检测食品中大肠杆菌是什么样子的？
GB4789.3—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》第一法：大肠菌群MPN计数法。第二法：大肠菌群平板计数法。两种方法适用于各类食品中大肠菌群的计数。
大肠菌群（Coliforms）是一群在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，其主要检测意义在于反映食品卫生状况并推测其存在肠道致病菌的可能性。常以大肠菌群作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。
第一法：
进入无菌操作室前应更换无菌实验服，戴帽子、口罩、无菌手套。进入无菌操作室后，将镊子在酒精灯外焰充分灼烧，夹取适量酒精棉全面擦拭双手，然后才能进行实验操作。酒精易燃，因此在擦拭双手的过程中应离开酒精灯火焰一定距离，防止出现危险，待手上的酒精挥发后，再进行实验操作。
样品的稀释：取一洁净无菌均质袋于自动稀释仪上，将称样勺于酒精灯外焰灼烧片刻，准确称取25g样品于无菌均质袋中。用酒精灯外焰灼烧注水口片刻，在盛有样品的均质袋中注入225mL无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液。取下均质袋，将均质袋放入拍击式均质器中，用均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液。
注意：样品匀液的pH值应在6.5～7.5之间，必要时可用1mol/L无菌氢氧化钠或1mol/L无菌盐酸溶液调节。均质完毕后，将均质袋置于样品框中。用记号笔依次在无菌试管上做好样品和稀释度标记。用无菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓缓注入装有9mL生理盐水的无菌试管中。稀释前后试管口都应在酒精灯上灼烧片刻。加塞后于振荡器上混合均匀，制成1:100的样品匀液。根据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。稀释样品时，注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面；每递增稀释1次，换用1支1mL无菌吸管或吸头。
初发酵试验：每个样品选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤，每管接种1mL。注意，当接种量超过1mL，则用双料LST肉汤，双料LST肉汤是指配置时除蒸馏水外其他成分加倍的培养基。
本次试验中，前三管无菌试管中加入10mL十倍样品稀释液，培养基为双料LST肉汤；第4～6管加入十倍稀释液1mL，培养基为单料肉汤；第7～9管加入百倍稀释液接种1mL，培养基为单料肉汤；接种前后试管口均需用酒精灯灼烧片刻，接种后及时振摇均匀。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。
接种完毕后，将LST肉汤管置于培养箱中36℃±1℃条件下培养24h±2h。24h±2h后，观察试管中的倒管内是否有气泡产生，产气者进行复发酵试验；如未产气则继续培养至48h±2h，产气者进行复发酵试验，未产气者报告为大肠菌群阴性。
复发酵试验：进行复发酵试验时，先将接种环置于红外灭菌器中灭菌，再用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）管中，接种完毕后应及时将接种环在灭菌器中灭菌。将接种完的煌绿乳糖胆盐肉汤管置于培养箱中，36℃±1℃下培养48h±2h。36℃±1℃培养48h±2h后，观察产气情况，若试管中的倒管内有气泡，计为大肠菌群阳性管，否则计为大肠菌群阴性。
四结果报告
按确证的大肠菌群LST阳性管数，参照GB4789.3—2010附录中提供的大肠菌群最可能数检索表，报告每g（mL）样品中大肠菌群的MPN值。
第二法：
样品处理：固体样品应在无菌条件下充分粉碎。本次演示以乳粉为例，取密封状态良好的试样，备用待测。
检测过程：
在装有9mL生理盐水的无菌试管上做好标记，用1mL无菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，沿管壁缓缓注入装有9mL生理盐水的无菌试管中，稀释前后试管口都应在酒精灯上灼烧片刻。加塞后于振荡器上混合均匀，制成1:100的样品匀液。同理，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。稀释样品时，注意吸管或吸头尖端不得触及稀释液面；每递增稀释1次，换用1支1mL无菌吸管或吸头。
