用6孔板养细胞最初放下去的细胞浓度最好是多少?加多少培养液合适?成纤维细胞的话几天能长满?

作者&投稿:鱼桑 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
如何配制细胞培养液~





  培养液配制过程(以PRMI1640为例)


  2,滤器消毒



  3,体液配置











如果是贴壁生长的细胞, 一般可以直接把培养液吸掉, 再加入新的。 加的时候注意不要对着长细胞的那一面。
如果是悬浮型的, 就需要低速离心 (把所有的细胞和培养液转移到离心管里, 或有些离心机配有直接离心细胞培养皿的装置), 然后再吸掉上清液。 加入新的培养液使细胞重新悬浮。

个人经验,仅供参考。
用6孔板养细胞最初放下去的细胞浓度最好是每空7-10万,不能太少了。
一般每空加2ML培养液。
成纤维细胞接种8万每孔的话一般3-4天可以长满。


如何进行小鼠皮肤成纤维细胞的培养
1. 消化法:必须用胶原酶消化;2. 组织块法:用锐利刀剪,组织块不必剪得很小,米粒大小即可,放置在6孔板内,一孔内5-6个组织块,加入少量液体,以组织块不漂起为宜,第二、三天换等量液体。表皮不必去除,只要保证真皮面朝下即可,上皮细胞不可能在真皮细胞培养环境下生长。

六孔板一个孔多少细胞
在六孔板细胞的培养过程中,当细胞融合度达到80%至90%时,每个孔内的细胞数量大约在500,000到800,000个之间。在进行细胞传代时,通常采用1:6的比例,这意味着每孔中保留1份细胞,添加6份培养基,这样大约在三天后,孔板可以被填充满。为了加速细胞的生长,可以尝试使用1:3的比例进行传代,但需注意这...

用6孔板培养细胞后怎么做western blot,麻烦说明详细步骤,谢谢!_百度知...
去除培养基,加PBS清洗一或两遍,吸尽PBS尽量不留一滴,在冰上以每孔0.1ml加入裂解液,吹打使与细胞完全接触, 12000转\/min,离心5分钟,取上清液。-20 ℃贮存。然后测浓度、上样。

细胞培养板的选择和使用
2)悬浮型细胞的培养一般用V型。3)U型培养板亦多用于培养悬浮型细胞 。4)V型培养板有时用做免疫学血凝集的实验。细胞培养板孔数的选择 流式一般用 6 孔,MTT 一般用 96 孔,细胞爬片一般用 24 孔等,要具体根据你的实验来定。常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量 不同孔板所加培养液的...

6孔板铺多少细胞第二天可用
10万。6孔板保证有相当距离的平直划痕,有5条定位线,与划痕相交,这样就有10个可固定监测点,不作重复,误差也小。铺细胞最好使用6孔板,这样保证细胞在第二天能够长成所需要的形状和大小。

6孔板每个孔多少ml
六孔板的底面积为9.6cm_,每个孔加培养液的量一般为2.5ml。六孔板是一种细胞培养基,主要在细胞培养实验中,作为细胞培养的载体。六孔板的培养孔一般为圆柱形设置,垂直于盒体。细胞(英文名:cell)并没有统一的定义,比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物...

怎样才能使消化的细胞分散在六孔板中
1.如果可能,把“预加入一定体积的培养基”取部分或者全部,加入重悬的细胞内,在培养瓶中用枪头或者吸管吹打混匀,再加入六孔板内(个人感觉,六孔板内吹打细胞不便,而且效果不好);2. 细胞悬液加入六孔板的时候,要有意的分散加入,即每个部位都加入少许细胞悬液;3. 用枪头(最好用弯头吸管,...

6孔板每孔可以养80万细胞吗
可以。正常情况下,六孔板的每个孔长满可以有100万个细胞,所以每个孔可以养80万细胞。六孔板是一种用于细胞培育的六孔板,包括板体和培养盖,所述板体上设置有六个培养孔,所述培养盖套装在所述板体的顶部,相邻的两个所述培养孔的侧壁上均设置有隔离机构。

细胞六孔板铺板的时候,是用十字摇匀还是8字摇匀比较好?发现细胞总是集...
一般我是采用十字摇匀,还是不错的。但要注意以下两点:1. 打开培养箱之后,在培养箱门口摇匀后立即平着转到培养箱。2. 十字摇匀法每个方向摇匀后稍微停顿一下后再向另外一个方向摇。希望能帮到你!

