聚丙烯酰胺凝胶电泳的作用是什么?
SDS-PAGE又叫做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,其作用具体如下:
由于SDS PAGE可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度。
SDS应用于提纯过程中纯度的检测,纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一条带,但如果蛋白质是由不同的亚基组成的,它在电泳中可能会形成分别对应于各个亚基的几条带。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高的灵敏度,一般只需要不到微克量级的蛋白质,而且通过电泳还可以同时得到关于分子量的情况,这些信息对于了解未知蛋白及设计提纯过程都是非常重要的。
扩展资料:
SDS-PAGE的特性:
1、在一定浓度时,凝胶透明,有弹性,机械性能好;
2、化学性能稳定,与被分离物不起化学反应,在很多溶剂中不溶;
3、对pH和温度变化较稳定;
4、几乎无吸附和电渗作用,只要Acr纯度高,操作条件一致,则样品分离重复性好;
5、样品不易扩散,且用量少,其灵敏度可达10-6ug;
6、凝胶孔径可调节,根据被分离物的分子量选择合适的浓度,通过改变单体及交联剂的浓度调节凝胶的孔径;
7、分辨率高,尤其在不连续凝胶电泳中,集浓缩、分子筛和电荷效应为一体。因而较醋酸纤维薄膜电泳、琼脂糖电泳等有更高的分辨率。
参考资料来源:百度百科-SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
参考资料来源:百度百科-聚丙烯酰胺凝胶电泳
聚丙烯酰氨凝胶电泳的实验材料
每管加至液体高度为7.5厘米。为了保证凝胶表面平整可用注射器通过细针头小心地加一层(高约1厘米)蒸馏水于表面上,勿使与凝胶液混合,室温放置。如果条件合适溶液于 30—60分钟内聚合而成凝胶。凝胶溶液的配制方法如下:溶液甲:丙烯酰胺(氯仿重结晶)25克,双体(甲醇重结晶)1克,加水配成100毫升...
sds-page凝胶电泳可以测定rna吗
可以。聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是分离大分子最常用的技术之一,包括DNA,RNA和蛋白质。电泳过程是通过施加电场作用使带电离子进行迁移的过程。在该技术中,带电分子的迁移率与其净电荷和通过的溶液的电阻成正比。十二烷基硫酸钠(SDS)是一种阴离子去污剂,溶解过程中,其分子在较广pH范围内具有净负...
聚丙烯酰胺凝胶作为电泳支持物,有何优缺点?
聚丙烯酰胺凝胶电泳用于分离蛋白质和寡核苷酸。 作用原理 聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐...
几种蛋白质凝胶电泳方法的区别和用途
3、聚丙烯酰胺凝胶电泳 :聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂又称为共聚体的N,N’-甲叉双丙烯酰胺(简称Bis)在加速剂和催化剂的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称PAGE).应用范围广,可用于蛋白质、酶、核酸等生物大分子的分离、定性、定量及...
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的发展历史
如果在第一维方向上的电泳使用丙烯酰胺和不同PH的丙烯酰胺的衍生物共聚,从而建立起具有ph梯度的固相化胶条,这样的系统称为固相pH梯度等电聚焦系统。IPG—IEF已成为目前通用的一维等电聚焦方式。IPG胶条的使用大大提高了二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的重复性和分辨率,从而使二维聚丙烯酰胺凝胶电泳数据的发布和...
聚丙烯酰胺凝胶作为区带电泳的支持介质有哪些优点?
①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N,N’甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝胶有格子是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物,没有或很少带有离子的侧基,因而电渗作用比较小,不易和样品相互作用。②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质,在聚合前可调节单体的浓度比,形成 不同程度交链结构,其空隙度可在...
聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理
2006年生化考研题目,简答第五题。蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳实验原理 聚丙烯酰胺凝胶,是由丙烯酰胺单体(Acr)和少量的交联剂N,Nˊ-甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂(过硫酸胺或核黄素)和加速剂(N, N,NˊNˊ-四甲基乙二胺)的作用下聚合交联成的三维网状结构的凝胶。以此凝胶为支持物的电泳称...
大分子量蛋白 电泳时间
大分子量蛋白,电泳时间:SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳根据分子量大小分离蛋白质,分子量小的快,琼脂糖凝胶电泳根据硫酸根与某些蛋白质作用分离蛋白,有可能分子量大的快。降低蛋白电泳中丙烯酰胺的浓度,低浓度的蛋白电泳胶更有利于大分子量蛋白的分离,延长电泳的时间,即使溴酚蓝指示线已经到底也可以继续电泳一...
SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分的作用?
聚丙烯酰胺凝胶电泳简称为PAGE(Polyacrylamide gel electrophoresis)聚丙烯酰氨凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术。聚丙烯酰胺凝胶由单体丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合而成,聚合过程由自由基催化完成。催化聚合的常用方法有两种:化学聚合法和光聚合法。化学聚合以过硫酸铵(AP)为催...
丙烯酰胺凝胶一定要加四甲基乙二胺吗
不是的。聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种使用聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。在这种载体介质上,可以根据被分离物质的分子大小和分子电荷进行分离。聚丙烯酰胺凝胶具有以下优点:①聚丙烯酰胺凝胶是丙烯酰胺与N,N'亚甲基双丙烯酰胺聚合而成的高分子。凝胶晶格是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物,没有或很少有离子...
召战麝香: 分离不同荷电量、不同分子量的物质,而使其固定在凝胶中而不是丢失在溶液中. 可以调节凝胶浓度而调节网孔大小,以适应你的目标物质的分子量. 一般可用于蛋白 核酸等两性大分子物质分离分析.
兰山区15678801189: 聚丙烯酰胺凝胶电泳可应用于哪些方面? - ?
召战麝香:[答案] 用于蛋白质和核酸的分离
兰山区15678801189: 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么作用? ?
召战麝香: 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)或称为活性电泳是在不加入SDS 和疏基乙醇等变性剂的条件下,对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯.未加SDS的天然聚丙烯酰胺凝胶电泳可以使生物大分子在电泳过程中保持其天然的形状和电荷,它们的分离是依据其电泳迁移率的不同和凝胶的分子筛作用,因而可以得到较高的分辨率,尤其是在电泳分离后仍能保持蛋白质和酶等生物大分子的生物活性,对于生物大分子的鉴定有重要意义,其方法是在凝胶上进行两份相同样品的电泳,电泳后将凝胶切成两半,一半用于活性染色,对某个特定的生物大分子进行鉴定,另一半用于所有样品的染色,以分析样品中各种生物大分子的种类和含量.
兰山区15678801189: 聚丙烯酰胺凝胶电泳条带是什么意思? - ?
召战麝香: 许多分子,如氨基酸、多肽、核苷酸等都具有可电离基团,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动,这就是电泳,由于各种离子的移动速率不同,就把各种不同物质分开,前后分成了一排一排,在光学仪器下便显示为一条条的光带,这就是电泳条带,人们可以根据条带的宽窄和位置利用已有的资料或软件,来分析各种物质的成分和含量.
兰山区15678801189: 聚丙烯酰胺凝胶作为电泳支持物,有何优缺点? - ?
召战麝香:[答案] 聚丙烯酰胺凝胶电泳用于分离蛋白质和寡核苷酸. 作用原理 聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应.它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳的过程中,蛋白质能够保持完...
兰山区15678801189: 聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理以及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理,. - ?
召战麝香:[答案] 聚丙烯酰胺凝胶电泳(英语:polyacrylamide gelelectrophoresis,简称PAGE) 作用:用于分离蛋白质和寡核苷酸.聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N'一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(AP),N,...
兰山区15678801189: SDS - PAGE电泳的原理是什么? - ?
召战麝香:[答案] 作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,形状和电荷. 而SDS-PAGE仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离...
兰山区15678801189: SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入SDS的作用是[ ] - ?
召战麝香:[选项] A. 增大蛋白质的相对分子质量 B. 改变蛋白质的形状 C. 掩盖不同种蛋白质间的电荷差别 D. 使蛋白质发生完全变性,解聚成单条肽链
兰山区15678801189: 尿聚丙烯酰胺凝胶电泳的临床意义是什么? ?
召战麝香: 【英文名称】PRO【临床意义】生理性增高:高蛋白饮食者、剧烈运动、精神激动、受寒体位变化、青少年快速生长期等 病理性增高:多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、重链病、溶血性疾病、肾小球肾炎、肾盂肾炎、急性肾衰、高血压肾病、肾病综合征、中毒性肾病、狼疮性肾病、糖尿病肾病、高热、多囊肾、泌尿系统感染、炎症等【参考值】阴性(NEGATIVE)