用4%多聚甲醛固定的活体组织还能不能进行RT-PCR检测？
不太可能,RNA降解太快,而且取材特别讲究,动作要快,离体后要尽快放入液氮罐,后来可以转移到-80度冰箱,而且要尽快提取RNA,逆转录cDNA,然后放在-20度冰箱长期保存,上述步骤都要特别小心,很多东西都要进口枪头和DEPC水泡过,操作要特别小心
氨苄青霉素和链霉素是影响细胞壁合成的抗生素，一般动物细胞没用细胞壁，一般正常浓度的双抗（1X体积）不会对细胞有多大的影响，不过提RNA前为什么要用双抗洗呢？感觉没什么意义，如果有污染物，主要是用无菌水清洗 不过像利福平、甲硝锉、新生。
答案：与甲醛固定的组织保存的时间有关。个人认为，如果不超过半个月，应该还可以做，太久了可能就不行了。参考文献
题目：标本固定对组织总RNA和病毒RNA的影响
作者及单位：贺莉萍[1] 蒙艳斌[2] 郭毅[3] [1]湖南湘南学院流行病学与卫生统计学教研室 [2]湖南湘南学院解剖学教研室 [3]武汉大学公共卫生学院流行病学教研室
摘要：目的：探讨固定剂、固定时间及温度对RNA病毒感染组织总RNA的完整性、得率及病毒RNA扩增的影响。方法：***略*** 结果：①RNA完整性：与立即冰冻或新鲜组织比较，体积分数为1的甲醇固定24h，RNA完整性损伤不明显；体积分数为0.75的乙醇、体积分数为1的丙酮固定12h后RNA开始出现损伤带，24h出现明显的损伤；而体积分数为0.1的甲醛、4％PFA固定6h就开始出现明显的损伤，固定24h几乎很难看清RNA条带。②RNA得率析因分析结果显示，不同固定剂、固定时间、固定温度下固定的组织中所提RNA的得率差异有显著性（P〈0．01），并有显著性交互作用（P〈0．01）。4℃甲醇固定6h的RNA得率最高，体积分数为0.1的甲醛在室温下固定48h得率最低。③固定后标本巢式RT-PCR，除体积分数为0.1的甲醛固定48h后扩增结果不稳定外，其余各固定方式均能扩增出特异性带。对电泳结果进行灰度扫描时，与甲醛相比，甲醇、乙醇和丙酮固定的标本中扩增的产物电泳条带更亮，灰度值更高（P〈0.01）。结论：①对RNA完整性的保存沉淀脱水类固定剂明显优于醛类固定剂。②对RNA病毒感染组织固定时间不宜偏长，固定过程的温度宜选用4℃。
正文：略
讨论：文章认为， 4％PFA的pH值为中性，性质比体积分数为0．1的甲醛温和，对核酸的降解和损伤作用小些。所以4％中性多聚甲醛固定后的标本中RNA保存效果比体积分数为0．1的甲醛固定好。
如果仅检测形态结构可用4％中性多聚甲醛等醛类固定剂。如不能及时处理或没有冰箱，或标本小而既要用病理检测又要用于核酸分析，则宜选用沉淀类固定剂替代甲醛类固定剂，尤其推荐使用甲醇，即使用醛类固定剂时也应尽量采用中性甲醛。
xxhtjmu个人认为，根据作者文献中的数据和结论，结合你的问题，时间是个关键的因素。固定时间越长，RNA降解越多。
4%多聚甲醛固定液的作用
用于细胞或组织的固定。4%的多聚甲醛穿透力强，固定均匀，能使组织硬化，有利于切片。可使细胞或组织的蛋白质凝固，终止内源性或外源性酶反应，防止组织自溶或异溶，以保持原有结构和形态。
4%多聚甲醛固定液会影响细胞膜
题主是否想询问“4%多聚甲醛固定液会影响细胞膜吗”？会。4%多聚甲醛固定液，对细胞不但能够起到固定作用，还起着增加细胞膜通透性的作用，会影响细胞膜。细胞膜是包围细胞质和细胞器的界膜，也称为质膜。
多聚甲醛组织固定了半年还有效吗
多聚甲醛组织固定了半年没有效了。根据多聚甲醛的特性得知，使用4%的多聚甲醛可以固定标本不能超过48小时，固定时间太久组织会变脆，在温度4°以下，最多可以放一个月，肯定会损失抗原的，由此多聚甲醛组织固定了半年没有效了。
12孔板细胞多聚甲醛固定怎么操作
1、在培养板中培养好细胞后，吸除培养基，使用PBS轻洗细胞2×3min，做固定（凋亡的TUNEL染色等可以不清洗）。2、固定：加入4%多聚甲醛(PBS配制)固定20分钟。如暂时不能立即做组化检测，使用含0.4%多聚甲醛的PBSPH7.4浸泡细胞（免疫组化检测完成前不要让细胞变干，否则细胞收缩形态不好）。3、...
