什么是实时荧光定量PCR，检测指标是什么？
实时荧光定量pcr内参是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。
扩展资料：
PCR原理：
1、PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
2、PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
③引物的延伸：DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
参考资料来源：百度百科—实时荧光定量PCR
检测指标是：各样品的目的基因和管家基因分别进行Realtime PCR反应。PCR产物与 DNA Ladder在2%琼脂糖凝胶电泳，GoldView染色，检测PCR产物是否为单一特异性扩增条带。
原理：
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
实时检测PCR扩增，在扩增的指数期对起始模板进行定量，在扩增过程中，荧光信号随着PCR产物的增加而增强。我们实验室使用的BIOGHSC Super Probe Kit PCR实验检测DNA,测得的循环数在28左右，整个PCR过程有4个阶段，基线期---指数增长期---线性增长期---平台期，指数增长期内，PCR有高度重复性，一般的检测指标是看线性图谱的扩增曲线的起跳值（CT值）。
所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。参考资料：http://baike.baidu.com/view/1020950.htm
你要检测什么东西啊？
实时荧光定量PCR是检测模板DNA的拷贝数、基因表达量、基因突变等的
xpert检测是什么pcr方法
结果临床收集到141例未成形粪便标本,GeneXpert实时荧光定量PCR检出艰难梭菌毒素基因tcdB阳性42例，其中常规厌氧菌培养阳性34例，两者一致性较好(Kappa=0.775 0,P0.01)。GeneXpert实时荧光定量PCR的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为87.2%、92.2%、81.0%和94.9%。结论 GeneXpert实时荧光...
请问什么叫QPCR
答：QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统，也叫实时定量基因扩增荧光检测系统，简称QPCR。问：QPCR、DNA检测、PCR之间的关系？答：聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction简称PCR）原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获93年诺贝尔化学奖。因其在病原...
一个目的基因在质粒上,如何将其扩增出来并做实时荧光定量PCR?
是这样的，PCR的原理就不阐述了，实时荧光定量PCR的基本原理是，在PCR体系中，加入引物的同时，加入能与目的基因结合的带荧光标记的寡核苷酸，一条完整的寡核苷酸上有荧光淬灭基团，它能吸收荧光信号。 DNA聚合酶要选择具有3'到5'外切酶活性的酶，这样在PCR扩增过程中，从引物方向过来的DNA聚合酶会把...
荧光定量pcr仪有哪些品牌?
进口的有：ABI的，BIO-RAD的iQ5\\x0d\\x0aAppliedBiosystems公司的7700型实时荧光定量PCR仪是全球公认的荧光定量PCR的金标准\\x0d\\x0aBIONEER：国内的用户可能听说过这个品牌的不多，只有早期较多使用进口引物的实验室和研究所或留美学者知道这个品牌。Bioneer最初是以高通量的引物合成起家，引物合成在国...
实时荧光定量PCR仪,罗氏和ABI哪个更好些?
肯定是ABI的更好，因为ABI是龙头老大，大多数的国产试剂盒都是在它的平台上来做的，只要不是用原厂试剂盒，肯定国产的试剂盒更便宜，这方面ABI很占优势，ABI仪器相对较贵，但确实是质量最好的
怎么用荧光定量pcr鉴定转基因纯合子
实荧光定量PCR即 Real time PCR(称实定量PCR) 定量PCR已经基于凝胶低通量析发展高通量荧光析技术即实定量PCR实荧光定量PCR技术于1996由美Applied Biosystems公司推由于该技术仅实现PCR定性定量飞跃且与规PCR相比具特异性更强、效解决PCR污染问题、自化程度高等特点实定量PCR (real-time quantitative...
实时定量PCR的结果是怎样分析的?
的 探讨实时荧光定量PCR不同结果分析模式对检测结果的影响。方法 用Line—Gene FQD-33A型荧光定量PCR检测系统检测本院门诊和病房乙肝病人血清HBV DNA77份，分别用最大二阶导数法和样点拟合法进行结果分析。结果 发现两种分析方法的总体相关性较好(r=0．978)。但HBV DNA拷贝数含量<10^5时，两种模式的...
实时荧光定量pcr数据如何统计?
