大肠菌群平板计数法怎么做?

作者&投稿:学茅 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
大肠菌群国标平板计数法中VRBA培养基配制后超过3小时使用对检测有什么影响?~

摘自美国hardy diagnostics的VRBA使用方法:

For melting bottled media: Autoclave at 121oC. for 1-3 minutes or until melted.
溶解瓶装培养基:121℃高压1-3分钟或至溶解
After autoclaving, do not heat media longer than 3 hours at 45-50oC. Sterile solidified medium can only be remelted once.
高压后,不能在45-50℃加热超过3小时,已灭菌的凝固的培养基只能溶解一次

PS:这货的VRBA都是瓶装或平板成品,不是干粉

可能长时间高温会导致抑制物的降解从而降低选择性吧

结晶紫中性红胆盐琼脂培养基是固体培养基,应该是生长在培养基表面啊。一般降到45到50度可以往平面皿里倒,是不是温度没降下来没凝固好啊

用无菌吸管吸取稀释度样品1 mL,然后将其放入无菌培养皿中,再加入温度于 45℃下的CDLJ JD 显色培养基中10 mL的量,并进行培养皿中溶液均匀混合,可以通过快速转动培养皿的方式,等溶液凝固以后,加入5 mL左右 ,使其均匀覆盖平板表面,凝固后翻转培养基,在37℃培养24h左右。

然后观察其形态,颜色等变化。除此之外,平行设置两个稀释度培养基,步骤是先稀释样本,通过稀释后,微生物可以分散为单个细胞,然后进行一定环境条件下培养,直到其长成菌落为止,然后进行计算大肠杆菌的数量,通过稀释度和样本数量进行计算

平板计数法操作简便,较适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌、酵母菌等的计数。但它只能测定那些可培养的微生物,而且干扰因素很多,且采用的培养基或培养条件有选择性,难以平等地区分所有的微生物。

扩展资料:

发酵法检测大肠杆菌;可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等,要点有:

1、在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养,该培养基含有荧光底物,需要培养 24 h。

2、对荧光底物进行释放,需要采用葡萄糖醛酸进行,让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。

参考资料来源:百度百科—平板计数法

参考资料来源:百度百科—大肠杆菌



1、制备样品稀释液,吸取1mL加入到平板中,倾注55度左右的已灭菌的VRBA琼脂15-20mL,凝固后36度24小时培养,计数紫红色菌落

2、再将合适稀释度的VRBA平板上的紫红色菌落转接10支BGLB,统计阳性率

3、再将计数的VRBA结果X阳性率X稀释度,就是最终结果。




大肠菌群平板计数,选取菌落数为15—150计数,那么如过1:10稀释度的俩个...
还缺少一个关键的数字,就是涂布平板所用的体积。假定你是用了0.1ml,则计算结果为:1:10稀释度:(120+130)\/2*10\/(0.1ml\/1ml)=12500 CFU\/ml 1:100稀释度:(20+22)\/2*100\/(0.1ml\/1ml)=21000 CFU\/ml 应该取其平均值:(12500+21000)\/2=16750 CFU\/ml ...

平板菌落计数测定大肠菌群时,平板菌落计数的选择和细菌菌落总数的测定...
全部按照10版国家标准进行比较。菌落总数平板法:培养基为PCA;培养条件为,36摄氏度48小时;计数有效范围,30—300CFU\/皿;计数方法为,直接计数。大肠菌群平板法:培养基为VRBA;培养条件为,36摄氏度24小时;计数有效范围,15—150CFU\/皿;计数方法为,需“证实实验”再计数。

一般冻品大肠菌用什么平板法还是9管法呢?
平板法。冻品大肠菌执行的标准是SB\/T10379-2012,其中规定检测大肠菌群的方法要采用GB4789.3平板计数法。GB4789.3平板计数法又称平板法,是检测大肠菌群的方法之一。

检验食品中的大肠菌群需要注意的实验步骤有哪些?
- 培养:待培养基凝固后,加覆盖平板表层的结晶紫中性红胆盐琼脂,翻转平板后于36℃±1℃条件下培养18h~24h。4. 平板菌落计数:选取菌落数在15CFU~150CFU之间的平板,计数典型和可疑大肠菌群菌落。5. 证实实验:从琼脂平板上挑取菌落移种于煌绿乳糖胆盐肉汤管中,振摇均匀后置于培养箱中培养24h~48...

gb4789.3-2010版第二法大肠菌群平板计数法中bglb肉汤不产气浑浊是怎么...
现行国标《GB 4789.3-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》中指出——“从 VRBA 平板上挑取 10 个不同类型的典型和可疑菌落,分别移种于 BGLB 肉汤管内, 36 ℃±1 ℃培养 24 h~48 h,观察产气情况。凡 BGLB 肉汤管产气,即可报告为大肠菌群阳性。”若BGLB均不产气,...

大肠菌群、粪大肠、大肠埃希氏菌检验的相关知识
检测流程的精细步骤大肠菌群的MPN法通过确证的阳性管数,结合MPN表进行计数,而VRBA平板计数法则通过计算典型菌落数与稀释倍数来得出样品中的菌群数量。大肠埃希氏菌的MPN计数则利用EMB平板观察菌落形态,通过生化试验如靛基质试验、甲基红反应和V-P试验区分特定种类。鉴别与计数的精确性鉴别大肠埃希氏菌与非...

