怎样用actin基因检测反转录结果？PCR程序。谢谢！
1.要有你的反转录产物
2.要设计或者有可以pcr扩增actin基因的引物
3.用一般pcr的方法，以你的反转录产物为模板，用扩增actin的引物进行pcr扩增
4.扩增完之后跑电泳检测，看条带大小，最好再测序验证一下，是否为目的片段
如果扩出来了，即能证明你的反转录没有问题，可以用反转录产物做别的实验了
你首先要设计actin的引物，根据引物的GC含量确定退火温度，这个在设计引物的软件上可直接给出，至于变性和延伸跟其他基因的PCR程序没啥区别。要P出来很清晰的一条带，并且和你设计的那段长度是一样的，说明反转录是成功的。
你首先要设计actin的引物，根据引物的GC含量确定退火温度，这个在设计引物的软件上可直接给出，至于变性和延伸跟其他基因的PCR程序没啥区别。要P出来很清晰的一条带，并且和你设计的那段长度是一样的，说明反转录是成功的。求常用的植物actin基因序列或引物,山茶科的更好(查了文献没查到),文献...
植物大麦、玉米等actin 714bp F 5'-CTCGACTCTGGTGATGGTGTG-3’R 5'-TCGTACTCCGCCTTGGAGAT-3’括号是简并引物的意思，即合成引物时，该位置会随机添加其中一个：5‘-CAGATGGC（GT）GA（CT）GGTGAAGA（TC）AT-3’的一个可能是：5‘-CAGATGGC G GA C GGTGAAGA T AT-3’自己排列组合一下就...
actin2基因在植物中起什么作用
actin是编码肌动蛋白（actin）的基因.对植物生长起调控作用。
做实验 | 选对Western Blot内参抗体,实验成功一半!
为什么要使用内参？Western Blot是蛋白表达研究的常用手段，但操作过程中的误差可能影响结果。通过内参，可以校正总蛋白浓度和上样过程中的偏差，确保定量分析的可靠性。选择内参时，要考虑样本的物种来源、目的蛋白的分子量以及表达部位。例如，哺乳动物细胞通常选择β-actin，植物样本则选plant actin，而核...
实验中ACTB是什么意思?
ACTB是人类beta-actin基因的名称，是一种常见的蛋白质编码基因。该基因位于人类染色体7号的区域，并参与了细胞稳定性和运动方面的重要生物学功能。因此，ACTB在细胞生物学、分子生物学以及生物医学研究中扮演着非常重要的角色。在分子生物学实验中，ACTB通常被作为内部控制基因使用。由于内部控制基因的表达稳定...
怎样检测actin基因在不同组织的表达量高低
actin一般作为内参使用，意味着它的表达水平在多数细胞中是比较一致的。如果需要比较actin的话，就需要使用其他的内参了，比如GAPDH。具体选择什么基因作为内参，就和你选取的组织有关，最好查阅一下文献，然后多选择几个内参比较一下。
mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参吗
mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参 miRNA通过与转录本的相互作用，关闭或抑制基因的表达。最近的研究表明它们影响了约三成的基因。miRNA在多个组织中差异表达，这就让表达图谱分析成为研究的重点。同时，miRNA的过表达和抑制也是近年来常用的研究方法。我知道和使用过的U6内参基因只有两个：RNU6-1和RNU6...
β-Actinβ-Actin用途
β-Actin, 作为PCR实验中的常见内参，其在Western Blot分析中的作用不可忽视。内参，即内部对照，对于哺乳动物细胞表达研究，通常指的是由管家基因编码、在各组织和细胞中稳定表达的蛋白，如β-Actin、β-Tubulin和GAPDH等。这些蛋白的表达量相对恒定，常被用来监测蛋白表达水平的变化。β-Actin抗体因其在...
水稻actin内参基因在表达水平上稳定性如何,是不是受到各杂志公认的内...
不一定，条件不一样，比如不同组织器官、不同生长条件（盐、光、温、热）下内参基因表达肯定不太一致，ACTIN也一样，这方面的文献应该很多，你可以找到的，报道那个稳定你就用那个。
β–actin蛋白意义
β-Actin是管家基因，在不同细胞中均有表达。用其作为内参，是指在western实验中通过内参的含量的多少来调整样品之间的上样量，相当于作为标准曲线的作用，只有调整样品的上样量使得内参的含量一致才能比较不同蛋白间表达量的差别。western使用的抗体视个人所需不同，可以是兔抗、羊抗、鼠抗，做之前要先...
计算基因样本的表达量是什么意思
内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因，又叫看家基因，比如常用的GAPDH，actin。或者18srRNA也可以。如果内参表达量一致，说明你PCR的上样量一致，样本的质量也一致。如果出入很大，说明你的样本的浓度或者是质量有问题。测到的目的基因的表达量就不可靠了 ...