以此类推。其实你只有3组，2个基因。用ANOVA先算，然后再用t test就可以了。结果表达为TNF：对照组1， 模型组想x± d, 药物组y± d. NF-kB: 对照组1， 模型组想x± d, 药物组y± d. TNF和NF-kB间不需要比较。请参考我发表的文章：http:\/\/onlinelibrary.wiley.com\/doi\/10.1021\/bp...
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同时,与 Southern 法相比,荧光定量 PCR 技术可对 T-DNA 的不同序列进行扩增,因此能实现对转基因品系中的基因重组的检测( Giovanna 2002 )。 选择一种合适的阳性标准品来绘制标准曲线,是应用实时荧光定量 PCR 技术准确定量模板初始浓度的基础。近年来,国内外的科学家做了不同的尝试。 P Song ( 2002 )等人认为...
elisa方法和荧光定量检测哪个好
之后进入平台期,p24浓度大约103pg\/ml,而RNA载量大约在108拷贝\/ml。两者具有很好的相关性 (r2=0.834;P0.001)。实时荧光定量RT-PCR灵敏度更高,检测范围更广,费用更低。结论所建立的一步法检测SHIV病毒载量的实时荧光 定量RT-PCR方法,可以作为监测SHIV体外扩增的常用方法。
宁苗美扶： 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光标记物,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法.荧光定量PCR不仅实现真正实现了绝,对定量,而且具有灵敏度和特异性、高能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点.
华阴市13979436129： 什么是实时荧光定量PCR?有什么作用?请用自己的话详细说明. - ？
宁苗美扶： 荧光定量PCR是将荧光素结合到PCR的反应物上,然后随着反应的进行检测荧光的强度可以实时的检测产物的量.
华阴市13979436129： 实时荧光定量PCR与普通PCR的区别是什么?结果有何异同?能说明的问题是什么? - ？
宁苗美扶：[答案] 原理不同:荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光;普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量,一般是紫外光. 反应要求:荧光定量对扩增片段有较高的要求,一般为100-300bp;普通定量可以扩增长点的片段....
华阴市13979436129： 荧光定量PCR的 简单解释 - ？
宁苗美扶： 荧光定量PCR是( realtime fluores-cence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度.
华阴市13979436129： PCR,RT - PCR,实时荧光定量PCR的区别与联系 - ？
宁苗美扶：[答案] 你所说的PCR应该就是最常规的PCR,以DNA为模板,通过上下游引物,实现DNA的扩增 RT-PCR一般情况下是指反转录PCR(reverse transcription),尽管有些资料上说实时荧光定量PCR也(realtime fluores-cence quantitative PCR)也简称RT-...
华阴市13979436129： 融合基因实时荧光定量检测是什么意思 - ？
宁苗美扶： 实时荧光定量PCR是一个基因检测的方法,你说的是这个融合基因用实时荧光定量方法做检测,因为检测方法的有不同的,每个方法有自己的灵敏度,实时荧光定量检测灵敏度还是挺高的
华阴市13979436129： FQ - PCR 指的是什么 - ？
宁苗美扶： 实时荧光定量PCR
华阴市13979436129： real - time RT - PCR是什么意思 - ？
宁苗美扶： real-time RT-PCR 实时荧光定量RT-PCR 双语对照词典结果: 网络释义 1. 荧光定量RT-PCR 2. 实时定量RT-PCR 3. 荧光RT-PCR
华阴市13979436129： 实时PCR和一般PCR的区别是什么? - ？
宁苗美扶：[答案] 实时PCR可以实时测得反应体系中产物的量(靠测定荧光强度),可以以此来计算模板浓度,是一种测量方法. 普通PCR则是获得PCR产物的方式,是一种生产方法.
华阴市13979436129： 实时荧光PCR和高通量PCR是同一意思么?它们分别是什么意思有什么作用?最好具体点 - ？
宁苗美扶：[答案] realtime pcr 实时荧光定量pcr,常见有taqman探针法、sybr green I 染料法,对样本中某一基因进行相对或绝对定量; 高通量PCR是二代测序技术,边合成边测序,emPCR等,通量非常高,是为测序而设计的pcr.
