免疫组化测得平均光密度值都是多大

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免疫组化结果用平均光密度表示吗~

有阳性细胞区域直接测试方法。

免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。
这些常用免疫组织化学方法的原理如下:
免疫荧光细胞化学技术
将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量.
2. 免疫酶细胞化学技术
是目前免疫组织化学研究中最常用的技术.基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究.
3. 免疫胶体金技术
就是用胶体金标记一抗,二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性,定位或定量研究.由于胶体金的电子密度高,多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究.

1、打开Image-Pro Plus 6.0软件,点击右下方的Done。点击file,点击open,打开你要选择组化图片,点击打开,得到如图所示。

2、点击file那一排的measure,选择calibration右侧下方的intensity。点击OD旁边的new,点击std. optical density,点击options,

3、点击255旁边的image,弹出如图所示对话框,点击图中空白地方,点击ok键。将incidental level改成255。

4、继续点击ok,点红色x,关闭。点击measure→count/size。

5、点击selecte colors,点击最左边像笔的图标,选免疫组化图片阳性蛋白表达区域,选择完毕,点击close。

6、点击表格中的view,选择statistic。得到mean那一栏和iod交叉的数值,就是mean of iod。

免疫组化阳性率一般是依据阳性百分比和阳性强度两个方面,而积分光密度正好是单位面积光密度的和,因此可以表示免疫组化的阳性率,也就是成正比。前提是两张图片面积相同,阳性的部位都正确,都是你要观察的细胞,而不是背景细胞(比如炎症细胞阳性)


免疫荧光平均光密度值意义
反映特定蛋白质在细胞内的分布和含量情况。平均光密度是针对一组细胞而言的,表示这组细胞的荧光强度的平均水平。免疫荧光平均光密度值越大,说明该蛋白质在细胞内的分布越广泛,含量也越多。

聊一聊 Image-Pro Plus 测量平均光密度。
平均光密度是IPP测量中的一个重要概念,它代表了视野内所有选定对象的平均反应强度。这使得平均光密度成为量化免疫组化(IHC)阳性表达强度的有效工具。然而,值得注意的是,只有在经过阳性表达的面积加权后,平均光密度才有实际意义。在使用IPP测量平均光密度时,面积在计算过程中发挥着关键作用。在进行操作...

求助免疫组化中关于平均光密度和积分光密度的选择问题
您好 光密度值表示扫描仪所能记录原稿的影调范围,光密度值越高表示扫描仪的光电元件功能越强大。EPSON扫描仪V750的光密度值可以达到真正的4.0在业界是很高的水平。

如何用imagej分析免疫组化平均光密度值
1、打开Image-Pro Plus 6.0软件,点击右下方的Done。点击file,点击open,打开你要选择组化图片,点击打开,得到如图所示。2、点击file那一排的measure,选择calibration右侧下方的intensity。点击OD旁边的new,点击std. optical density,点击options,3、点击255旁边的image,弹出如图所示对话框,点击图中空...

医学图像分析中的光密度参数
研究显示,光线穿过均匀密度的物质时,被吸收的光线量与物质的含量成正比,与照射光的强度无关。其中,分子代表被测对象的平均灰度值(透射光强度),分母代表空白区域的平均灰度值(入射光强度)。N代表点的总数。定义:光密度是指测量标本结构范围内所有像素点的光密度总和。在此定义中,A代表被测面积...

免疫组化测得平均光密度值都是多大
免疫组化阳性率一般是依据阳性百分比和阳性强度两个方面,而积分光密度正好是单位面积光密度的和,因此可以表示免疫组化的阳性率,也就是成正比。前提是两张图片面积相同,阳性的部位都正确,都是你要观察的细胞,而不是背景细胞(比如炎症细胞阳性)

技能爆发!快速用Image J定量分析免疫组化图!
6. 进行测量,通过【Analyze】-【Measure】获取面积、面积比以及累积光密度值(IOD),IOD\/面积即为平均光密度值(AOD)。掌握这些步骤后,你就可以轻松地对免疫组化图进行定量分析,比较蛋白表达的差异了。如果你在寻找更多科研资源,如国自然立项清单、文献管理工具、科研绘图软件等,可以参考推荐的内容...

如何定量分析免疫组化和western blot 的结果,求具体步骤
一、免疫组化定量分析:1.图片获取:使用显微镜拍摄处理后的组织切片,并确保所有图片的拍摄条件(如曝光时间、光源亮度等)相同。2.图片分析:使用图像分析软件(如ImageJ)打开图像。3.设置阈值:根据背景和染色的强度设置一个阈值,使染色区域可以被区分。4.测量:测量阈值以上的区域的面积和强度,得到每个区域的平均强度值。

现在做免疫组化和原位杂交有必要做平均光密度值分析吗,是不是辅助其他...
你好,hpv感染不能说明癌前病变的,注意是排除肿瘤的这个不是特别高,可以观察看看。

如何用image pro plus 分析免疫组化结果
如果需要测量的就是那两块深色,测量结果就是 平均光密度= iod sum \/ area sum.如果要考虑图片上所有区域,那只需要测量 iod sum就行了。实际上这里也需要除以一个面积的,这是整张图片的面积,所有的图片全部面积都相等,除不除不影响结果。http:\/\/www.dxy.cn\/bbs\/topic\/19871307 ...

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亓俭宝益: (1)首先要确定免疫组化技术是否合格,合格的染色结果应该是背景颜色浅淡或无着色,而阳性标志物清晰和定位明确.(2)不仅要判断所检组织中有或无阳性标记物,还要注意阳性信号的分布部位和形态特征.一般说来,阳性信号应与被测抗原...

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亓俭宝益: 免疫组化是目前临床上常用的病理学检测方法,多用于鉴别形态很相似的疾病或肿瘤,确定组织来源及研究肿瘤组织代谢改变,它包括细胞内酶学的变化、糖原的变化、核酸的变化. 您的免疫组化检查结果可能是为了检测是否患有恶性淋巴瘤,淋巴细胞反应性增生可能是最后的诊断结果,即在某种因素的刺激下诱发了淋巴细胞的增生;也可能是淋巴瘤引发的.前者是一个良性的过程,而后者则是恶性疾病.所以,针对您的具体情况应作具体分析.也可以密切观察病情变化.

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亓俭宝益: 1 如果是定位和定性,你可以选择细胞扒片后做免疫组织化学或者免疫荧光,相对便宜.而且组化也可以半定量. 2 如果要做定量当然是ELISA好了,基于KIT里的标准品能给出确切的含量. 3 WESTERN BLOT 也是比较敏感的,半定量也是不错的.虽然是分泌蛋白,但细胞浆内也是有的,毕竟蛋白的变化首先就是出现在细胞浆也(合成场所).没问题可以做的. 4当然以上都是蛋白水平的检测,你也可以从MRNA和DNA水平检测呀.比如RT-PCR,NORTHERN BLOT, SOUTHERN BLOT, REAL TIME PCR等.

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