咸明新癀： 1.要有你的反转录产物2.要设计或者有可以pcr扩增actin基因的引物3.用一般pcr的方法,以你的反转录产物为模板,用扩增actin的引物进行pcr扩增4.扩增完之后跑电泳检测,看条带大小,最好再测序验证一下,是否为目的片段 如果扩出来了,即能证明你的反转录没有问题,可以用反转录产物做别的实验了
雨城区13761207250： 用actin基因检测反转录结果,是怎么操作?具体点,谢谢... - ？
咸明新癀： Actin是管家基因,在任何组织和任何发育阶段表达量都是恒定的,所以我们用Actin来检测反转录时RNA有没有问题,以及反转录的目的基因表达量如何.所以你要用actin的话,你需要先设计一对actin的引物,然后用actin的引物去跑RT-PCR,如果电泳Actin条带,那么你再用同样的RNA或者cDNA模板做RT-PCR,这样你的结果就是可靠的.
雨城区13761207250： 怎样用actin基因检测反转录结果?PCR程序.谢谢! - ？
咸明新癀： 你首先要设计actin的引物,根据引物的GC含量确定退火温度,这个在设计引物的软件上可直接给出,至于变性和延伸跟其他基因的PCR程序没啥区别.要P出来很清晰的一条带,并且和你设计的那段长度是一样的,说明反转录是成功的.
雨城区13761207250： 急急急,,用actin基因检测反转录结果,是什么个原理?请具体点,易懂点,谢谢.. - ？
咸明新癀： actin在各个组织里是组成型表达,并且表达量相对稳定、一致. 用它检查反转录结果原因有:1.因为是组成型表达,所以无论你是什么组织RNA反转,最后的cDNA里都含有actin,如果检测到了,说明反转没有问题,如果没有检测到,说明反转出了问题; 2.因为表达量相对稳定、一致,actin也可以作为检测反转效率有没有差异的一个标准,如果actin PCR的条带相对一致,说明这一系列的模板反转效率大体一致,可以用来做RT表达量比较. PS:actin并不是唯一的检测基因,一般都是配合ub7,tublin,18sRNA等看家基因一起检测.研究表明actin的表达量有一定的组织特异性.
雨城区13761207250： 如何检测反转录效果 - ？
咸明新癀： 自己设计引物,进行检测.比较信的过.至于RNA提取反转录,及PCR扩增等试剂,几家知名试剂公司的效果都比较好.本实验室可以代测,用RT-PCR方法. 本人在
雨城区13761207250： actin检测反转录产物时 跑多长时间电泳?多大电压 谢谢 - ？
咸明新癀： 如果是蛋白,跑western,分子量40KD,普通SDS胶100V,一个小时足够.如果是跑PCR,那要看你的产物有多大.通常PCR产物几百bp, 100V 跑15分钟就可以了.
雨城区13761207250： 设计一个检测某一基因是否转录的检测方法的实验,简述其过程与原理. - ？
咸明新癀： 原理:转录是以一条DNA链为模板,合成出一条mRNA的过程.所以,检测某一基因在特定条件下是否转录,可以提取样品的mRNA,反转录成cDNA,然后用扩增该基因的PCR引物扩增,如果有条带就是说明转录,没有条带就是不转录. 过程: 1.提取样品mRNA; 2.反转录合成cDNA; 3.设计该基因特异的PCR引物; 4.进行PCR扩增,电泳,检测结果.
雨城区13761207250： PCR没P出条带 很迷茫 - ？
咸明新癀： 情况比较复杂,你得确认1.你的RNA没问题,没有被降解,cDNA合成没问题.可以用该材料的actin引物做PCR检测试试.2你P的基因如果是已知序列,那么设计引物应该很简单,如果是未知的,那么兼并引物没P出东西来是有可能的.若是根据已知序列设计的引物而没有P出产物那就是你PCR体系或者Tm有问题了,试试TOUCHDOWN程序.若是兼并引物,采用touchdown程序,没有P出来的话,要么是引物不行,要么是你的材料取材时间不对,你要扩增的基因没有表达出来.问题比较多,一个一个排除,确保你实验的科学性.祝实验成功.
雨城区13761207250： western blot 的内参不一致,急求助 - ？
咸明新癀： 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来...
雨城区13761207250： 反转录PCR和荧光定量PCR - ？
咸明新癀： 一个是RT-pcr,reverse transcription pcr的简写 一个是real-time,一般不会简化为“rt-pcr”,又称实时定量pcr,Q-pcr,应该就是你说得荧光定量 而你要测mRNA的量,就是先反转录成cDNA,再作定量pcr,就是前两者的合,常称为qRT-PCR 有很多real-time的试剂盒,你可以网上看下说明书