接种及培养：在事先经灭菌处理的培养皿底部做好标记。根据对样品污染状况的估计，选取2～3个适宜的连续稀释度。本次演示只做1:10和1:100的样品稀释液。
用无菌吸管吸取1:10样品稀释液1mL，加入到培养皿中，备用。同理，加入1:100稀释液和空白液。注意，每个稀释度应接种2个无菌培养皿，空白液即为以1mL生理盐水代替1mL样品稀释液。
加完样品梯度稀释液后，即可倾倒培养基。倾倒前应将锥形瓶的瓶口在酒精灯上充分灼烧。灼烧后及时倾注15mL～20mL结晶紫中性红胆盐琼脂于每个培养皿中，小心旋转培养皿，将培养基与样液充分混匀。倾注培养基时应将锥形瓶口尽量伸入培养皿内，防止倾倒时培养基挂在培养皿的内壁或外壁上，且倾倒过程应果断，防止培养基沿锥形瓶外壁流出、滴落。培养基的温度以46℃为宜，不能过高或过低，温度过高不利于操作且对菌体有害，温度过低培养基迅速凝固，菌体不能在培养皿内均匀的分布，导致菌落计数困难。转动培养基时用力须均匀，防止培养基沾到培养皿上盖或洒出。
倒完培养基后，静置培养皿，等待培养基冷却凝固。
待培养基凝固后，再加3mL～4mL结晶紫中性红胆盐琼脂覆盖平板表层。加两次培养基的主要目的是：使菌体均在培养基内部生长，以便于观察典型菌落形态。等待培养基冷却凝固。待培养基凝固后，翻转平板，置于培养箱中于36℃±1℃条件下培养18h～24h。
平板菌落计数：选取菌落数在15CFU～150CFU之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落，其中典型菌落的特征为紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大。
证实实验：先在煌绿乳糖胆盐肉汤管上做好标注。将接种环置于红外灭菌器中灭菌，再用接种环从结晶紫中性红胆盐琼脂平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于煌绿乳糖胆盐肉汤管内，振摇均匀。每次接种后都应及时将接种环在灭菌器中灭菌。将接种完的煌绿乳糖胆盐肉汤管置于培养箱中，于36℃±1℃条件下培养24h～48h。培养完毕后，观察煌绿乳糖胆盐肉汤管中产气情况。凡管内倒管有气泡者，即可报告为大肠菌群阳性。
四结果报告
经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以计数的平板菌落数，再乘以稀释倍数，即为每g（mL）样品中大肠菌群数。
如何检测食物中大肠杆菌是否超标?
大肠菌群测定的操作细则(***研究所测试中心)大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示...
大肠杆菌检测方法国标是用什么方法检测的
瓶装汽水和果汁中每100ml大肠菌群不能超过5个。3、全自动微生物定量分析仪（TEMPO）检测法 全自动微生物定量分析（TEMPO）仪大肠杆菌群计数检测有TEMPOTC和TEMPOCC两种方法。TEMPOTC的开发是为获得NF ISO4832标准相当性能水平。TEMPOCC法是TEMPO仪器上根据BAM方法专门用于24h计数食品中大肠杆菌群方法。
有谁知道食品中大肠菌群最近似数测定的卫生学意义??谢谢(*^__^*...
一、对控制肠道传染病的发生与流行有利。二、判断食品之中是不是受到粪便污染。三、这也反应了食品在生产、加工、运输以及储存等过程中的卫生情况。
测定食品中大肠杆菌与大肠菌群的意义是什么?两者都要检测吗?
同时也间接作为食品或水源受到肠道致病菌污染的指标。第一个是检测有木有大肠杆菌,用来证实以上两个意义;第二个是放在试管或者培养基上培养24小时候,通过肉眼来数聚集的菌落数,再利用“稀释度选择及菌落数报告方式”表估计出群的个数的统计方法。刚在写微生物实验报告顺便回答一下,希望有用。
海鲜牡蛎检测菌落总数和大肠杆菌用什么方法检测
在37℃的温箱里培养24小时，取出来计算它的菌落单位总数就行。大肠杆菌用发酵法，单位是MPN\/100ml(每100毫升或毫克的样品里面最大可能菌落形成单位)方法是15管法(适合食品)或9管法(适合非食品如游泳池水)用乳糖胆盐发酵管。致病菌用培养法，只要符合相应的化学，生物试验就可以判断为某致病均阳性。
菌落总数大肠杆菌和致病菌的检测方法
大肠菌群测定的操作细则 大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。1 设备和材料 1....
