6孔板铺板步骤
细胞铺板有什么技巧吗?力求均匀
1、一般96孔板,每孔是加100微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部加入，加完半边板后，将未加的细胞悬液混一下再，继续加剩余的半边板子，都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针...
96孔板每个孔铺多少细胞
一、细胞数：96孔板每一孔250μl。通常每一孔不少于100μl，每毫升不少于100个细胞。所以每一孔≥26个细胞，具体放多少根据自己需求，有的是每一孔放一个细胞。二、培养版优点：96孔细胞培养板，适宜于细胞和培养中初期实验条件摸索和优化等实验。三、如何铺均匀：先用PBS洗，把培养基洗干净。用0...
96孔板铺板密度过大会导致什么问题
1、植板后，用手拿起96孔板，左右摇动，然后来回摇动几次，可以使细胞分布均匀。2、在96孔板的每个孔上，加入100微升的细胞悬浮液。把它从左边加到洞底。加入一半板材后，与未加入的细胞悬浮液混合，然后继续加入剩余的一半板材。3、盖上盖子后，用左手轻轻握住木板的左边，然后用右手轻拍木板的右边缘...
铺到6孔板的想要铺24孔板怎么办呢
进行替换。铺板24孔板是先在每个孔里面加1mL的培养基，晃动使之铺匀整个孔底，然后加入1mL的细胞悬液，铺到6孔板的想要铺24孔板可以进行全面替换。
胶原铺板方式
1、配制0.2％醋酸溶液，经高压蒸汽灭菌后备用。2、将鼠尾胶原蛋白加入配好的醋酸溶液，过滤除菌，放入-20度冰箱储存。3、按每平方厘米取2.5微克鼠尾胶原母液加入到6孔板中，使平皿含有5微克平方厘米的胶原，用无菌杆推杆将鼠尾胶原平铺在皿底，打开强风吹60分钟，待干燥，然后开紫外照射过夜（也可...
细胞六孔板铺板的时候,是用十字摇匀还是8字摇匀比较好?发现细胞总是集...
一般我是采用十字摇匀，还是不错的。但要注意以下两点：1. 打开培养箱之后，在培养箱门口摇匀后立即平着转到培养箱。2. 十字摇匀法每个方向摇匀后稍微停顿一下后再向另外一个方向摇。希望能帮到你！
六孔板加80微不能覆盖板底
铺板的均匀有两种，一种是孔间的均匀，一种是孔内的均匀。为了做到孔间的均匀，建议楼主采用多通道移液器有人叫排枪，配合相对应的加样槽。每孔逐一添加非常难以作到均匀。关于孔内的均匀我没有什么秘诀，经验是细胞悬液加入后不要晃动或敲打板，而是直接放入孵育箱让它自己贴壁。6孔板，采用将第一...
超详细细胞计数步骤
步入自动化：铺板计数 对于大批量的细胞处理，96孔板是一种高效的选择。每个孔的布局和计算过程精确到微米级，自动化计数仪能迅速处理大量的细胞样本，大大节省了时间和精力。每孔的细胞数乘以孔数，再乘以样品体积，就能得出总的细胞数量。细胞计数并非一项孤立的任务，它关乎实验的科学性和准确性。通过...
六孔板加1.5ml培养液会怎么样
会造成污染。所加培养液的液面不宜太深，一般在2-3mm范围，结合孔的底面积就可算出适宜加液量，若加液量过多会影响气体（氧气）交换，而且在搬动过程中易溢出造成污染。六孔板铺板在摇匀时千万不要只沿着一个方向做圆周运动，要十字交叉摇，即前后晃几下，左右晃几下，这样细胞才不至于集中在孔中央...
24孔板培养细胞的问题,很困扰,请高手指点!
博凌科为解答：吹细胞时注意不要把枪头打空，不要吸进空气，一般就不会有泡沫了，少量泡沫也不会影响很大。中间细胞多可能是由于你摇匀细胞时，板子是圆周运动的，这样细胞就会聚集到中间。最好用十字运动摇匀，注意用力均匀。
南宫市柴胡回答： 6孔板,采用将第一个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔一次类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多,...
艾仇13137204377问： 如何把细胞铺的更均匀 - ？
南宫市柴胡回答： 做细胞生物学实验,细胞铺板大概是最常见的一个实验了.但是有很多人不是很得要领,铺得不是均匀: 要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶.现分享我的实验技巧.一般 96 孔板我每孔是加 100 微升细胞悬液,从孔的左边靠近底部加入...
