请问流式检测的最小的细胞数量和最小体积是多少

作者&投稿:邰包 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
流式FSC检测细胞大小,如何分析数据?~

流式细胞只能比较细胞的相对大小和胞内的复杂程度,FSC对应的是细胞的相对大小,FSC的值越大表示细胞越大,SSC对应的是细胞内部复杂程度,SSC的值越大说明细胞内部的颗粒越多。
在检测细胞大小的变化是,应使用未处理的细胞为对照,确定电压等检测条件后,在不改变检测条件的前提下,对处理后的细胞进行分析,检测处理后细胞FSC的变化。如果以FSC为横坐标、SSC为纵坐标,处理后的细胞往右偏移则表示细胞变大了;如果处理后的细胞发生了分群,分别设门圈定这些细胞群,就可测出每一群细胞在整个细胞群中的比例及其 大小的变化。
下图为某细胞经处理后细胞大小发生改变的一个例子。

一般FSC是用来看细胞大小的,而且在检测的时候是设为线性的。也就是说,FSC上的信号强弱是和细胞大小成正比的。前提是每次检测的时候机器的设置一样,并且gate out了碎片。你最好把具体的图贴几个,我给你指点一下

流式的检测肯定要一定的细胞,一般是一万个,如果抗体的表达量少的话要收集跟多细胞,30-50um在流式上是可以检测的


请问流式检测的最小的细胞数量和最小体积是多少
流式的检测肯定要一定的细胞,一般是一万个,如果抗体的表达量少的话要收集跟多细胞,30-50um在流式上是可以检测的

dcf是什么?
而MFI就是平均荧光强度(Mean fluorescence intensity),用于表示某个指标的流式检测最终的荧光强度,可根据MFI值的大小,表示本问题中DCF的含量,即ROS的水平。

流式检测外周血淋巴细胞亚群一定要设置阴性对照吗
可以不固定的,直接测没问题的,3个一起。 FITC和PE补偿可能会大点 固定也行,记得是1%的,固定后一周内可用 你不做胞内的,先磨细胞出来,过膜去杂质,计数,取一部分标记然后裂红,上机前再过个膜就OK了

在流式细胞检测细胞周期里,为什么处于S期和G2期的细胞多,就能说明细 ...
所以,不分裂,或者分裂增殖很慢的细胞,大多数都是G1,S和G2的比例很少。而分裂活跃的细胞,则正好相反,S和G2的比例很高,而G1比例就相对比较小了。

尿流式法是什么意思?
在进行尿流式法时,患者需要在一个标准化的容器内排尿,通常需要排尿2-3次。通过实时记录尿流速度和排尿时间,医生可以判断是否存在尿路梗阻、膀胱功能障碍或前列腺问题等疾病,以及根据具体情况选择相应的治疗方案。尿流式法是一项侵入性较小的检查,通常不会对患者造成太大的不适感。然而,患者需要注意...

请问流式细胞仪是否可以检测被放射性同位素标记的物质?
流式细胞仪不是ECT,他只能识别不同的荧光,一般有四个荧光通道FL1-FITC,FL2-PE,FL3和FL4的激光不同厂家可能不同(主要是BD和BECMAN),所以只要是悬浮的颗粒,只要可以标记上荧光,都可以检测。有商品化的抗体,很多,比如anti-human HER-2 FITC 是Bender公司的。你要是想重复别人的试验,最好...

流式细胞术检测贴壁细胞凋亡,是否需收集上清中漂浮的细胞?
要,里面有不少凋亡细胞,将上清吸在离心管理,贴壁的细胞胰酶消化后混一起离心就可以了

如何选择流式荧光
你选用的荧光素必须是你机器所能检测的,有相应的激光和检测通道 单色实验,一般只要能有商品化的抗体就都可以。多色实验,需要考虑释放光光谱的重叠问题,尽量选择不同激光所激发的荧光素来染不同的抗原。根据抗原表达量,亮度最强的荧光素配表达量最低的抗原,而亮度最弱的,配表达量最高的抗原 ...

