怎么“应用青霉素法筛选青霉敏感菌中的营养缺陷变异株？”

怎样筛选营养缺陷型菌株~

在筛选营养缺陷型突变株的工作中，常用三种培养基：
一是基本培养基，它是仅能满足微生物野生型菌株生长要求的培养基。第二种是完全培养基，它是能满足某微生物所有营养缺陷型菌株营养要求的天然或半合成培养基。第三种是补充培养基，凡是只能满足某种营养缺陷型生长需要的合成培养基，就称为补充培养基。
1、用于诱发营养缺陷型的诱变剂有亚硝基胍，紫外线，亚硝酸等，其中亚硝基胍的诱发突变率极高，一般可达10%以上，另外，随着诱变剂量的提高突变频率也增加。
2、在诱变之后存活的菌体中，存活的营养缺陷型菌株的数量很少，而野生型细胞却大量存在，所以常采用抗生素法和菌丝过滤法来筛选营养缺陷型菌株。
3、经过第二步，野生型的细胞和营养缺陷型细胞数量比例发生很大变化，但是终究还是混合体，要设法把缺陷型菌株从群体分离检出，可用点植对照法，影印法，夹层法，限量补充培养法来分离。
4、缺陷型菌株的鉴定，实际是测定营养缺陷型菌株所需的生长因子种类。鉴定的方法可分为两大类：一种方法是在一个平皿中加入一种营养物质以测定多株缺陷型菌株(10-50)对该生长因子的需求情况。
第二种方法是在同一个平皿上测定一种缺陷型菌株对许多生长因子的需求情况，成为生长谱法。

扩展资料：

营养缺陷型菌株广泛应用于核苷酸及氨基酸等产品的生产。
1、阻断代谢途径，积累中间代谢产物。
2、阻断分支代谢，改变代谢方向，积累另一终端代谢产物。
3、解除反馈抑制，积累代谢产物。
4、利用渗漏缺陷型进行代谢调控育种。
参考资料来源：百度百科-营养缺陷型菌株

一.筛选营养缺陷型菌株的一般步骤和方法
①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株.用15W或20W紫外灯管,距离15cm～30cm,照射10sec～20min.在照射受试菌前,灯管须预热20min,使灯光稳定.菌悬液要磁力搅拌,使所有单细胞或单孢子均匀受到照射.特别要注意,应在黑暗或红外光下操作,接种后器皿用黑布包严,防止发生可见光的修复作用.
②淘汰野生型
a）抗生素法 某些抗生素能杀死生长繁殖着的微生物,而对处于休止状态的微生物无杀伤作用.如青霉素能抑制细菌细胞壁肽聚糖的生物合成,制霉菌素可损伤真菌细胞膜,二者可分别杀死生长繁殖着的细菌、真菌.
b）菌丝过滤法 适用于放线菌、霉菌等丝状微生物.在基本培养基中野生型孢子能萌发长成菌丝体,而营养缺陷型孢子则不生长.将经诱变处理的孢子接种于液态基本培养基中,振荡培养10h～12h,使原养型萌发（以肉眼刚能看见菌丝为度）,然后以滤纸、棉花或玻璃过滤漏斗过滤,菌丝被滤除,未萌发的缺陷型孢子能顺利通过,从而达到富集营养缺陷型的目的.
③检出缺陷型的常用方法
a）逐个测定法（点种法）把经诱变处理并淘汰野生型后的菌液在完全培养基上涂布分离,将培养后长出的每一个菌落分别点种在基本培养基和另一个完全培养基上,凡在基本培养基上不能生长而在完全培养基的相应位置上能生长的菌落,表明其为营养缺陷型.
b）夹层培养法经诱变处理后的菌液,稀释后与基本培养基混匀并倾入平皿中,待凝固后,再加上一薄层不含菌的基本培养基.培养后在皿底将长出的菌落做上标记.然后加上一层完全培养基,再经培养后,新出现的菌落多数是营养缺陷型（图3－31）.此法适用于兼性厌氧的细菌.
C）影印法 将丝绒包在直径小于平皿的圆柱台上,固定,作为影印接种工具,灭菌备用.将经诱变处理并淘汰野生型的菌液涂布于完全培养基表面上,培养,待长出菌落后,用影印接种工具在此平板上轻按一下,然后在另一基本培养基平板上按一下.经培养后在基本培养基上不长而在完全培养基的相应部位上生长的菌落,为营养缺陷型.
④鉴定营养缺陷型——生长谱法 将检出的缺陷型菌株接种在完全培养基上培养,把生长的菌体或孢子洗下,离心清洗后制成浓度为107个／ml～108个／ml的菌悬液.取0.1ml该悬液与基本培养基混匀倒皿,冷凝并稍干燥后,分区加沾有各种营养物的圆滤纸片,培养,观察生长反应.
在筛选营养缺陷型的过程中必须注意表型延迟现象.由于诱变剂一般仅作用于DNA的某一单链,故突变无法反映在当代的表型上,需经DNA复制和细胞分裂后,才使表型发生变异,此即表型延迟现象.
二.富集和分离抗生素敏感菌的营养缺陷型突变株的抗生素法 将抗生素加入原养型培养基（即培养基中缺少营养缺陷型所需的养分）中,能杀死生长中的野生型细胞,而不能生长的突变株得以幸免.
抗生素敏感菌营养缺陷型菌株的筛选过程①菌悬液诱变处理.②死的和活的野生型细胞及一些活的前突变细胞的混合液在C．M．中培养,使已发生营养缺陷突变的细胞的缺陷表型得以充分表现.若无这一阶段的培养,则许多细胞的基因型虽已改变,但表型仍和野生型一样,这些突变细胞在以后接触抗生素时也将被杀死.③在无氮培养液中培养,使营养缺陷型菌株细胞内所含养料尽量消耗,以便停止其生长繁殖.④在含抗生素的M．M．中培养,杀死能生长的野生型菌株.⑤检出缺陷型.⑥鉴定缺陷型.
三.营养缺陷型在科研和生产实践中的应用在科学研究中,营养缺陷型既可作为研究代谢途径和杂交、转化、转导、原生质体融合等遗传规律所必不可少的标记菌种,也可作为氨基酸、维生素或碱基等生物测定的试验菌种.在生产实践中,营养缺陷型可作为菌种杂交、重组育种和构建工程菌时所不可缺少的带有特定基因标记的亲本菌株,它们还常被用作生产核苷酸、氨基酸等代谢产物的生产菌株.由于营养缺陷型在代谢途径中某一步骤发生缺陷,致使终产物不能积累,从而遗传性地解除反馈抑制,使中间代谢产物或另一分支途径的末端产物得以积累.
例如,用高丝氨酸营养缺陷型作为赖氨酸的生产菌株,由于该突变株的遗传性,解除了赖氨酸与苏氨酸的协同反馈抑制,因此,在培养系统中限量补充苏氨酸,就可使天冬氨酸半醛全部向赖氨酸方向转化,赖氨酸产量大大提高.

