高保真pcr酶
高保真酶概述
保真度的测度: 无论是通过直接测量错误率，还是通过调整PCR参数，保真酶的精准度都得以精准评估。并非所有DNA聚合酶都有3'到5'核酸外切酶的功能，但高保真PCR的核心就是选择那些低错误率的“精英”，它们确保每一次基因信息的复制都是毫厘不差的。在实际应用中，选择高保真酶需要考虑多重因素，比如扩增速...
PCR的高保真酶都有哪些啊
常见的高保真酶有Pfu，Pfu Ultra，但是我用过最好用的高保真酶是Phusion.因为一般的高保真酶因为有外切酶的活性，虽然提高了保真度，但是扩增效率会降低，所以用Pfu的时候，往往需要扩增时间要比Taq酶长，Pfu Ultra好一些。但是都难免会碰到Taq酶P有条带，换成高保真酶，直接P可能没有结果，或者是条带...
Taq是什么意思
Taq是一种酶，具有高稳定性和高保真性，是PCR反应中常用的热稳定DNA聚合酶的代表。PCR（聚合酶链反应）是一种分子生物学技术，可以快速地复制DNA分子，从而扩增DNA样本。Taq的高稳定性使得它能够在高温条件下活动，但同时也需要在PCR反应后使用DNA条带分析进行确认，以消除PCR扩增中的可能误差。Taq在分子...
如何提高PCR扩增的保真性
降低PCR扩增的错误率可以通过使用各种具有高保真性的DNA聚合酶来实现。DNA聚合酶的保真度用错误率来表示，包括碱基错配率、PCR产物突变百分数等。在目前已发现的所有耐高温DNA 聚合酶中，Pfu酶的出错率最低，保真度最高（见附表）。除对酶进行选择，研究者也可通过优化反应条件来进一步减少PCR突变率，包括...
什么叫高保真PCR,和普通PCR有何区别?谢谢啦!
高保真其实是指的所用的Taq酶的保真度，两者区别也就在与所用的Taq酶，保真度高P出来准确度就高，当然价钱就高。如果是平时在实验室的实验用普通的就可以了，没必要买高保真的。
pcr反应中常用的酶
pcr反应中常用的酶：Taq酶 Taq酶是从水生栖热菌 Thermus Aquaticus （ Taq ）中分离出的具有热稳定性的DNA聚合酶。一般常用的Taq酶可以分为rTaq酶和LTaq酶两类，LTaq酶的保真性更强，耐热性也比rTaq酶好。
pcr中dna聚合酶的常用腹肌有
TaKaRaTaqTM是一般的DNA 聚合酶，保真性较差，但价钱便宜，一般用于基因表达的检测等。TaKaRaEXTaqTM是具有 Proof reading活性的耐热性 DNA聚合酶，具有一定的保真性，而且其扩增得到的PCR产物 3’端附有一个 “A ”碱基，如果希望直接将产物克隆 到 T -vector可以用此酶。PyrobestTMDNA Polymerase 也是...
高保真酶的PCR结果
EX-TAQ很容易出现杂带的，这个酶本身的BUFFER是高离子浓度。你可以试试用EXTAQ酶扩出条带后，在琼脂糖胶上切下纯化在用高保真酶扩一下，扩出来就是有产物扩不出就是非特异扩增
高保真酶,PCR末端加A原理
我觉得，有可能是含有普通taq酶的。3‘-5’外切活性是产生高保真性的保证。35外切可以纠错，切除错配碱基保证pcr的高保证性。但是这样也使得一些引物也降解了，为了保证扩增效率，加一些普通taq酶是可以的！
请问PCR中高保真酶、T-easy载体分别是啥玩意儿啊?谢谢大家!
