制备单克隆抗体需要进行几次筛选，目的分别是什么？
第一次筛选：
（1）筛选对象：脾细胞、瘤细胞、脾-脾细胞、瘤-瘤细胞、脾-瘤细胞（即羊红细胞免疫过的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后得到的细胞混合液）。另有少量多细胞聚体，因寿命短而迅速死亡，故无需特殊筛选。
（2）筛选方法：用HAT选择培养基筛选出正常生长的细胞。（注重：HAT培养基含有次黄嘌呤H、氨基喋呤A和胸腺嘧啶核苷T。其中氨基喋呤能阻断核酸合成的主通路，而次黄嘌呤在磷酸核糖转移酶HGPRT的催化下能合成RNA或胸腺嘧啶核苷在胸腺嘧啶核苷激酶TK的催化下合成DNA均属于核酸合成的旁通路。）
（3）筛选结果：脾-瘤细胞正常生长，其它细胞都会死亡。（析因：脾细胞和脾-脾细胞的核酸合成主通路被氨基喋呤阻断，虽有核酸合成的旁通路，但不能长期增殖；瘤细胞和瘤-瘤细胞缺乏核酸合成旁通路的酶，核酸合成主通路又被氨基喋呤阻断，因核酸合成障碍而死亡；脾-瘤细胞具有脾细胞的核酸合成旁通路酶，虽核酸合成主通路被氨基喋呤阻断，但可利用培养基中的次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核酸而得以生存。）
第二次筛选：
（1）筛选对象：多克隆杂交瘤细胞群体。（即产生多种抗体的脾-瘤细胞混合群体。）
（2）筛选方法：抗体检测（ 如 免疫荧光技术、放射免疫技术等，实际上是利用稀释法，在聚乙烯微板孔内逐个杂交瘤细胞分开培养，然后检查每孔中产生特定抗体的能力）。
（3）筛选结果：产生专一性抗体的杂交瘤细胞。
两次。
第一次是筛选出杂交瘤细胞，第二次是筛选出能产生特异抗体的杂交瘤细胞。
两次。第一次是筛选出浆细胞—浆细胞融合细胞 和 浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞（抗原抗体反应）
第二次是筛选出浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞（继续培养）
制备单克隆抗体需要进行几次筛选,目的分别是什么?
两次.第一次是筛选出浆细胞—浆细胞融合细胞 和 浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞（抗原抗体反应）第二次是筛选出浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞（继续培养）
制备单克隆抗体时需要使用?A家兔B细胞培养C小鼠D显微注射
现在则利用基因重组技术来生产了。即把能产抗体基因找到后，插入到宿主细胞，不过不管用什么办法都要用细胞培养。
单克隆抗体制备过程
单克隆抗体的制备过程分为几个关键步骤:首先，进行免疫动物。选择6-8周龄雌性Balb\/c小鼠，通过免疫注射，使用目的抗原刺激其产生致敏B淋巴细胞。抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，激活并增殖B淋巴细胞，形成致敏细胞。接着，进行细胞融合。小鼠经眼球摘除放血法处理后，无菌取出脾脏，与同系骨髓...
单克隆抗体的制备步骤
4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 采用灵敏、快速、特异的免疫学方法，筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆扩增；5、单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备一般采用动物体内诱生法和体外培养法。
利用小鼠制备单克隆抗体时,不需要进行的是( )A.从免疫小鼠的脾脏获得...
A、制备单克隆抗体时，需要给小鼠注射特定抗原，再从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，故A正确；B、采用一定的技术将B细胞与骨髓瘤细胞融合获得杂交瘤细胞，故B错误；C、诱导细胞融合后，除了产生杂交瘤细胞，还会产生B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，因此需要用选择培养基筛选出...
单克隆抗体的制备步骤
选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选择性培养基。4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化：在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。5、单克隆抗体的大量制备：单克隆抗体的大量...
单克隆抗体的制备过程
单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法 取BALB\/c小鼠，首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水，即可获得大量单克隆抗体...
单克隆抗体
那么，单克隆抗体制备过程是怎样的？下面咱们就来详细看看吧。制备过程1. 免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB\/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、...
制备单克隆抗体的过程
（一）脾细胞 1．材料 (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb\/c鼠。 (2)1640培养液 单克隆抗体制备流程 (3)2.5％FCS－1640营养液 2．操作方法 (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。 (2)将小鼠放于70％酒精中浸泡消毒，取出固定于板上，在无菌条件下取脾。 (3)把脾放入5ml含有2...
单克隆抗体的制备步骤
具体应用的方法应根据抗原的性质，以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫荧光法等。其中ELISA法最简便，RIA法最准确。阳性克隆的筛选应进行多次，均阳性时才确定为阳性克隆进行扩增。5）克隆化 克隆化的目的是为了获得单一细胞系的群体。克隆化应尽早进行并反复筛选。这是...
饶码心得：[选项] A. 1次 B. 2次 C. 3次 D. 4次
虹口区19353215742： 制备单克隆抗体需要进行几次筛选,目的分别是什么? - ？
饶码心得：[答案] 两次.第一次是筛选出浆细胞—浆细胞融合细胞 和 浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞(抗原抗体反应) 第二次是筛选出浆细胞—骨髓瘤细胞融合细胞(继续培养)
虹口区19353215742： 单克隆抗体需哪2次筛选? - ？
饶码心得：[答案] 第一次筛选是在两细胞融合后 目的是选出符合要求的杂交瘤细胞 而第二次筛选则是在杂交瘤细胞培养后 此次筛选则是为了选出能产生符合要求的单一抗体的杂交瘤细胞 就是这样 这些内容在高三生物课本第七十二页有详细叙述
虹口区19353215742： 细胞工程中,制备单克隆抗体时,需要经过三次筛选检测,这三次的目的是什么? - ？
饶码心得：[答案] 记得只经过两次筛选 第一次是筛选杂交瘤细胞 第二次是筛选能够产生单一抗体的杂交瘤细胞 当筛选完毕就可以进行体内或体外培养了
虹口区19353215742： 单克隆抗体需哪2次筛选? - ？
饶码心得： 第一次筛选是在两细胞融合后 目的是选出符合要求的杂交瘤细胞 而第二次筛选则是在杂交瘤细胞培养后 此次筛选则是为了选出能产生符合要求的单一抗体的杂交瘤细胞 就是这样 这些内容在高三生物课本第七十二页有详细叙述
虹口区19353215742： 生产单克隆抗体通常涉及三个筛选过程: ①选出杂交瘤细胞 ②选出能产生特定抗体的B淋巴细胞 ③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群 这三个过程的... - ？
饶码心得：[选项] A. ②③① B. ③①② C. ②①③ D. ①③②
虹口区19353215742： 制备单克隆抗体过程,是需要两次筛选还是三次筛选?为什么? - ？
饶码心得： 两次. 第一次是筛选出杂交瘤细胞,第二次是筛选出能产生特异抗体的杂交瘤细胞.
虹口区19353215742： 单克隆抗体制备过程中两次筛选有什么区别?___. - ？
饶码心得：[答案] 单克隆抗体制备过程中共有2次筛选,一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞.这两次筛选的原理和方法不同:第一次筛选的原理是细胞中DNA合成有2种途径,方法是用选择培养基进行筛选;第二...
虹口区19353215742： 如何筛选动物单克隆抗体 - ？
饶码心得： 单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的.第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键.普...