一楼不懂的就不要瞎扯淡。

青霉素法算不上一个专有名词，就是一种筛选营养缺陷型菌株常用的方法。

就是在基本培养基中添加青霉素，野生型因为能够在基本培养基上生长所以代谢旺盛，能够被青霉素杀死。而缺陷型的因为不能生长，所处以休眠期，所以不会被青霉素杀死。

细菌对青霉素敏感的，但是，突变型的菌株能产生对青霉素的抗性！而题目中的菌株就是抗青霉素的菌株。
在培养基中加青霉素的方法筛选突变菌株的方法就是青霉素法。
提取的菌株是抗青霉素菌株。

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偃师市18355463276： 怎么“应用青霉素法筛选青霉敏感菌中的营养缺陷变异株?” - ？
淫吕阿莫： 一楼不懂的就不要瞎扯淡.青霉素法算不上一个专有名词,就是一种筛选营养缺陷型菌株常用的方法.就是在基本培养基中添加青霉素,野生型因为能够在基本培养基上生长所以代谢旺盛,能够被青霉素杀死.而缺陷型的因为不能生长,所处以休眠期,所以不会被青霉素杀死.

偃师市18355463276： 什么是筛选?简述自动筛选的步骤？
淫吕阿莫： EXCEL里的筛选吧 选取要筛选的行,然后点 筛选 按钮 就可以了

偃师市18355463276： 在抗青霉素菌株的筛选中应用什么培养基,培养条件如何?谢谢您的回答~~ - ？
淫吕阿莫： 什么培养基都可以啊,要看你筛选什么菌株啊,每种菌株有其特定的最适的培养基啊.培养条件亦如是.不过,需要在培养基中添加适量的青霉素倒是可以确定的.

偃师市18355463276： 青霉素法是细菌诱变育种中常用的筛选方法之一,其作法是将诱变后的菌 株培养在____培养基中,待__青霉素法是细菌诱变育种中常用的筛选方法之一,其... - ？
淫吕阿莫：[答案] LB培养基,菌斑,筛选作用,玻璃,诱变菌,野生菌

偃师市18355463276： 如果用牛肉膏蛋白胨培养基分离一种对青霉素具有抗性的细菌,你认为应如何做? - ？
淫吕阿莫： 分两次做培养基,平皿下面做一个不加青霉素的斜面培养基,上面再倒加了青霉素的,来培养筛选.还可以看到细菌对青霉素抗性的强弱

偃师市18355463276： 青霉素法是细菌诱变育种中常用的筛选方法之一,其作法是将诱变后的菌 株培养在____培养基中,待____长出后加入青霉素,青霉素的作用是____, - ？
淫吕阿莫：[答案] 完全琼脂培养基, 营养缺陷型菌落, 青霉素药理作用是干扰细菌细胞壁的合成.

偃师市18355463276： 用含有青霉素的培养基筛选具有抗药性突变突变菌株时应选择多大浓度的青霉素? - ？
淫吕阿莫： 在不知道合适浓度时,最好配置等差梯度浓度的青霉素溶液,培养后挑选能在浓度最高的青霉素中生存的菌株扩大培养.将获得的菌株继续按上述方法筛选,逐步扩大浓度,直至筛选出符合要求的菌株.

偃师市18355463276： 青霉素法是细菌诱变育种中常用的筛选方法之一,其作法是将诱变后的菌 株培养在 - ---培养基中 - ？
淫吕阿莫： 完全琼脂培养基, 营养缺陷型菌落, 青霉素药理作用是干扰细菌细胞壁的合成.

偃师市18355463276： 在基因工程中,用青霉素,四环素筛选的原理是什么? - ？
淫吕阿莫： 用于基因工程的质粒常含有抗生素抗性基因,例如:四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因.也就是说,有抗性基因的重组质粒被导入到受体细胞后,就可以在含有相应的四环素培养基中存活,而没有抗性基因的则不能存活,从而可以进行筛选.