4%多聚甲醛固定液有什么毒
4%多聚甲醛固定液有甲醛。4%多聚甲醛主要是多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成，pH为7.4，该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定。
动物脏器多聚甲醛固定后储存条件
动物脏器多聚甲醛固定后储存条件：常温下储存。4%多聚甲醛固定时间不要太久，固定后可以放在梯度蔗糖中脱水，4度保存。多聚甲醛固定时间是不能太久的，24-48小时足够了。固定时间超过1星期，固定液中的醛类物质会与蛋白形成共价结合，这种结合会导致无论你用什么修复方法，蛋白的抗原表位都无法暴露。
2.5%戊二醛和4%多聚甲醛固定液比例
2.5%戊二醛和4%多聚甲醛固定液要4%多聚甲醛+(0.5-2%)戊二醛。要灌注固定，即选择4%多聚甲醛+(0.5-2%)戊二醛的混合固定液，这两种固定剂优缺点可以互相补充。多聚甲醛与戊二醛相比，其渗透力强、固定迅速、价格低。
多聚甲醛固定肝需要放在4℃中吗
需要。直接固定在4%多聚甲醛里即可，固定的话最好在4度，因为多聚甲醛在室温易分解，常温也没有什么影响。会有冰晶，泡了多聚甲醛的组织不要冷冻保存，常4℃保存即可。
4%多聚甲醛固定液有毒吗
有。4%多聚甲醛固定液是有毒的，一般都是买huayueyang配好的，-20 度保存。多聚甲醛不是固定剂。它必须在溶液中解聚成甲醛。在细胞培养中，典型的甲醛固定程序将涉及使用4%甲醛溶液，磷酸盐缓冲溶液 （PBS）在冰上放置10分钟。
多聚甲醛固定后组织膨胀的原因
多聚甲醛之所以能够起到很好的固定效果，和它的制作工艺、物理性质和化学性质是分不开的。多聚甲醛多制成多聚甲醛固定液来进行固定，多聚甲醛液的配方决定了多聚甲醛的固定性，多聚甲醛液中含有pbs溶液，HCL，这些溶液和多聚甲醛按照一定的方法混合在一起就具有了个定作用。
营海尿塞： 答案:与甲醛固定的组织保存的时间有关.个人认为,如果不超过半个月,应该还可以做,太久了可能就不行了.参考文献题目:标本固定对组织总RNA和病毒RNA的影响作者及单位:贺莉萍[1] 蒙艳斌[2] 郭毅[3] [1]湖南湘南学院流行病学...
弋江区17076152224： 组织在多聚甲醛中放多久 - ？
营海尿塞： 甲醛、多聚甲醛这些固定液的固定时间是不能太久的,一般24-48小时足够了.如果固定时间超过1星期,固定液中的醛类物质会与蛋白形成共价结合,这种结合会导致无论你用什么修复方法,蛋白的抗原表位都无法暴露(也就是说你在做组化或者免疫荧光时抗原修复这一步骤没有用了).这种组织做出来的结果,要么得不到阳性,要么各种假阳性.但是做HE或者其他不涉及抗原抗体结合的染色还是可以的.
弋江区17076152224： 灌注固定后过的脑组织可以做western blot,pcr,elisa等吗 - ？
营海尿塞： 大鼠灌注取脑;用途:;1.用于常规HE染色,免疫组化分析;2.冰冻切片可以不做脑组织固定;3.不可用于westernblot和PCR;4.如果观察脑组织的缺血、损伤或其它病变时,不作;原理:;心脏灌流术能够快速冲净血液并在动物死亡前进行组织...
弋江区17076152224： 脑组织在多聚甲醛可以放多久再石蜡包埋 - ？
营海尿塞： 使用4%的多聚甲醛可以固定标本不能超过48hours,固定时间太久组织会变脆如果是在温度4°以下最多可以放一个月,但是肯定会损失抗原的
弋江区17076152224： 组织需要在12 - 24h内做切片保存吗? - ？
营海尿塞： 在甲醛里是可以长期保存的,RNA肯定降解完了,DNA和蛋白质是能够长期保存的,几十年都没问题.而问题在于固定时间过长会导致固定过度,也就是DNA、蛋白质之间交联太密,对以后修复带来困难,导致敏感度下降,甚至假阴性.目前组织库的理念是固定时间小于48小时,可以包埋在石蜡里长期保存.南昌中洪博元技术部
弋江区17076152224： 多聚甲醛固定的细胞还能提DNA吗 - ？
营海尿塞： 我没有用国戊二醛.根据箍狗结果,大多是两者混合在一起作为固定液使用,即同时使用.
弋江区17076152224： 病理切片是否可用多聚甲醛固定 - ？
营海尿塞： NHK : 要看看是冰冻切片...还是石蜡切片...常用的固定液是10%福尔马林(Formalin)...即4%甲醛(Formaldehyde)...固定时间通常是4~6小时...一般不超过24小时...冰冻切片常用的固定液是无水丙酮(Anhydrous Acetone)...或4%多聚甲醛(Polyoxymethylene)...固定时间为10~20分钟........
弋江区17076152224： 多聚甲醛固定细胞爬片37度要多久 - ？
营海尿塞： 4度冰箱存放的时间一般不超过1个月,而且得因细胞的抗原性而异,有的细胞涂片,如病毒感染的细胞,都不宜放在4℃.建议最好放在-20℃,要存放更长时间的应放在-80℃.用时再取出,于室温自然解冻.
弋江区17076152224： 做细胞免疫荧光,4%的多聚甲醛放到4度能直接用吗 - ？
营海尿塞： 可以,推荐密封,放于四度冰箱中待用.
弋江区17076152224： 脑冰冻切片能不用多聚甲醛灌注吗 - ？
营海尿塞： 鼠脑冰冻切片采用4%的多聚甲醛固定,小鼠直接灌注saline20ml,4%多聚甲醛20ml经左心室固定然后取材在4度4%多聚甲醛后固定4-6h,浸20%-30%糖沉底,就可以切片,切片首先需要冰冻切片机,切片厚度大概选择20-40um差不多.