6孔板每孔种多少细胞量
在6孔板中,每孔应种植1.2×10^6个细胞。在TCT(薄层细胞学检查)报告单中,“细胞量大于40”是一个专业术语,它表明在取样时所收集的细胞量超过了40%。这通常意味着样本的质量较好,符合检查标准。相反,如果细胞量小于40%,则可能表明样本质量不达标。建议每年进行一次TCT检查以及HPV(人乳头瘤病毒...

武鸣县13015718575: 用6孔板养细胞最初放下去的细胞浓度最好是多少?加多少培养液合适?成纤维细胞的话几天能长满? -
剧矩兰苏: 个人经验,仅供参考. 用6孔板养细胞最初放下去的细胞浓度最好是每空7-10万,不能太少了. 一般每空加2ML培养液. 成纤维细胞接种8万每孔的话一般3-4天可以长满.

武鸣县13015718575: 六孔板细胞铺满时细胞数大约是多少(六孔板,细 -
剧矩兰苏: 看浓度有多少,一般30-300个进行计数. HepG2细胞分泌多种血浆蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、铁传递蛋白等. 注释:该细胞表达3-羟基-3-甲基戊二酸辅酶A还原酶和肝甘油三酸脂脂肪酶.

武鸣县13015718575: 细胞实验新手,请问细胞种板时怎么计算细胞浓度和要加 -
剧矩兰苏: 直径3.5厘米皿2ml培养基 6厘米3ml 10厘米6ml 6孔板每个孔2ml,12孔板1ml,往后依次减半 细胞浓度一般要看你细胞的增殖能力,一般细胞系的话传代按照1传4的比例种板就可以了,传同一大小的皿,不同大小的按比例推算

武鸣县13015718575: 细胞培养用多少培养基一般培养瓶和培养皿以及六孔板等都需要加多少培养基? -
剧矩兰苏:[答案] 六孔板每个孔加2ml 25平方厘米的培养瓶加5ml 75的加15 175的加30 按这个比例你算一下培养皿的面积加培养基好了

武鸣县13015718575: 请问细胞培养到多大密度就可以接种到六孔板上了? -
剧矩兰苏: 生长速度非常快的癌细胞,48孔板长满即可接种到6孔板了,其他生长速度较慢的有限细胞系,则要24孔板或12孔板长满才能接种到6孔板.

武鸣县13015718575: 如何把六孔板细胞铺的均匀 -
剧矩兰苏: 6孔板,采用将第一个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔一次类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多,...

武鸣县13015718575: 6孔板养的细胞上清 抗体浓度一般在什么范围?是1 到10 微克每毫升吗?如题 -
剧矩兰苏:[答案] 这个需要用实验去验证用哪一个浓度进行实验效果更好,不同的抗体有不同有最好实验效果

武鸣县13015718575: 六孔板可以每孔加入不同的细胞?一共加五个孔? -
剧矩兰苏: 你要进行细胞计数的~~用胰酶消化好后,把细胞悬浮在1ml培养基里,吸取5微升至1ml离心管中,加入45微升提前配好的含有台盼蓝的pbs,吹打均匀,然后用20微升的枪吸10微升至细胞计数板,显微镜下计数,计数后乘以10,此时的细胞数是1ml细胞培养皿中.

武鸣县13015718575: 细胞培养用多少培养基一般培养瓶和培养皿以及六孔 -
剧矩兰苏: 细胞培养用多少培养基一般培养瓶和培养皿以及六孔 不同细胞可能长满细胞数是不同的,对于同一种细胞,你可以计数几次,以后就可以大致知道有多少.但是一般做实验种细胞的时候都会计数,虽然不是很准确,这是个精度的问题,但是它保证了基本每次的都在一个数量级,不至于相差太离谱.一般组织块原代培养时用培养瓶,长出的细胞传代后就可以依个人喜好而定了,用培养瓶或培养皿都可以,只要注意无菌操作都是没问题的.不过个人更偏向于用培养皿,操作更方便些.

武鸣县13015718575: 细胞培养时怎样调整细胞浓度? -
剧矩兰苏: 细胞计数呗.根据所计数量和培养液体积确定接种的数量.铺板或者是传代都有大致的细胞数量的范围,根据这个确定培养液用量就是了.

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