
保净低分: 原发布者:jing2595832液相色谱基础知识2017年04月11日一、什么是色谱色谱是一种分离工具,而不是传统意义上的分析仪器.色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分...
芦溪县13058185803: 糖的色谱分离方法及原理有哪些? ?
保净低分: 糖的色谱分离方法及原理如下: (1)高效液相色谱法在淀粉糖行业,糖浆分析是日常很重要的工作之一,在 工厂中最常用的仪器分析方法是高效液相法(HPLC).在...
芦溪县13058185803: 什么是液相荧光色谱,原理是什么? - ?
保净低分: 液相荧光色谱跟常说的HPLC原理一样,只是常规的高效液相色谱(HPLC)是用紫外检测器,而液相荧光色谱是用荧光检测器.以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析.利用液相荧光色谱分析的样品必须是有发射荧光的物质,像叶绿素一样在一定的激发波长下有特定荧光发射.
芦溪县13058185803: hplc - 高效液相色谱的介绍是什么? ?
保净低分: 该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用