琼脂糖凝胶电泳275bp和240bp的片段能区分开吗
有点难,片段相差太小了,跑不开吧,你可以试试,0.7%胶
琼脂糖凝胶电泳可以区分相差24bp的片段
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法.对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离.
琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段,其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低,但它制备容易,分离范围广,尤其适于分离大片段DNA.普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0.2-20kb,利用脉冲电泳,可分离高达10^7bp的DNA片段.
琼脂糖凝胶的特点
天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成.琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷,而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象,加之硫酸根可与某些蛋白质作用而影响电泳速度及分离效果.因此,目前多用琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳,其优点如下.
(1)琼脂糖凝胶电泳操作简单,电泳速度快,样品不需事先处理就可以进行电泳.
(2)琼脂糖凝胶结构均匀,含水量大(约占98%~99%),近似自由电泳,样品扩散较自由电流,对样品吸附极微,因此电泳图谱清晰,分辨率高,重复性好.
(3)琼脂糖透明无紫外吸收,电泳过程和结果可直接用紫外光灯检测及定量测定.
(4)电泳后区带易染色,样品极易洗脱,便于定量测定.制成干膜可长期保存.
目前,常用琼脂糖作为电泳支持物,分离蛋白质和同工酶.将琼脂糖电泳与免疫化学相结合,发展成免疫电泳技术,能鉴别其他方法不能鉴别的复杂体系,由于建立了超微量技术,0.1ug蛋白质就可检出.
水平式电泳和垂直式电泳有什麼差别?
一、方向不同 1、水平式电泳:水平式电泳是在水平方向放置的凝胶平板中进行的电泳。2、垂直式电泳:垂直式电泳是在垂直方向放置的凝胶平板中进行的电泳。二、支持物不同 1、水平式电泳:水平式电泳用琼脂糖凝胶作支持物。2、垂直式电泳:垂直式电泳用聚丙烯酰胺凝胶作支持物。三、分离效果不同 1、水...
如何制作凝胶电泳?
1.制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液。2.胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻璃板.取透明胶带将玻...
琼脂糖电泳条带的亮度与分子量有关么
琼脂糖凝胶电泳一般都用EB染色,EB是以一定的比例结合到DNA分子上去的,大概是2.5个bp结合一个EB分子(记不清了),就是说电泳后的亮度是和DNA分子大小成正比的.也就是相同浓度DNA,分子量越大,足够EB则条带越亮;如果浓度不同的话,结合的EB量也可以决定亮度啊 ...
电泳样品中加入40%蔗糖溶液有何用?
你说的电泳是琼脂糖凝胶吗?不是也没有关系,通常在跑胶前都会在Buffer的,并要和样品充分混合,只是因为蔗糖的比较重可以使样品沉到点样孔中,不会飘出来,最大限度地跑到胶里去,得到更好的结果。一般在试剂公司订的蔗糖溶液分2种6*Buffer和10*Buffer,其实他们的成分都是相同的,只是蔗糖的含量...
凝胶电泳 电泳DNA时电压电流应该设置为多少。
DNA分子提取得到以后,需要通过电泳技术来检测其数量和质量。自从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶被引入核酸研究以来,按相对分子质量大小分离DNA的凝胶电泳技术,已经发展成为一种分析鉴定DNA分子的重要实验手段。琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳是基因操作的核技术之一,它能够用于分离、鉴定和纯化DNA片段。
请说出以下电泳用胶的区别
普通DNA的分离一般采用0.8%~1%的琼脂糖凝胶电泳 测序胶有两种类型 以前的310类型的测序仪用的是银染的聚丙烯酰胺凝胶电泳 胶浓度一般在6~8 3130或3730之类的新型测序仪用的是毛吸管的分离胶 如POP-7,POP-6,POP-4之类 这种胶相当贵,自己没有配方是配不起来的 都是买现成的胶 southern杂交的电泳...
DNA电泳和蛋白质电泳有什么区别和联系
DNA电泳一般使用的都是琼脂糖凝胶电泳,电泳的驱动力靠DNA骨架本身的负电荷。蛋白质电泳(一般指SDS-PAGE)一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳的驱动力靠与蛋白质结合的SDS上所携带的负电荷。所以相同点就是样品都是带负电荷的,从负极向正极移动,移动的距离都和样品的分子量有关。而且这两个电泳...
制作琼脂糖凝胶时候为什么要加TBE 缓冲剂??
