怎样合理地进行ANNEXIN V-PI凋亡检测？
有关Annexin -PI凋亡细胞的检测使用的是BIODAI的较多，具体的步骤如下：1) 悬浮细胞：300g，4℃，离心5min，收集细胞。贴壁细胞：用不含EDTA的胰酶消化后，300g，4℃，离心5min，收集细胞。胰酶消化时间不宜过长(见注意事项)，以防引起假阳性。2) 用预冷的PBS洗涤细胞两次，每次均在300g，4°C离心5min，收集1-5×105细胞。注意:在洗涤细胞时，尽量避免损伤细胞。3) 加入100µl 1×Binding Buffer重悬细胞。4) 加入5µl Annexin V-FITC和5µl PI，轻轻混匀。 5) 避光、室温反应10 min。6) 加入400µl 1 x Binding Buffer，混匀，样品在1小时内用流式细胞仪或荧光显微镜检测。
做Annexin V及PI染色不能够固定细胞。因为固定的实验操作实际上会杀死细胞，所以不能够用于关于细胞调亡的检测。
经过固定的细胞，将会对Annexin V和PI同时呈现强染色，给你假阳性结果。
所以你的时间点多也只好辛苦一点了。只有在每个时间点用活细胞染色，并且染色后一个小时内一定要检测记录好实验结果，不然时间拉长，细胞离开培养皿后逐渐调亡，染色会逐渐增强，还是给你假阳性。
为了比较多个时间点，在分批操作上得多费心保持步骤和时间的一致了。为了保险，最好给每个时间点设置一个对照组。
标记了PI后会加大细胞毒性，随着时间延长会导致PI的染色增加。
也称为“固缩坏死”、“程序性细胞死亡”或“细胞自杀”，是由基因介导的一系列变化，细胞依靠它来主动地引起它自身的破坏。正常起消除老化细胞或未参与免疫反应的淋巴细胞的凋亡过程，如发生病理性干扰，可对肿瘤生成起作用。凋亡最初由特征性的形态变化来确定，包括：DNA的程序性降解、染色质浓缩、细胞缩小和碎裂。它可以是生理性的，或由化疗药物及放射诱发（来自希腊文，apoptosis，描写深秋枯叶掉落的现象）。
基于GIS和ANN的群发性滑坡灾害概率预报预警方法
应用ANN技术必须要有数据源。应用GIS对与滑坡形成有关的各种信息进行操作获得的各种结果，可以作为ANN的输入和训练条件，同时ANN的输出又可以作为GIS的资源来管理和进行新的操作。因此在滑坡等突发性地质灾害预警预报系统中联结GIS和ANN，可以使这两种新技术相得益彰，获得更好的应用效果。GIS与ANN两者之间的...
邻域法人工神经网络矿产储量计算
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假如你是mary,你的一位笔友ann最近在减肥
3、合理膳食，搭配营养。很多减肥的朋友都会在减肥的时候选择吃素或者不吃一些脂肪类食物，其实这样的方法并不能有效地减肥。因为素食里如蔬菜、五谷等确实比同等重量的肉食类食物，但素食中亦不乏高热量的食物，比如炸春卷、素什锦等以多油多糖为主的素菜。另外，人体需要营 养平衡，常吃素菜而不吃荤菜...
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泥鳅怎么养?
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居宣雷替： 工作分析会提供你的资料:1. 这个岗位的上下级关系,便于你进行公司的组织架构分析.2. 这个岗位的任职要求,便于你进行招聘合适的人力.3. 这个岗位的工作内容,便于你做绩效考评及培训时进行参考.4. 这个岗位的胜任资格,便于你做试用期评价时进行指标设定与评价.5. 这个岗位与客户的关系,便于你进行员工的360度评价.还有很多,这个要结合你所掌握的实际的工作分析所提供的信息,仅供参考.
