用actin基因检测反转录结果，是怎么操作？具体点，谢谢。。。
1.要有你的反转录产物
2.要设计或者有可以pcr扩增actin基因的引物
3.用一般pcr的方法，以你的反转录产物为模板，用扩增actin的引物进行pcr扩增
4.扩增完之后跑电泳检测，看条带大小，最好再测序验证一下，是否为目的片段
如果扩出来了，即能证明你的反转录没有问题，可以用反转录产物做别的实验了
你首先要设计actin的引物，根据引物的GC含量确定退火温度，这个在设计引物的软件上可直接给出，至于变性和延伸跟其他基因的PCR程序没啥区别。要P出来很清晰的一条带，并且和你设计的那段长度是一样的，说明反转录是成功的。
Actin是管家基因，在任何组织和任何发育阶段表达量都是恒定的，所以我们用Actin来检测反转录时RNA有没有问题，以及反转录的目的基因表达量如何。所以你要用actin的话，你需要先设计一对actin的引物，然后用actin的引物去跑RT-PCR，如果电泳Actin条带，那么你再用同样的RNA或者cDNA模板做RT-PCR，这样你的结果就是可靠的。用actin基因检测反转录结果,是怎么操作?具体点,谢谢。。。
Actin是管家基因，在任何组织和任何发育阶段表达量都是恒定的，所以我们用Actin来检测反转录时RNA有没有问题，以及反转录的目的基因表达量如何。所以你要用actin的话，你需要先设计一对actin的引物，然后用actin的引物去跑RT-PCR，如果电泳Actin条带，那么你再用同样的RNA或者cDNA模板做RT-PCR，这样你的...
如何用actin基因检测反转录结果,具体点,谢谢。。。
1.要有你的反转录产物 2.要设计或者有可以pcr扩增actin基因的引物 3.用一般pcr的方法，以你的反转录产物为模板，用扩增actin的引物进行pcr扩增 4.扩增完之后跑电泳检测，看条带大小，最好再测序验证一下，是否为目的片段 如果扩出来了，即能证明你的反转录没有问题，可以用反转录产物做别的实验了 ...
怎样用actin基因检测反转录结果?PCR程序。谢谢!
你首先要设计actin的引物，根据引物的GC含量确定退火温度，这个在设计引物的软件上可直接给出，至于变性和延伸跟其他基因的PCR程序没啥区别。要P出来很清晰的一条带，并且和你设计的那段长度是一样的，说明反转录是成功的。
用actin基因检测反转录结果,是什么个
你首先要设计actin的引物，根据引物的GC含量确定退火温度，这个在设计引物的软件上可直接给出，至于变性和延伸跟其他基因的PCR程序没啥区别。要P出来很清晰的一条带，并且和你设计的那段长度是一样的，说明反转录是成功的。
乳腺癌21基因检测对乳腺癌预后的作用
5个参考基因指β-actin （ACTB）、GAPDH、RPLPO、GUS、TFRC。21基因检测结果以积分的形式表示，积分用于对肿瘤可能发生的生物学行为进行预测，提供个体化的治疗效果预测和10年复发风险的预测。二、乳腺癌患者都需要做化疗吗？乳腺癌已形成以手术为中心，化疗、放疗、内分泌治疗为辅助的综合治疗模式。其中，...
反转录cDNA第一链,进行PCR扩增,只有引物二聚体,怎么办呢?
两个原因：1、反转失败，模板里没有DNA；2、PCR失败，例如引物不行，退火温度不对等。这也没办法了，你先确定引物能不能从基因组里扩出条带。不过这种情况很可能是反转失败了。
对动物了解的动物学家进来
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进行PCR扩增时为什么将cDNA模板稀释以后就出现引物二聚体了?
根本原因应该是RNA纯度不够，导致反转录的cDNA浓度低。稀释之后DNA与引物结合的机会少了，引物自己结合成二聚体.多种原因要逐一排除：1.先用内参基因检测一下如 β-actin，GAPDH，18s-rRNA这类基因是生物体或者细胞中稳定表达的基因，表达量几乎不变，如果有条带证明反转录没问题。2.内参检测时候最好...