艾仇13137204377问： 细胞铺在96孔板或者6孔板的细胞不能生长是什么原因 - ？
南宫市柴胡回答： 6孔板相对还是挺容易把细胞铺匀的,弄不好的话细胞主要在边上. 所以,你加2ml混匀的细胞悬液,加在中间位置,让他自动往两边扩散,当然新板子有时候它扩散不了.你就稍微动一下就行.铺完板子后,要趁细胞没有沉底的时候,马上把板子拿起来然后慢慢倾斜,对称着倾斜,也就是你把一侧抬高,让培养液到板子另一侧,然后再反过来,最好四个方向都做一下,反复几次,然后看一下细胞如果比较均匀悬浮没有聚一堆,就把板子放平在培养箱中,基本就比较均匀了.
艾仇13137204377问： 六孔板细胞铺满时细胞数大约是多少(六孔板,细 - ？
南宫市柴胡回答： 看浓度有多少,一般30-300个进行计数. HepG2细胞分泌多种血浆蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、铁传递蛋白等. 注释:该细胞表达3-羟基-3-甲基戊二酸辅酶A还原酶和肝甘油三酸脂脂肪酶.
艾仇13137204377问： 细胞铺完板可以直接转染吗 - ？
南宫市柴胡回答： 悬浮细胞病毒转染铺6孔板要多少细胞 1、慢病毒转染前18-24小时,将贴壁细胞以1*10^5/孔铺到24孔板中.使细胞在慢病毒转染时的数量为2*10^5/孔左右. 2、第二天,用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬...
艾仇13137204377问： 原代肝细胞培养问题 - ？
南宫市柴胡回答： 原代肝细胞很容易贴壁生长,4小时肯定能贴壁. “然后就有浑浊的沉淀,那个沉淀是肝细胞吧?”将此沉淀用培养液或pbs稀释,加台盘蓝染色,显微镜下观察,若为活细胞,通常就是肝细胞了,要培养好,最好有大于85%以上的活性. 原代肝细胞最好生长在鼠尾胶原上,也就是用鼠尾胶原铺板,然后再普细胞. 4小时后换液,然后每20小时左右换液,通常原代肝细胞难以增值,但是维持20天左右没问题.
艾仇13137204377问： 96孔板铺板时如何保持均匀 - ？
南宫市柴胡回答： 楼主,铺板的均匀有两种,一种是孔间的均匀,一种是孔内的均匀. 为了做到孔间的均匀,建议楼主采用多通道移液器(有人叫排枪),配合相对应的加样槽.每孔逐一添加非常难以作到均匀. 关于孔内的均匀我没有什么秘诀,经验是细胞悬液加入后不要晃动或敲打板,而是直接放入孵育箱让它自己贴壁.
艾仇13137204377问： 如何将细胞从培养皿中转移到6孔板中?？
南宫市柴胡回答： 细胞重悬于新鲜培养基后,将细胞接种在盖玻片上,将盖玻片放于6孔培养板中,再加入培养液
艾仇13137204377问： 细胞铺板有什么技巧吗?力求均匀 - ？
南宫市柴胡回答： 细胞铺板重在均匀.细胞铺板时,要每孔分布的细胞数量一致,就是从瓶中吸取细胞悬液的时候,每次吸取都要混匀后吸取,尽量做到平均分配.其次,铺板后用手拍打板壁,动作轻柔些.
艾仇13137204377问： 六层板如何抄 - ？
南宫市柴胡回答： 首先建议外包.如果没办法外包的话,工艺的关键在于2层基板中间,半固化片上下的那2层.一般中间的半固化片只有0.2mm左右,很难从中间分开.建议如果有高性能X-ray机的话,首先,抄1、2、5、6层,然后磨掉大部分基材,切记不可破话内层,调整X-ray到合适的功率.曝光成像,能够得到颜色深浅不同的线,如上层线颜色浅一些,下层颜色深一些,通过颜色的不同区分是那一层的线.另一个办法笨一点了,但有时好用,就是必须拿两块板子破坏性抄.即,抄3层时,先把4层破坏.然后换块板子,破坏3层,抄4层.另外,似乎有人实现过直接成像和直接把板子分层的,我未曾亲眼见过,另外对设备要求也很高.