大肠杆菌检测国家标准是什么
O111， O26， O103 和 O145血清组的测定和志贺毒素产生的大肠杆菌(STEC)检测用水平方法ISO 16654-2001 食品和动物饲料的微生物学 检测大肠杆菌0157的水平方法，关于食品 大肠杆菌 检测的标准MSZ 3620\/1-1972 罐装食品检测大肠杆菌含量检测MSZ 3612\/4.lap-1961 罐装食品大肠杆菌检测行业标准-商品检验，...
什么是大肠杆菌
3. 食品安全问题：大肠杆菌在食品加工和储存过程中是一个重要的卫生指标。某些食品受到大肠杆菌的污染时可能会导致食物中毒，尤其是在未煮熟的肉类中。因此，食品行业特别关注大肠杆菌的控制和检测，以确保食品安全。4. 其他作用与应用：除了对人体健康的影响外，大肠杆菌在生物科学和生物技术领域还有应用。
检测食品中大肠杆菌的培养基要灭菌吗
A、要检测食品中大肠杆菌是否超标，待检测食品不能进行灭菌处理，A错误；B、配制好的培养基经高压蒸汽灭菌后倒平板，B正确；C、用稀释涂布法接种经培养后可形成单个菌落，因此可以测定大肠杆菌的活菌数，C正确；D、接种后将培养皿倒置并在适宜温度下培养，D正确．故选：A．
怎么检测酱油生产中的大肠杆菌?
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阳原县18163696425： 怎么检验饮料中的大肠杆菌?? - ？
释生美平： 样品制备:以无菌操作取25 g样品,放入装有225 mL稀释剂的灭菌均质杯内,于8000 r/min均质1~2min,制成1:10样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替).稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计,用稀释剂将样品匀液制成...
阳原县18163696425： 食品中的大肠杆菌的检测方法 - ？
释生美平：[答案] 培养基配置 检样、稀释 乳糖胆盐发酵管观察:(36摄氏度24小时) 3.1不产气 大肠杆菌阴性 3.2产气伊红美蓝琼脂倒平板 3.2.1G染色,G阳性,说明大肠杆菌阴性 3.2.2乳糖发酵管(36摄氏度24小时),同样不产气,大肠杆菌阴性
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阳原县18163696425： 沙门氏菌,大肠杆菌的菌落形态是什么样子? - ？
释生美平： 在普通琼脂培养基上面都是一样的..圆形边缘整齐,表面光滑,半透明,小凸起..要鉴别这两个的话就要用三糖铁培养基或者xdl培养基了.沙门氏菌能利用葡萄糖,不能利用乳糖,可产生硫化氢气体.大肠杆菌葡萄糖和乳糖都可利用,产气或者不产气,不产硫化氢.这样的性质,使得沙门氏菌在三糖铁上培养表现试管底部有气体,穿刺变黑(硫化亚铁),中间黄色,表面红色.大肠杆菌穿刺不变黑,表面黄色... 还有..如果你不需要鉴别这两种菌只需要知道有没有粪便污染的话,那LST 肉汤加杜氏小管就可以了..国标上都有 还有哦,此类问题国标上都有的,想大概看一下免费的去食品伙伴网下载啊..包括培养基配制啊鉴别啊什么的,其中有个GB-4789.38是大肠杆菌的计数.
阳原县18163696425： 食品中卫生 微生物学 检验大肠菌群测定 什么是大肠菌群 它的数指什么 - ？
释生美平： 一、大肠菌群介绍 大肠菌群并非细菌学分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致,其定义为:需氧及兼性厌氧、在...
阳原县18163696425： 用月桂基检测大肠杆菌如何观察 - ？
释生美平： 按照GB4789.3-2010操作即可. 接种LST(月桂基硫酸盐胰蛋白胨)肉汤中培养48h产气,即倒管中有气泡出现,那么就转种BGLB肉汤培养48h,如果在BGLB肉汤也可产生气泡,那么即证明该管大肠菌群阳性.
阳原县18163696425： 大肠杆菌和霉菌的检测方法 - ？
释生美平： 请参照; GB4789-2003《食品微生物检验方法》中大肠菌群和霉菌检验.
阳原县18163696425： 大肠菌群怎么判定? - ？
释生美平： 大肠菌群检验方法: 由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,即:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌.因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行. 目前国内采用的进出口食品...