道矩新红： actin在各个组织里是组成型表达,并且表达量相对稳定、一致. 用它检查反转录结果原因有:1.因为是组成型表达,所以无论你是什么组织RNA反转,最后的cDNA里都含有actin,如果检测到了,说明反转没有问题,如果没有检测到,说明反转出了问题; 2.因为表达量相对稳定、一致,actin也可以作为检测反转效率有没有差异的一个标准,如果actin PCR的条带相对一致,说明这一系列的模板反转效率大体一致,可以用来做RT表达量比较. PS:actin并不是唯一的检测基因,一般都是配合ub7,tublin,18sRNA等看家基因一起检测.研究表明actin的表达量有一定的组织特异性.
札达县18351583141： 用actin基因检测反转录结果,是怎么操作?具体点,谢谢... - ？
道矩新红： Actin是管家基因,在任何组织和任何发育阶段表达量都是恒定的,所以我们用Actin来检测反转录时RNA有没有问题,以及反转录的目的基因表达量如何.所以你要用actin的话,你需要先设计一对actin的引物,然后用actin的引物去跑RT-PCR,如果电泳Actin条带,那么你再用同样的RNA或者cDNA模板做RT-PCR,这样你的结果就是可靠的.
札达县18351583141： 如何用actin基因检测反转录结果,具体点,谢谢...？
道矩新红： 1.要有你的反转录产物 2.要设计或者有可以pcr扩增actin基因的引物 3.用一般pcr的方法,以你的反转录产物为模板,用扩增actin的引物进行pcr扩增 4.扩增完之后跑电泳检测,看条带大小,最好再测序验证一下,是否为目的片段 如果扩出来了,即能证明你的反转录没有问题,可以用反转录产物做别的实验了
札达县18351583141： 怎样用actin基因检测反转录结果?PCR程序.谢谢! - ？
道矩新红： 你首先要设计actin的引物,根据引物的GC含量确定退火温度,这个在设计引物的软件上可直接给出,至于变性和延伸跟其他基因的PCR程序没啥区别.要P出来很清晰的一条带,并且和你设计的那段长度是一样的,说明反转录是成功的.
札达县18351583141： 如何检测反转录效果 - ？
道矩新红： 自己设计引物,进行检测.比较信的过.至于RNA提取反转录,及PCR扩增等试剂,几家知名试剂公司的效果都比较好.本实验室可以代测,用RT-PCR方法. 本人在
札达县18351583141： 设计一个检测某一基因是否转录的检测方法的实验,简述其过程与原理. - ？
道矩新红： 原理:转录是以一条DNA链为模板,合成出一条mRNA的过程.所以,检测某一基因在特定条件下是否转录,可以提取样品的mRNA,反转录成cDNA,然后用扩增该基因的PCR引物扩增,如果有条带就是说明转录,没有条带就是不转录.过程:1.提取样品mRNA;2.反转录合成cDNA;3.设计该基因特异的PCR引物;4.进行PCR扩增,电泳,检测结果.
札达县18351583141： 反转录PCR和荧光定量PCR - ？
道矩新红： 一个是RT-pcr,reverse transcription pcr的简写 一个是real-time,一般不会简化为“rt-pcr”,又称实时定量pcr,Q-pcr,应该就是你说得荧光定量 而你要测mRNA的量,就是先反转录成cDNA,再作定量pcr,就是前两者的合,常称为qRT-PCR 有很多real-time的试剂盒,你可以网上看下说明书
札达县18351583141： actin检测反转录产物时 跑多长时间电泳?多大电压 谢谢 - ？
道矩新红： 如果是蛋白,跑western,分子量40KD,普通SDS胶100V,一个小时足够.如果是跑PCR,那要看你的产物有多大.通常PCR产物几百bp, 100V 跑15分钟就可以了.
札达县18351583141： 反转录法获取目的基因 - ？
道矩新红： 因为直接从生物体中提取的基因的编码区是不连续的有不编码蛋白质的内含子部分,而反转录来的cDNA的编码区是连续的(成熟mRNA中的序列都是由基因的编码区的外显子部分转录来的),为了节省目的基因片段的长度,选择cDNA为目的基因. 怎么不给悬赏?