高保真酶就是3‘->5’的外切酶活性比较强，一旦出现错配，可以及时切除出错碱基并重继续扩增。T-easy载体，应该是做TA克隆使用的载体，线性双链DNA的3’末端多一个T，以便和普通Taq扩增的PCR片段（末端多个A）直接高效率连接
木垒蒙古自治州百咳回答：[答案] EX-TAQ很容易出现杂带的,这个酶本身的BUFFER是高离子浓度.你可以试试用EXTAQ酶扩出条带后,在琼脂糖胶上切下纯化在用高保真酶扩一下,扩出来就是有产物扩不出就是非特异扩增
勇童13432695601问： 请问PCR中高保真酶、T - easy载体分别是啥玩意儿啊?谢谢大家! - ？
木垒蒙古自治州百咳回答： 高保真酶就是3'->5'的外切酶活性比较强,一旦出现错配,可以及时切除出错碱基并重继续扩增.T-easy载体,应该是做TA克隆使用的载体,线性双链DNA的3'末端多一个T,以便和普通Taq扩增的PCR片段(末端多个A)直接高效率连接
勇童13432695601问： 利用高保真酶PCR产物长时间低温保存会裂解吗我用高保真酶进行PCR之后得到的产物,没有立即用TAQ酶加尾,而是放在4度保存了一段时间,再拿出来加... - ？
木垒蒙古自治州百咳回答：[答案] 这个和一段时间有关系,取决于你在4C放了多长时间.通常,4C短期内,不会导致DNA大量降解,但是如果时间太长,肯定会有变化.加尾以后可能会导致一些小的裂解片段也被连到载体转到宿主中. 如果实在不愿意再做一次,就把样品跑个电泳,切...
勇童13432695601问： kod plus高保真酶 怎么加A尾巴?谢谢回答! - ？
木垒蒙古自治州百咳回答： 方法一:直接加0.5ul Taq,70度,10min 即可,但是这种方法效率较低,但是简单,快速. 方法二:PCR产物,切胶回收,浓缩后加10*PCR buffer 1ul, dATP (2mM) 1ul, Taq 0.5ul, 加水至补充体积至10ul,70度 20-30min即可.
勇童13432695601问： 高保真酶,PCR末端加A原理 - ？
木垒蒙古自治州百咳回答： 我觉得,有可能是含有普通taq酶的. 3'-5'外切活性是产生高保真性的保证.35外切可以纠错,切除错配碱基保证pcr的高保证性.但是这样也使得一些引物也降解了,为了保证扩增效率,加一些普通taq酶是可以的!
勇童13432695601问： 高保真酶pcr基因片段时,不同錺cr出不同长度,是什么原因 - ？
木垒蒙古自治州百咳回答： 常见的高保真酶有Pfu,Pfu Ultra,但是我用过最好用的高保真酶是Phusion.因为一般的高保真酶因为有外切酶的活性,虽然提高了保真度,但是扩增效率会降低,所以用Pfu的时候,往往需要扩增时间要比Taq酶长,Pfu Ultra好一些.但是都难免会碰到Taq酶P有条带,换成高保真酶,直接P可能没有结果,或者是条带很弱.Phusion最牛,保真度可能大概有Taq酶的50来倍,而且太强劲了,基本没有P不出来过.
勇童13432695601问： 高保真酶PCR没有结果 - ？
木垒蒙古自治州百咳回答： 博凌科为-为你解答:我想问一下你扩的目的片段的大小及引物的长度.PFU具有3-5校正作用,可能会切割短片段引物,而且反应条件不适合也会没有结果的.
勇童13432695601问： PCR可以扩增质粒吗?为什么有了PCR还要用大肠杆菌摇质粒? - ？
木垒蒙古自治州百咳回答： PCR一般用来扩增双链的DNA,所以如果是双链的质粒就能用PCR扩增.不过PCR扩增有可能会产生突变.如果用高保真的酶扩增,突变概率比较小,但是很贵.此外,PCR会在双链DNA末端加碱基,作为质粒,PCR玩你还要去送测序.还不如用大肠杆菌扩增.
勇童13432695601问： 罗氏高保真的酶的PCR产物可以和T载体连接吗 - ？
木垒蒙古自治州百咳回答： 不可以,高保真酶产物一般都是平末端.纯化产物加taq酶,buffer和dNTP,72℃反应10~30分钟即可加尾,产物就可以直接与T载体连接了.
勇童13432695601问： 高保真KOD和PCR的应用有哪些不同 - ？
木垒蒙古自治州百咳回答： 另外,购买KOD,随酶还有dNTP和硫酸镁,无需另外购置试剂就可以直接开始使用,很方便.starseacow(站内联系TA)具体是否需要高保真酶要根据你的实验目的来决定,一般PCR常规酶即可,高保真只是用于扩增片段准确度要求比较高的...
