实时荧光PCR技术内容简介

作者&投稿:程梅 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
~ 本书全面深入地讲解了实时荧光PCR技术的基础理论和实际应用,共分为25个章节。首先,它详细阐述了实时荧光PCR技术的基本原理和操作方法,包括其核心原理和实际操作步骤。接着,章节转向实验室设计与质量管理,强调了标本采集、运送、保存以及核酸提取的标准化流程,这些都是确保检测准确性的关键环节。

后续章节着重于PCR测定数据的处理,介绍了如何解析和分析实验数据,以得出准确的结果。此外,书本还专门讲解了PCR检验所需的仪器设备及其维护,以及如何进行检验质量的控制和保证。

针对病毒检测,书中有专门的章节介绍标准物质的使用,以及如何进行诸如肝炎病毒、人免疫缺陷病毒、人乳头瘤病毒、巨细胞病毒、冠状病毒、EB病毒、流感病毒、沙眼衣原体、结核杆菌、淋病奈瑟菌、幽门螺杆菌、肺炎支原体、刚地弓形虫和解脲支原体等的实时荧光PCR检测,包括样本采集、处理,以及引物和探针设计的策略,强调了这些技术在临床实践中的重要性。

总的来说,本书内容丰富、新颖,具有极高的实用性和指导价值,是临床疫病研究、诊断工作的必备参考书籍。无论是临床检验专业人员、临床医师,还是医学院校的学生,都能从中获益匪浅。它还适合作为推广和培训实时荧光PCR技术的教材,帮助相关人员提升技能和理解。


概述荧光定量PCR技术的原理。
又称实时PCR技术。该技术在常规PCR基础上,添加了一条标有两个荧光基团的荧光双标记探针,一个标记在探针的5′端称为报告基团(Reporter,R);另一个标记在探针的3′端称为荧光抑制基团或称淬灭基团(Quencher,Q)。两者可构成能量传递结构,即5′端R发出的荧光信号可被3′端R...

实验技巧 | 实时荧光定量PCR实验数据分析(超全教程)
实时荧光定量PCR(qPCR)是一种精确测定DNA扩增过程中目标序列含量的实验技术,其数据处理与理解是关键。这个技术利用荧光标记的PCR产物在每次循环后的积累来实时监测,从而得出Ct值,进而推断模板基因的浓度。基本原理上,PCR反应过程被划分为四个阶段:基线期、指数增长期、线性增长期和平台期。Ct值,即...

PCR 实战宝典 No.5:实时荧光PCR
技术进步与市场领导者 实时荧光PCR技术由Higuchi在1992年开创,如今荧光PCR仪市场由ABI、罗氏(Roche)和伯乐(Bio-rad)等国际巨头主导。选择仪器时,除了考虑通用性、检测通量和成本,还应关注仪器的兼容性、通道数量、易用性等因素。例如,ABI公司的7700和7500系列以其高灵敏度闻名,但价格不菲;7500 Plus...

实时荧光定量 PCR
实时荧光定量 PCR ,简称 RT-QPCR, 属于 Q-PCR 的一种,目前该技术已得到广泛应用,如:扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、 SNP 分析等。荧光定量 PCR 常用的方法是 DNA 结合染料 SYBR GreenⅠ的非特异性方法。 SYBR Green I 是一种结合于所有 dsDNA 双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的荧光染料, 可与所...

荧光pcr法是什么?
荧光pcr法是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。也叫实时荧光定量PCR技术。荧光-PCR法技术原理:将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA...

实时荧光pcr和流式荧光区别
检测方式和数据分析。1、检测方式。实时荧光pcr通过引入荧光探针或染料来标记pcr产物,利用荧光信号的增加来实时监测扩增过程。流式荧光则是通过在细胞中引入荧光染料或标记抗体,通过流式细胞仪检测细胞中的荧光信号。2、数据分析。实时荧光pcr通常会生成一个荧光曲线,通过计算阈值周期数来确定模板的起始数量...

干货分享 | 快速了解什么是实时荧光定量PCR
快速了解实时荧光定量PCR:高效实验工具解析 自上世纪80年代PCR技术诞生以来,它在生命科学领域中扮演着重要角色。然而,传统PCR的定性和半定量限制了其应用。为解决这一问题,实时荧光定量PCR(qPCR)应运而生,成为现代核酸检测和定量分析的黄金标准。qPCR的核心原理是通过荧光标记技术,如SYBR Green I染料...

