高效液相色谱时样品的峰面积不在线性范围内怎么办

作者&投稿:袁拜 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
高效液相色谱时样品的峰面积不在线性范围内怎么办~

这个一般不太好啊。
线性实验都是以实验的浓度为基础,然后上下波动的。你的峰面积是大还是小呢?
如果样品浓度比线性范围浓度小了,应该还可以弥补一下,把定量限浓度和峰面积加入线性计算当中。事实上定量限浓度很小,峰面积也很小,相当于线性归零。
如果是大了就不太好说了。

试验之后只是一针的话可以忽略,如果整个实验都是在线性范围外,那么很容易被人质疑方法的准确性。

您的问题不太明确啊,相同进样量下,如果在线性范围内,样品浓度与色谱峰面积成正比

这个线性范围是指的你所配制的标准曲线系列的范围吧。
一般来说按照质控文件都是要求目标化合物的浓度要落在曲线的范围之内的,这主要是说明你的结果是比较准确的(避免别人挑刺)。如果不在范围之内的话,要不重新做标准曲线,要不改变你的取样量,反正所有的目的就是要让你测出来的值(制备液的浓度)落在你的标准曲线的范围之内就行。
其实即使超出了你所配制的的标准的范围,只要不是相差很远的话结果基本上还是比较准确的,因为你所做的标准曲线是不可能覆盖方法的线性范围的,但是为了满足相关文件的要求,最好还是把它做到曲线范围之内吧,这样可以给自己省却很多麻烦。

如果峰面积高于线性的上限,可以稀释样品,再测定;如果低于线性范围的下限,只能重新测定标准曲线。

重新做标准曲线,最好样品峰面积在标准曲线中间附近

平衡时间不够吧,再进几针,前面的不要


用高效液相色谱法做标准曲线,应如何配制样品?
高效液相色谱法的特点包括:1. 高压:由于流动相为液体,在色谱柱中流动时会受到较大阻力,因此需要施加高压以确保快速通过色谱柱。2. 高速:分析速度快,载液流速也快,一个样品的分析通常在15至30分钟内完成,有些情况下甚至更快。3. 高效:具有高分离效能,可以通过选择合适的固定相和流动相来实现...

高效液相色谱法色谱参考条件可以不包括哪个因素
流动相,固定相,温度,流速,检测波长,进样量。1、流动相:包括流动相的种类、组成、比例和pH值等。2、固定相:包括固定相的种类、颗粒大小和柱长等。3、温度:柱温、检测器温度和样品进样温度等。4、流速:流动相的流速和样品进样速度等。5、检测波长:用于检测样品的特定波长。6、进样量:样品...

高效液相色谱仪进样时应注意什么?
准确定量,进样阀切换要快,进样完毕用超纯水清洗进样阀;3.自动进样:保证样品溶液足够的深度(以免针尖不能埋到液面下);保证样品溶液没有气泡,特别是用插管的情况;瓶盖松紧得度,太松样品溶剂挥发,太紧瓶垫变形可能脱落;不同太旧的瓶垫,以免导致针扎时碎屑堵塞针孔。大概就这些。

高效液相色谱分析的基本原理
在两相中做相对运动时,经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。高效液相色谱仪(HPLC)广泛应用于生命科学、食品科学、药物研究以及环境研究中。

高效液相色谱法中的样品和流动相在使用前需要注意什么?
高效液相色谱仪的流动相选择时应注意: 1、尽量使用高纯度试剂作流动相,防止微量杂质长期积累而损坏色谱柱和使检测器噪声增加。 2、避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子,如使固定液溶解流失、酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。 3、样品在流动相中应有适宜的溶解度,防止产生沉淀沉积在柱中。 ...

高效液相色谱中的持留时间是什么意思?
1. 在高效液相色谱(HPLC)分析中,保留时间(Retention Time,Rt)是指样品组分从注入色谱柱开始,到完全通过色谱柱并离开柱端的时长。这一参数对于识别和定量分析样品中的各个组分至关重要。2. 保留时间的变化取决于物质在固定相(通常为色谱柱中的填充物)和流动相(用于携带样品通过色谱柱的溶剂)...

为什么做高效液相色谱图时,同一个样品,前后做出来的图谱很大程度上不一...
1、可能是你一开始的时候进样量不准确,使得再次进样时存在进样量的差别。2、仪器的差异,不要以为仪器就是准确的,会随着时间变化而变化,所以每用高效液相色谱仪要进行校正。3、如果样品是纯物质的话,就是你操作不正确;不如样品基质复杂或是样品不纯,建议用内标法,可以消除基质、仪器的影响。

高效液相色谱进样问题
不会,样品从定量环进样时不是直接进入色谱柱,而是由流动相冲洗进入,六通阀即使空扳 也不会使空气直接进入色谱柱,因此转换相系时一般会空扳几次六通阀来清洗进样管路。满意请采纳~

如何分析高效液相色谱图
高效液相色谱法,你可以简单地想象,固定相是一个多空海绵状的柱形结构,样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同,所以才会在色谱图中拉开距离。和实验相关的参数:1、保留时间-也就是可以定性的数据参数 如果使用同样的色谱柱,同样的流动相,分析同样的样品,那么这个样品的保留时间,应该是...

