关于稀释菌体(细菌)的问题

作者&投稿:才邦 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
菌液稀释问题??????~

这问题我以前在农科院的时候见得太多了。

多半是稀释的时候不够均匀。比如气温低的时候,细菌就容易粘接在一起,有时平板上就出现一大团密集的菌落,而另一些平板上一个都没长。对于这个,一定要充分震荡摇匀,有条件的使用震荡器。

也有可能是1:1000的平板染菌了,你可以看看这个平板长出的菌落跟别的是不是一样。不过这种可能性不大,因为一般来说1:1000这个稀释度对细菌来说并不是很大,里面还是有很多细菌的,不可能一个都碰不到。如果是从土壤中取样的话,可以稀释到10的-7次方。

稀释涂布平板法得到的稀释菌落中会存在两个或者多个细菌粘合在一起的情况,在读书时往往产生误差,统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,但实际操作中往往会出现菌落粘合在一起的情况。

扩展资料:
涂抹平板计数法操作注意事项:
涂抹平板计数法与混合法基本相同,所不同的是先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,待凝固后编号,然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼脂平板上(每个编号设三个重复)。
再用无菌刮铲将菌液在平板上涂抹均匀,每个稀释度用一个灭菌刮铲,更换稀释度时需将刮铲灼烧灭菌。在由低浓度向高浓度涂抹时,也可以不更换刮铲。将涂抹好的平板平放于桌上20—30min,使菌液渗透入培养基内,然后将平板倒转,保温培养,至长出菌落后即可计数。
参考资料来源:百度百科-涂布平板法

连续培养是跟“分次”培养相对而言的。后者在每次培养之后都要对发酵罐进行灭菌,然后加入新的培养基并进行接种。实际上,“连续培养”也有两种不同的方式:一种是连续加料连续出料,从培养线的一端源源不断地加入新鲜培养基,从另一端连续地将发酵产物放出,这样在培养线内靠近加料口外始终处于对数期初期,而靠近出料口则始终处于稳定期或对数期的末期。另一种是在对数期末期将一部分培养基连同其中的微生物放出(以获得菌体为目的)或转入另一个发酵罐中继续培养(以获得次级代谢产物为目的)。在留有部分旧培养基及微生物的发酵罐中加入新鲜培养基以开始“下一次”发酵。

从发酵罐中放出的料中含有许多种成分,一般都要进行分离才能得到相应的产品。

有害代谢产物肯定属于次级产物。

连续培养在第一次发酵进行灭菌,加料及接种后,以后只需不断加入新鲜培养基就行了。培养基因为不是生物,其灭菌、混合、加工等过程都比较简单,可由自动化的机器来完成。而对培养罐的灭菌、接种等过程则相当复杂,要实现自动化管理的难度要高许多许多。


细菌分离培养的基本要领和常用方法有哪些
菌种分离主要在培养皿上进行,常用的方法是稀释法和划线法。菌种分离的目的是是微生物的一个个体通过繁殖,在固体培养基上长出肉眼能见的群体,然后根据培养特征,用接种针调取所需菌种并在显微镜下检查,证明为单一形状的菌体。改变培养基条件也有助于菌种分离。没有一种培养基或一种培养条件能够满足一...

微生物的种类有哪些?常用检测方法
2.4 液体稀释法:对未知菌样做连续十倍系列稀释,根据估计数,从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5毫升试样,接种1毫升到3组共15只装培养液的试管中,经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查最大或然数表MPN(mostprobablynumber)得出菌样的含菌数,根据样品稀释倍数计算出活菌含量。该...

革兰染色法
2、 涂片:液体培养基:左手持菌液试管,在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌.固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体,涂在载玻片上,使其薄而均匀. 3、 ...

cfu是什么意思啊?
cfu是菌落形成单位,菌落形成单位指单位体积中的细菌、霉菌、酵母等微生物的群落总数。在活菌培养计数时,由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落,称为菌落形成单位,以其表达活菌的数量。

硫酸丁胺卡那霉素简介
其作用机制是作用于细菌体内的核糖体,抑制细菌蛋白质合成,并破坏细菌细胞壁的完整性,致使细菌细胞膜破坏,细胞死亡。硫酸丁胺卡那霉素对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌(吲哚阴性和阳性)、克雷白杆菌、不动杆菌、枸橼酸杆菌以及沙雷杆菌和肠杆菌的部分菌株有较强的抗菌活性;对结核杆菌、非典型性分枝杆菌和金黄色葡萄...

细菌和病毒与人类的关系是什么。科学题答案
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菌类常用灭菌药剂有哪些?
杀菌机理:硫磺粉燃烧后产生SO2,其与水作用生成亚硫酸(H2SO3),亚硫酸附着于菌体细胞,能夺取细胞中的氧,菌体细胞因脱氧而死亡。为此,熏蒸时一定要将培养室喷湿。(七)升汞 重金属盐型杀菌剂。化学名称为氯化汞。分子式:HgCL2。白色结晶性粉末,溶于水。和其他重金属盐类一样,对细菌具毒性,...