什么是实时荧光定量PCR,检测指标是什么?
实时荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。检测指标是...

实时荧光定量PCR仪中所谓的HRM技术是什么意思呢RT
HRM介绍 HRM技术是high-resolution melting analysis即高分辨熔解曲线分析技术,是近年国外兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。基于高效稳健的PCR技术,HRM不受突变碱基位点与类型局限,无需序列特异性探针,在PCR结束后直接运行高分辨熔解,即可完成对样品突变、单核苷酸多态性-SNP、甲基化、...

实时荧光pcr已运行的室温要求
荧光pcr已运行的室温要求。实时荧光定量PCR技术具有特异性强,有效解决了PCR污染问题、自动化程度高等特点,做到PCR每循环一次就收集一个数据,建立实时扩增曲线,准确地确定Ct值,从而根据Ct值确定起始DNA拷贝数,做到了真正意义上的DNA定量。技术流程。一、RNA的提取。二、DNaseI消化样品RNA中的DNA。三、...

滨海县15939577333: 实时荧光定量PCR技术原理是什么? -
标毅普爱:[答案] 聚合酶链式反应 ( PCR) 可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增 .在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过 放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析 .无论定性还是定量分析,分析的...

滨海县15939577333: 请问什么是实时荧光定量?
标毅普爱: 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光标记物,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法.荧光定量PCR不仅实现真正实现了绝,对定量,而且具有灵敏度和特异性、高能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点.

滨海县15939577333: 什么是实时荧光定量PCR?有什么应用领域?与传统PCR有什么区别? -
标毅普爱: .荧光共振能量传递 (FRET) 某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光,当另一屏蔽基团与其距离合适时,原发射光将会被屏蔽基团所吸收,并转化为其他波长的发射光或热能,称之为FRET.2.荧光化学:荧光定量PCR所使用的荧...

滨海县15939577333: 实时定量PCR基本原理如何? -
标毅普爱: 实时PCR(real—time polymerase chain reaction)又称荧光定量PCR或TaqMan PCR,是美国PE公司(Perkin Elmer)于1995年研制出的一种新的核酸定量技术.该技术在常规PCR基础上运用荧光能量传递(fluorescence resonance energy ...

滨海县15939577333: 什么是实时荧光定量PCR?有什么作用?请用自己的话详细说明. -
标毅普爱: 荧光定量PCR是将荧光素结合到PCR的反应物上,然后随着反应的进行检测荧光的强度可以实时的检测产物的量.

滨海县15939577333: real - time RT - PCR是什么意思 -
标毅普爱: real-time RT-PCR 实时荧光定量RT-PCR 双语对照词典结果: 网络释义 1. 荧光定量RT-PCR 2. 实时定量RT-PCR 3. 荧光RT-PCR

滨海县15939577333: 荧光定量PCR的 简单解释 -
标毅普爱: 荧光定量PCR是( realtime fluores-cence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度.

滨海县15939577333: 实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么?结果有何异同?能说明的问题是什么? -
标毅普爱:[答案] 原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光. 反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段....

滨海县15939577333: 什么是EST - PCR -
标毅普爱: pcr:聚合酶链式反应(=polymerase chain reaction)聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),简称PCR,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段.可看作生物体外的特殊DNA复制. EST (Expressed Sequence Tag)表达序...

滨海县15939577333: 实时荧光定量PCR技术检测HCV - RNA有什么特点?
标毅普爱: HCV-RNA实时荧光定量PCR技术除了常规PCR的一对引物外,增加了一个特异性探针.该探针的两端分别标记两个波长不同的荧光素,即一个发光集团和一个荧光猝灭集团,分别称为A荧光素和B荧光素.在无特异性DNA存在时,探针上标记的两个光素间距离太近,A荧光素所发射的荧光被B荧光素发射的荧光掩盖,因此在监测器上只能测定出B荧光素所发射的荧光.当特异性DNA存在时,伴随DNA扩增,荧光标记探针将被DNA多聚酶水解,A荧光素随之游离出来,发射的荧光随之增强.动态监测待测标本荧光强度的变化与标准曲线比较,可对HCV-RNA进行较准确的定量分析.

本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
© 星空见康网