如何用流式细胞仪检测线粒体数量
isolated liver mitochondria to detect changes relevant to cell death." Cytometry A 60(2): 145-154.最后得到一个相对的半定量 但是问题是,你在分离的过程中会都是大量的线粒体,所以结果是不准的。而且,线粒体也是在不断融合,变化的,是一个动态过程。流式这个方法是无法得到准确数目的。

请教关于流式细胞检测胞内蛋白的问题
流式细胞仪检测细胞内的蛋白首先需要把细胞固定,然后细胞膜通透处理,再染色。不少公司,比如BD都有成套的试剂供应,固定,通透一次性完成。然后就是使用非特异性的同种动物血清(和抗体一个物种,比如小鼠血清)来封闭。再染色。

惠州市14778009816: 做流式 各管细胞数不一样影响结果吗 -
沙庄阿胶: 一般影响不大,除非:(1)有的管的细胞数太少,无法满足流式细胞分析的细胞数基本要求;(2)不同管的细胞数相差很大,而又未对抗体的用量进行相应调整.

惠州市14778009816: 流式一般收多少细胞才有统计学意义 -
沙庄阿胶: 一般一管记录1万个细胞,如果目标细胞群的比例很低,那就要增加记录数量,或者只记录特定细胞群的数量为参照点,而不是全部细胞数

惠州市14778009816: 流式细胞术的细胞数量不一样还能比较荧光值吗 -
沙庄阿胶: 流式的数据应该尽量比较细胞数目系统的样本.如果数目相差过大,出现误差的可能性就会很大.不过流式最终测量的都是相对值,所以还是可以比较的.最常见的就是比较所感兴趣的细胞群在各个样本中所占百分比的不同.荧光值的比较不建议在不同数目的细胞样本间比较.

惠州市14778009816: 流式细胞仪对细胞浓度有要求吗 -
沙庄阿胶: 这个完全取决于你样本的质量,阳性细胞的比率和你对下一步实验的要求.举几个例子:96孔盘单个细胞分选,目标细胞只要96个.如果阳性率是50%,那几百个细胞就可以了,如果阳性率不到1%,那几万个细胞也不一定能选出来.或者,阳性率有20-30%,但是下游实验需要几百万个细胞,那你需要几千万的细胞才可以满足.

惠州市14778009816: 流式细胞仪检测细胞凋亡需要多少体积的细胞 -
沙庄阿胶: 1.收集细胞{数目约(1~5)*10 6个/mL},500 1000 r/min离心5min ,弃去培养液. 2.3ml PBS洗涤1次. 3.离心去PBS,加入冰预冷的70% 的乙醇固定,4℃,1—2小时. 4.离心弃去固定液,3mlPBS重悬5 min. 5.400目的筛网过滤1次,500—10 00r/min离心5min,弃去PBS. 6.用1ml PI染液染色,4℃避光30

惠州市14778009816: 什么是流式细胞术 -
沙庄阿胶: 流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,与传统的荧光镜检查相比,具有速度快、精度高、准确性好等优点,成为当代最先进的细胞定量分析技术.

惠州市14778009816: 流式细胞仪的原理和操作过程 -
沙庄阿胶: 原理: 流式细胞仪可同时进行多参数测量,信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号.测量是在测量区进行的,所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点.液流中央的单个细胞通过测量区时,受到激光照射会向立体角...

惠州市14778009816: 用流式细胞仪检测各个象限的意义
沙庄阿胶: 要看你是什么染料标记了 例如临床上,最常用的荧光染料主要有三大种: FITC、PE和PeCy5.肉眼观察,FITC为绿色;PE为橙色; PeCy5为红色.它们都在488纳米被激发.检测波长分别是:FITC是525纳米;PE是575纳米;PeCy5是675纳...

惠州市14778009816: 流式细胞 十字门 空白都是0吗 -
沙庄阿胶: 任何流式的空白对照都不是0.流式检测的都是相对值,就算没有染色的细胞,也因为自身荧光等因素会有一定的荧光强度.在十字门中,空白对照应该是位于左下象限,一般位于左下象限的中间位置,X和Y轴的平均值可以在10的二次方左右.

惠州市14778009816: NK细胞和T细胞的检测方法是什么哈?正常值是多少呢? -
沙庄阿胶: NK细胞和T细胞是通过流式细胞仪检测的,主要是根据NK细胞表面特异性表达CD3-CD16+CD56+,而T细胞表面特异性表达CD3+,这样添加相应抗体标记后再通过流式细胞仪就...

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