微生物学基础,微生物的特征检查噬菌体有哪些方法
按10倍稀释法,吸取0.5mL大肠杆菌(Escherichia coli)噬菌体,注入一支装有4.5mL1%蛋白胨水的试管中,即稀释到10-1,依次稀释到10-6稀释度。5.3 噬菌体与菌液混合 将11支灭菌空试管分别标记10-4、10-5、10-6和对照。分别从10-4、10-5和10-6噬菌体稀释液中吸取0.1mL于上述编号的无菌试管...

...划线分离时为什么每次都要将接种环上多余菌体烧掉?划线时为何不能重...
稀释作用),然后依次类推,划多次,最终分离出单菌落。接种量太少导致的菌体延迟期太长,接种量一般在5%~12%左右,现在这个区间摸索,先做小试,确定接种量再上发酵罐。划线分离的目的是要获得单独生长的菌落,接种环上多余菌体、划线时重叠都可能是菌落长成片,所以应该避免。

大肠菌群平板计数法怎么做?
然后观察其形态,颜色等变化。除此之外,平行设置两个稀释度培养基,步骤是先稀释样本,通过稀释后,微生物可以分散为单个细胞,然后进行一定环境条件下培养,直到其长成菌落为止,然后进行计算大肠杆菌的数量,通过稀释度和样本数量进行计算 平板计数法操作简便,较适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌...

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木垒哈萨克自治县19391173926: 低稀释级别不长菌,细菌培养,高稀释级长菌,什么原因 -
冯娇迪凌: 高稀释级,稀释液相对增多,稀释了抑菌性物质的浓度,抗菌活性减少或去除,反而长菌了

木垒哈萨克自治县19391173926: 常采用 浓度的NaCl来稀释菌液或清洗菌体细胞.因为该浓度与细胞等渗可防止细胞损 -
冯娇迪凌: D. 就是生理盐水.生理盐水的浓度是0.9%.D选项最接近这个数字

木垒哈萨克自治县19391173926: 稀释倒平板法的缺点是什么? -
冯娇迪凌: 菌落有时分布不够均匀是涂布法的缺点,稀释倒平板法菌落分布是均匀的,适用于细菌菌落总数的计数.但是稀释倒平板法操作相对麻烦,不适合好氧和对热敏感的细菌培养.

木垒哈萨克自治县19391173926: 细菌单菌落问题? -
冯娇迪凌: 1.平板划线法:用接种针在固体平板上进行三区或四区划线,培养后可得单克隆2.平板涂布法:做好平板,将菌液做浓度梯度稀释,取每个梯度稀释液少于200微升,涂布于平板上,培养后会在较低浓度得平板上长出单菌落3.混匀平板法,先不做平板,和上面类似,将菌液做浓度梯度稀释,取每个梯度稀释液少许和不热得培养基混匀,然后在倒板,也会在较低浓度得平板上长出单菌落

木垒哈萨克自治县19391173926: 计算土壤中细菌数如图.1g土壤样品中含有的菌体数=某稀释液中的菌落数*10 *稀释倍数*100÷10为什么这么算,等式右边每项都有什么意义 -
冯娇迪凌:[答案] 从最后的稀释液中取0.1mL涂布,形成了若干菌落,则1mL稀释液中有菌个数为:某稀释液中的菌落数*10 ,再乘以稀释倍数即为盛有90mL无菌水的锥形瓶中1mL的菌数,而锥形瓶中的100mL总共含有的菌体数为:某稀释液中的菌落数*10 *稀释倍...

木垒哈萨克自治县19391173926: 为什么细菌在培养皿的数量 没有按浓度稀释而变少 错误 -
冯娇迪凌: A、稀释涂布平板法首先要将菌液进行一系列的梯度稀释,A正确;B、稀释后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,B正确;C、平板涂布后要将培养皿放在适宜的条件下培养让菌体进行繁殖,C正确;D、在不同稀释度的菌液接种后,只有在一定的稀释度的菌液里,聚集在一起的微生物才能分散成单个细胞,从而能够在培养基表面形成单个菌落;如果稀释度过低,将不会形成单个菌落;如果稀释度过高,可能没有菌落生成,D错误.故选:D.

木垒哈萨克自治县19391173926: 3.某细菌悬液经100倍稀释后,在血球计数板上,计得平均每小格含菌数为7.5个,则每毫升原菌悬液的含菌数为(怎么计算?某一时刻把大肠杆菌接入培养... -
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木垒哈萨克自治县19391173926: 一个关于初中生物学的问题 -
冯娇迪凌: 哇!这是初中的题?我们高三才学的. 应该按比例稀释一定程度(也就是梯度浓度),用涂布平板的方法或划线法使菌体分开,并使每一个菌体最终发育为一个菌落,那么,分别培养后,选出最符合实际且菌落数最均匀的培养皿,乘上你稀释的倍数,即可得出结果.

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