高效液相色谱法对流动相有什么要求?
2、配置酸或碱性流动相时要考虑pH范围 有些酸并不适宜作为流动相,如盐酸、长期使用可能损坏泵及相关的钢制管线。注意选择合适的截止波长的溶剂作为流动相。紫外分析时,样品的检测波长至少应大于所用溶剂的截止波长20nm。3、配置的盐溶液用滤膜过滤 常规液相用0.45µm滤膜过滤,高效液相色谱使用...

张掖市15252695257: 高效液相色谱仪图谱的峰面积异常变化 -
兆治瑞秦: 五针峰面积不平行可能与进样有关.如是手动进样,确定样品体积是否大于定量环的5倍?如是自动进样,看看进样泵里有无气泡,及样品溶液是否过滤好.流动相中小气泡对峰面积没大影响,只会造成小尖峰,滤头堵会造成压力上升,无实质影响.

张掖市15252695257: 高效液相色谱仪做有关物质的检验时自身对照为何峰面积不成比例? -
兆治瑞秦: HPLC自身对照法做有关物质是最常用的方法,峰面积不成比例是指你的自身对照主峰与供试品主峰间的比例吗? 这种情况也很多见,主要看供试品浓度的设计是否超载,如果浓度过大,造成超载则跟自身对照不成线性,但是这并不影响你的定量计算,因为自身对照法的优点就是缩小了对照与杂质见的线性范围,也就是说自身对照的浓度及更低浓度物质间的线性范围.如果你要使呈线性,最简单的方法是减小供试品浓度

张掖市15252695257: 高效液相色谱法为什么会出现样品与对照品的峰面积相差很大?做的是阿司匹林含量测定. -
兆治瑞秦: 有可能是浓度不一样,如果峰形相同的话,则证明是同一个成分,相差大不要紧,可以用校正因子来进行计算. 外表一点法简单,即采用原点强制斜率,但是不够准确,建议用外标两点法,斜率准确,计算值准确 如果要求峰面积相同,可可配置同对照品主成分浓度相同的溶液,就可以获得,

张掖市15252695257: 液相色谱的峰面积与进样量的关系成正比吗? -
兆治瑞秦: 应该说液相色谱的峰面积在一定浓度范围内与进样量的关系成正比,就是我们说的样品的线形范围.超出范围以外的是不成正比的.

张掖市15252695257: 高校液相实验,连续多次进同一个样品,为什么出峰个数会不同,个别峰面积相差较大,请教怎么解决?样品是稳定的,主要峰面积相同,但是其他峰时有... -
兆治瑞秦:[答案] 峰的面积表示样品的量的多少,你一个样品里的不同成分迁移的速度不一样,迁移慢的你后面再加,累积起来有的峰的面积到后来会越来越大

张掖市15252695257: 高效液相色谱仪分析法中不出样品峰咋么办 -
兆治瑞秦: 1,流动配比,有机溶剂比例太低,倒是无法洗脱.洗脱剂太强,与溶剂峰重叠. 2,检测限,出峰面积的最小值设置过大,而样品中所含有的有效物质过少,达不到最小出峰面积的要 求,故无法出峰,解决办法:将出峰面积的最小值调低. 3,检测器,对于检测器没影响的物质在图上也看不出来峰. 4,样品是否能够通过色谱柱 柱子填充物与溶剂都是合适的么. 5,设定的波长是否正确.时间是否充分. 6,柱子是否起到分离效果.

张掖市15252695257: 做高效液相色谱时用峰面积和用峰高那个计算含量高?为什么? -
兆治瑞秦: 柱效不同,峰高相差较大,不同极性的物质,峰型差的也会很多,但这些不同往往对峰面积为的影响不大,对峰高影响很大,所以用峰面积比用峰高好

张掖市15252695257: 我用高效液相色谱测的峰面积测出来怎么比别人测得低?同一个浓度的样品,求经验 -
兆治瑞秦: 首先要保证你和对方是同一条件,再有不同工作站所对应的峰面积大小相差很多,比如安捷伦的工作站比岛津的工作站测的峰面积要小. 而且你没有必要和别人比较,自己做个线性,线性关系良好,样品和流动相没有问题,那就没有问题了.

张掖市15252695257: 你好,请问高效液相色谱测出结果样品与对照品峰面积相差巨大是什么原因? -
兆治瑞秦: 回答这个问题,需要你提供一些实验细节,比如色谱柱、流动相、样品前处理方式的 ,造成误差的原因较多,建议你上“色谱世界”网站看看,这个网站在色谱方面非常专业,高手也较多,应该会对你有较大帮助的.

张掖市15252695257: 高效液相色谱图中峰高、峰面积、峰面积比都是代表什么呢?谢谢! -
兆治瑞秦: 峰高指待测组分从柱后洗脱出最大浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确 峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAU*min, AU*min或mV*min,代表相对含量比较准确 峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为% 不知回答得满不满意

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