求大肠菌群中规定的是什么怎么配

跪求大肠菌群试验方法。具体的！~

直接买乳糖胆盐发酵培养基。上面有说明书配置方法，一般单料配置是35g培养基加1000ml水，如果是双料就是加倍70g加1000ml水溶解。这个培养基是不会凝固的。直接配好后分装在试管中灭完菌、冷却后用吸管吸取样品进去摇匀、培养就可以了。

MPN 为最大可能数(Most Probable Number)的简称。这种方法，对样品进行连续系列进行稀释，加入培养基进行培养，从规定的反应呈阳性管数的出现率，用概率论来推算样品中菌数最相近似的数值。MPN检索表只给了三个稀释度，如改用不同的稀释度，则表内数字应相应降低或增加10倍。注意国家标准和行业标准中所附MPN表所用稀释度是不同的，而且结果报告单位也不相同。 无论是国家标准的三步法还是行业标准的两步法，都利用了乳糖发酵管进行了两次发酵试验，培养基的配制略有不同，但都是为了证实培养物是否符合大肠菌群的定义，即“在37℃分解乳糖产酸产气”。初发酵阳性管，不能肯定就是大肠菌群细菌，经过证实试验后，有时可能成为阴性。有数据表明，食品中大肠菌群检验步骤的符合率，初发酵与证实试验相差较大。因此，在实际检测工作中，证实试验是必需的。 国家标准中，需要对初发酵阳性培养物接种伊红美蓝平板分离，对典型和可疑菌落进行观察和证实试验。由于大肠菌群是一群细菌的总称，在平板大肠菌群菌落的色泽、形态等方面较大肠菌更为复杂和多样，而且与大肠菌群的检出率密切相关。国家标准方法规定伊红美蓝平板为分离培养基，在该平板上，大肠菌群菌落呈黑紫色有光泽或无光泽时，检出率最高；红色、粉红色菌落检出率较低。另外，挑取菌落数与大肠菌群的检出率有密切关系，只挑取一个菌落，由于机率问题，尤其当菌落不典型时，很难避免假阴性的出现。所以挑菌落一定要挑取典型菌落，如无典型菌落则应多挑几个，以免出现假阴性。 大肠菌群检验中常用的抑菌剂有胆盐、十二烷基硫酸钠、洗衣粉、煌绿、龙胆紫、孔雀绿等。抑菌剂的主要作用是抑制其它杂菌，特别是革兰氏阳性菌的生长。国家标准中乳糖胆盐发酵管利用胆盐作为抑菌剂，行业标准中LST肉汤利用十二烷基硫酸钠作为抑菌剂，BGLB肉汤利用煌绿和胆盐作为抑菌剂。抑菌剂虽可抑制样品中的一些杂菌，而有利于大肠菌群细菌的生长和挑选，但对大肠菌群中的某些菌株有时也产生一些抑制作用。有些抑菌剂用量甚微，称量时稍有误差，即可对抑菌作用产生影响，因此抑菌剂的添加应严格按照标准方法进行。

大肠菌群测定的操作细则
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。
食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。
1 设备和材料
1.1 温箱：36±1℃。
1.2 冰箱:0～4℃。
1.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃。
1.4 天平。
1.5 显微镜。
1.6 均质器或乳钵。
1.7 平皿:直径为90mm。
1.8 试管。
1.9 吸管。
1.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。
1.11 玻璃珠:直径约5mm。
1.12 载玻片。
1.13 酒精灯。
1.14 试管架。
2 培养基和试剂
2.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。
2.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25规定。
2.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。
2.4 EC 肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。
2.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。
2.6 生理盐水。
2.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定。
3 操作步骤
3.1 检样稀释
3.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1:10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000-10 000 r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。
3.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。
3.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管。
3.1.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度,接种3管。
3.2 乳糖发酵试验
将待检样品接种于乳糖 胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃ 温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。
3.3 分离培养
将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃ 温箱内,培养18-24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。
3.4 证实试验
在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置 36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。
3.5 报告
根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。
4 粪大肠菌群(faecal coliform)
4.1 用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见3.2条)转种于EC肉汤管内,置44.5±0.2℃水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面),培养24±2h,经培养后,如所有EC肉汤管均不产气,则可报告为阴性;如有产气者,则将所有产气的EC肉汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上,置 培养18-24h,凡平板上有典型菌落者,则证实为粪大肠菌群阳性。
4.2 结果报告
根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群的MPN值。