用水的话会使得凝胶电阻很大,电泳过程中电流小、发热量大,DNA泳动效率低。所以配制琼脂糖凝胶一定要用缓冲液配制。里面的离子可以作为电导体。
几种蛋白质凝胶电泳方法的区别和用途
为心血管疾病、肝硬化及某些癌症鉴别诊断提供了可靠的依据,因而已成为医学和临床检验的常规技术.2、 琼脂糖凝胶电泳 :琼脂糖凝胶电泳是一种以琼脂糖凝胶为支持物的凝胶电泳,其分析原理与其它支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用.琼脂糖凝胶具有网络结构,直接参与带电颗粒...
凝胶电泳所需琼脂糖粉 国产货推荐
上海生工的不错,不过我的实验室也是进口的 你用二次的凝胶不清晰估计是被氧化的结果,所以这点钱咱们还是不要省了,把电泳用在刀刃上吧
东虽安斯: 要看目标片段比说一00bp二00bp容易区一900二000区报道说区一-5碱基差异片段指几十bp片
惠农区13536364667: 在琼脂糖凝胶电泳过程中,如何选择琼脂糖浓度? - ?
东虽安斯: 琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分离范围参数: 凝胶浓度(%) 线性DNA长度(bp) 0.5 1000~30000 0.7 800~12000 1.0 500~10000 1.2 400~7000 1.5 200~3000 2.0 50~2000 乐研生物,为您解答,希望能帮到你,望采纳!
惠农区13536364667: 琼脂糖电泳有何优缺点? - ?
东虽安斯: 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法.对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离. 琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段,其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低...
惠农区13536364667: 琼脂糖凝胶电泳使用什么染色?需要注意什么问题? - ?
东虽安斯: 琼脂糖凝胶电泳的染料有许多种,近几年较常用的有: EB-溴乙锭,EB有较大毒性,可致癌,所以使用时一定要万分小心.EB染色的背景较强. SYBR Green--也叫荧光绿如蓝,低毒性,但检测灵敏度没有EB高. GelRed--号称无毒,无皮肤渗入型,有伤口就不好说了.背景荧光弱,但加多了容易出现拖带.由于在市场上价格较高,所以有出现很多仿冒货,买时要擦亮眼睛.
惠农区13536364667: 如何提高琼脂糖凝胶电泳的分辨率 - ?
东虽安斯: 调整胶的浓度,胶浓度适当提高,电泳电压适当调低,跑的时间适当加长,可使更多条带分开. 但是胶浓度越高,长片段的条带不容易跑开,小片段的分离效果会变好. 希望对你有帮助
惠农区13536364667: 请问琼脂糖凝胶电泳可以区分相差24bp的片段么?可以通过改变什么条件来达到? - ?
东虽安斯: 根据我的经验来说,产物为200 bp,若有一个与之相差24 bp的片段经过普通琼脂糖电泳是无法区分的,即使使用2%的琼脂糖凝胶.
惠农区13536364667: 琼脂糖凝胶电泳使用哪种电压的电泳仪 - ?
东虽安斯: 不用那么高 你又不跑PAGE 琼脂糖一般都不用超过220V 一般如果是只调电压的那种 150V左右足够用了 如果是电流和电压同时调的 50ma,100~120V就可以
惠农区13536364667: 琼脂糖凝胶长度与电泳好坏的关系,是否和电场有关. - ?
东虽安斯: 凝胶长度不影响电泳好坏.没有看到电泳图,根据你的描述猜测会不会是:1.电泳缓冲液正负极离子浓度差异过大.缓冲液用了多久了?换新的电泳缓冲液试一下.2.琼脂糖胶浓度不均匀.制胶的时候,琼脂糖有没有完全融化?倒胶时胶的流动性如何,是不是先插了梳子后倒的胶?胶凝固的时候,有没有一头对着吹冷风的窗户?等等
惠农区13536364667: 如何通过琼脂糖凝胶检测DNA(电泳的原理及影响因素)? - ?
东虽安斯: 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法.其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用.琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大大提高了分辨能力.DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,因此在电场中向正极移动. 影响因素的话,DNA的长度,结构,胶的浓度,电压等会对电泳造成影响.
惠农区13536364667: 做琼脂糖凝胶电泳需要注意哪些问题 - ?
东虽安斯: 凝胶电泳操作注意事项: 1. 缓冲系统:在没有离子存在时,电导率最小,DNA不迁移,或迁移极慢,在高离子强度的缓冲液中,电导很高并产热,可能导致DNA变性,因此应注意缓冲液的使用是否正确.长时间高压电泳时,常更新缓冲液或在...