菌落总数大肠杆菌和致病菌的检测方法
菌落总数用平皿法,单位是个\/ml(每毫升或毫克里面有多少的完整的菌落),方法是:在无菌操作的前提条件下,吸取1ml的原液加入到9cm的平皿里,在倒入3-5ml(37℃)的营养琼脂,在37℃的温箱里培养24小时,取出来计算它的菌落单位总数就行.大肠杆菌用发酵法,单位是MPN\/100ml(每100毫升或毫克的样品里面最大...

关于菌落总数测定
稀释因子d是指第一次进行菌落总数测定时的样品稀释倍数。在菌落总数测定中,为了得到可以计数的合适菌落数量,一般会将样品进行稀释。稀释因子d表示的就是第一次进行稀释时的稀释倍数。通过在不同稀释度的平板上进行菌落计数,并结合稀释因子d,最终可以计算出样品中的菌落数。美正生物菌落总数片比较不错,...

大肠菌群mpn是什么意思?
大肠菌群mpn的测定方式是通过计数营养琼脂平板上大肠杆菌的数量,常用的测量单位是每百毫升肠道内容物中大肠杆菌数量。临床上测量大肠菌群mpn值,可以为医生和患者提供重要的参考信息。通过定期检测该指标的变化,可以了解肠道微生态平衡的情况,及时发现潜在的肠道健康问题,有利于制定有效的治疗方案。除了定...

食品大肠菌群平板计数测定法vrba琼脂为何分两次倾倒
因为大肠菌群是需氧及兼性厌氧的,再加一层琼脂相当于造就一个半厌氧环境,促进兼性厌氧菌的生长,同时抑制其他菌的生长。除此之外,还有防止菌落蔓延的作用。

榆次区19250307474: 大肠菌群平板计数法怎么做 -
漫韩冰黄: 1、制备样品稀释液,吸取1mL加入到平板中,倾注55度左右的已灭菌的VRBA琼脂15-20mL,凝固后36度24小时培养,计数紫红色菌落 2、再将合适稀释度的VRBA平板上的紫红色菌落转接10支BGLB,统计阳性率 3、再将计数的VRBA结果X阳...

榆次区19250307474: 大肠菌群平板计数法,懂得进.大肠菌群平板计数法里,最后证实实验用到的BGLB肉汤管怎么配置?具体方法.先在试管里放肉汤还是先放小导管,小导管用事... -
漫韩冰黄:[答案] 先放肉汤, 不用事先灭菌 要用棉塞 121℃15分钟 接种棒 蘸取到肉汤里涮一涮 注意每次都要灭菌接种棒 最后一个问题要说具体点, 希望你满意!简洁明了!

榆次区19250307474: 大肠菌群平板计数法是什么呢?
漫韩冰黄: 3平板菌落数的选择选取菌落数在15CFU~150CFU之间的平板,分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落

榆次区19250307474: 大肠杆菌菌落总数的检验程序是什么?过程越详细越好
漫韩冰黄: 大肠菌群用平板计数法:称取25g样品溶解于225ml生理盐水中,混匀,溶化的琼脂(采购结晶紫中性红琼脂按照试剂说明操作),凝固后再覆盖一层(3ml左右),菌落

榆次区19250307474: 怎么检验饮料中的大肠杆菌?? -
漫韩冰黄: 样品制备:以无菌操作取25 g样品,放入装有225 mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000 r/min均质1~2min,制成1:10样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替).稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计,用稀释剂将样品匀液制成...

榆次区19250307474: 平板菌落计数测定大肠菌群时,平板菌落计数的选择和细菌菌落总数的测定时的选择有什么区别? -
漫韩冰黄: 全部按照10版国家标准进行比较. 菌落总数平板法:培养基为PCA;培养条件为,36摄氏度48小时;计数有效范围,30—300CFU/皿;计数方法为,直接计数. 大肠菌群平板法:培养基为VRBA;培养条件为,36摄氏度24小时;计数有效范围,15—150CFU/皿;计数方法为,需“证实实验”再计数.

榆次区19250307474: 食品卫生微生物学检验.大肠菌数测定 -
漫韩冰黄: 第一法 大肠菌群MPN 计数法6 操作步骤6.1 样品的稀释6.1.1 固体和半固体样品:称取25 g 样品,放入盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min~10000 r/...

榆次区19250307474: 食品微生物大肠菌群的标注值是多少? -
漫韩冰黄:[答案] GB 4789.3—2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数 第一法 大肠菌群MPN 计数法 检索MPN表(见附录B),报告每g(mL)样品中大肠菌群的MPN值. 第二法 大肠菌群平板计数法 平板菌落数乘以稀释倍数,即为每g(mL)样品中大...

榆次区19250307474: 平板计数法菌落总数的计算公式以及最新的大肠菌群检测MPN表平板计
漫韩冰黄: 尿液标本的平板计数法的单位是个/ml,如果接种10微升,长出100个菌落,最后的结果是100*100.你的这个问题应该是食品或者药品的无菌试验,但是方法应该差不多.至于后边一个问题网上应该会有.

榆次区19250307474: 平板菌落计数法的检验方法 -
漫韩冰黄: 菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数...

本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
© 星空见康网