大肠菌群主要存在于水及动物的肠道,是食品及水受粪便污染的主要细菌卫生学指标.我国即将以大肠菌群来取代以往的大肠杆菌,作为药品的粪便污染指示菌,这有利于提高我国药品质量.传统的实验室大肠菌群计数方法是采用发酵最可能数即,MPN(most probable number)法,其主要的生化反应建立在乳糖发酵的基础上,尽管存在着计数方法较为简单等优点,但也存在着不能准确计数、实验时间长等缺点;而利用Endo培养基平板法能较好地解决MPN法计数缺陷,笔者对同一组易受污染的中成药半成品运用MPN法和Endo培养基平板法进行了比较研究,

---

麒麟区19777677673： 跪求大肠菌群试验方法.具体的!主要是说的很概括.我想知道比如说双料和单料乳糖胆盐发酵管的区别?各自是怎么配置?是等培养基凝固再吸入样品吗?越... - ？
越致达体：[答案] 直接买乳糖胆盐发酵培养基.上面有说明书配置方法,一般单料配置是35g培养基加1000ml水,如果是双料就是加倍70g加1000ml水溶解.这个培养基是不会凝固的.直接配好后分装在试管中灭完菌、冷却后用吸管吸取样品进去摇匀、培养就可以了.

麒麟区19777677673： 大肠菌群显色培养基配方 - ？
越致达体： 蛋白胨 10g 酵母膏粉 3g 氯化钠 5g 十二烷基硫酸钠 0.1g 琼脂 12g 显色底物 2.7g 最终pH 7.0±0.2 这是环凯的配方,可以上官网具体了解.

麒麟区19777677673： 饮用水中大肠杆菌标准是多少?我国饮用水卫生标准中大肠杆菌菌群数标 ？
越致达体： 我国《生活饮用水卫生标准》GB5749-85中关于生活饮用水的细菌标准的具体规定如下: 1 细菌总数1ml水中不超过100个. 2 大肠杆菌数1 L 水中不超过3个. 3 若只经过加氯消毒即供作生活饮用水的水源水,大肠菌群数平均每升不得超过1000个;经过净化处理及加氯消毒后供作生活饮用水的水源水,大肠菌群数平均每升不得超过10000个.

麒麟区19777677673： 我国饮用水水质标准所规定的大肠菌群数是每升多少?细菌总数是每毫升多少? - ？
越致达体： 生活饮用水卫生标准 GB 5749-2006规定:总大肠菌群(MPN/100mL或CFU/100mL)不得检出;菌落总数(CFU/mL)100.

麒麟区19777677673： 大肠菌群鉴定用什么培养基? - ？
越致达体： 大肠菌群是国内外通用的食品污染常用指示菌之一.食品中检出大肠菌群,提示有被致病菌(如沙门氏菌、致病性大肠埃希氏菌)污染的可能性.大肠菌群超标有可能会导致肠道外感染、急性腹泻等. 可以用 结晶紫中性红胆盐琼脂、 煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB)或者选用大肠菌群显色培养基进行筛选检测.

麒麟区19777677673： 检测食品中大肠菌群常用什么培养基,该培养基中各种成分的主要作用是什么 - ？
越致达体： 分别使用乳糖发酵管或乳糖胆盐发酵管进行初发酵,如果为阳性再使用EC肉汤进行复发酵试验.其中,乳糖发

麒麟区19777677673： 在测定粪大肠菌群时用的乳糖胆盐发酵管和乳糖发酵管的培养基配方中的0.004%溴甲酚紫水溶液是怎么配的呢? - ？
越致达体： 取溴甲酚紫0.1g,加0.02mol/L氢氧化钠溶液20ml使溶解,再加水稀释至100ml得0.1%的溴甲酚紫水溶液;再取4ml上述溶液加水稀释至100ml,虽然浪费点,但是实用,我们在实验室都这么操作的.

麒麟区19777677673： 大肠菌群的水质参数是什么? ？
越致达体： 作为水质参数的原因水质的快速测定①在人粪中大量存在,因此在为人粪所污染的水... 1976年中国颁布的生活饮用水水质标准规定,每升水中大肠菌群不超过3个.

麒麟区19777677673： 食品中卫生 微生物学 检验大肠菌群测定 什么是大肠菌群 它的数指什么 - ？
越致达体： 一、大肠菌群介绍 大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在...

麒麟区19777677673： 急求啊,食品中所有类别的大肠菌群的判定标准. - ？
越致达体： 在食品伙伴网上的标准里查找GB4789.39 粪大肠菌群计数(2014-6-1实施).食品里大肠杆菌的判定是以粪大肠杆菌的数量为标准的...判定标准是数量上的限制,具体可查一下国标上的数值....望采纳...