高保真酶和taq酶的区别
高保真酶pcr基因片段时,不同錺cr出不同长度,是什么原因
因为一般的高保真酶因为有外切酶的活性，虽然提高了保真度，但是扩增效率会降低，所以用Pfu的时候，往往需要扩增时间要比Taq酶长，Pfu Ultra好一些。但是都难免会碰到Taq酶P有条带，换成高保真酶，直接P可能没有结果，或者是条带很弱。Phusion最牛，保真度可能大概有Taq酶的50来倍，而且太强劲了，基本没...
Taq是什么意思?
Taq是一种酶，具有高稳定性和高保真性，是PCR反应中常用的热稳定DNA聚合酶的代表。PCR（聚合酶链反应）是一种分子生物学技术，可以快速地复制DNA分子，从而扩增DNA样本。Taq的高稳定性使得它能够在高温条件下活动，但同时也需要在PCR反应后使用DNA条带分析进行确认，以消除PCR扩增中的可能误差。Taq在分子...
什么叫高保真PCR,和普通PCR有何区别?谢谢啦!
高保真其实是指的所用的Taq酶的保真度，两者区别也就在与所用的Taq酶，保真度高P出来准确度就高，当然价钱就高。如果是平时在实验室的实验用普通的就可以了，没必要买高保真的。
重叠延伸PCR的酶一定要用高保真的Taq酶吗?普通的Taq酶可以吗
分别用引物F和Rm及Fm和R进行配对进行PCR。注意该步一定不要用Taq酶，因为Taq酶容易在PCR产物末端加A，从而可能会使产物移码突变。希望能帮到你！
Taq酶的介绍
Taq酶是从水生栖热菌 Thermus Aquaticus （ Taq ）中分离出的具有热稳定性的DNA聚合酶。一般常用的Taq酶可以分为rTaq酶和LTaq酶两类，LTaq酶的保真性更强，耐热性也比rTaq酶好。
TaqDNA聚合酶的校对活性
该酶无校对活性，易产生错配碱基。TaqDNA聚合酶的种类a，保真性的一个通用标准是错配率，错配率越低保真性越好。普通 Taq 酶的错配率在 10 -5 碱基 \/ 循环数，而高保真 Taq 酶错配率可降到 10 -6 数量级，大大降低了出错的可能性；它适合对 PCR 保真性要求较高的实验，如基因筛选、测序...
高保真酶,PCR末端加A原理
我觉得，有可能是含有普通taq酶的。3‘-5’外切活性是产生高保真性的保证。35外切可以纠错，切除错配碱基保证pcr的高保证性。但是这样也使得一些引物也降解了，为了保证扩增效率，加一些普通taq酶是可以的！
北京三博远志高保真taq酶-高保真taq酶
高温嗜热Pfu DNA聚合酶主要用于对保真度要求非常高的DNA扩增，这些扩增要求扩增的产物中不能出现突变等错误。Taq DNA聚合酶的扩增性能很强，但是用Taq扩增的PCR产物中有难以避免的随机突变。Pfu DNA聚合酶除了5′-3′的聚合特性外，还有3′-5′端外切酶活性，能够校正DNA扩增过程中的碱基错配。注意：影...
做PCR为什么用taq酶能扩出目的片段而用pfu时却扩不出来?
pfu的保真性比较高，如果你的目的片断比较长，保真性高的酶会造成延伸失败，保真性较低的酶能以单碱基错配为代价继续延伸。另外，建议检查保质期之类的小问题。
PCR中的taq酶有没有5'3'外切活性
一般的taq酶没有5‘-3’的外切活性，不过现在有一些酶，比如TAKARA的Ex-Taq是有5‘-3’的外切活性的，主要是为了减少错配提高保真率。再好的就是PrimerStar了。另外还有pfu酶，最近用的比较多，保真性介于Ex和PS之间，还是挺好用的，就是扩增效率没。
瑞丽市盆炎回答：[答案] 两者都是DNA聚合酶,区别在于,pfu是高保真DNA聚合酶,即DNA合成时碱基错配率比taq酶低,一般情况,不太长的片段或序列准确度要求不是很严格的用taq酶,对于长片段或序列准确度要求高的用pfu酶.在实际使用中,往往鉴于pfu酶...
菜罡18410593259问： DNA低严谨扩增和高严谨扩增的区别 - ？
瑞丽市盆炎回答： 分两方面说吧!一方面就是引物设计上的差别,高严谨扩增要求引物设计完全匹配,没有引物二聚体,没有发夹结构等等,而低严谨扩增可以稍微松点.另一方面,就是酶的区别,一个是高保真taq酶,一个是普通酶.
菜罡18410593259问： 菌落pcr用的rtaq是什么 - ？
瑞丽市盆炎回答：[答案] Taq酶就是PCR中要用的DNA聚合酶,rTaq酶就是指常用的重组表达Taq酶,价格便宜,但保真度低. 若是做菌落PCR鉴定,rTaq足够了,若是做后续的分子克隆,最好用高保真酶,以保没突变. 个人见解,仅供参考,祝愉快!
菜罡18410593259问： 现目前做PCR,哪个公司的DNA聚合酶较好 - ？
瑞丽市盆炎回答： 常见的高保真酶有Pfu,Pfu Ultra,但是我用过最好用的高保真酶是Phusion.因为一般的高保真酶因为有外切酶的活性,虽然提高了保真度,但是扩增效率会降低,所以用Pfu的时候,往往需要扩增时间要比Taq酶长,Pfu Ultra好一些.但是都难免会碰到Taq酶P有条带,换成高保真酶,直接P可能没有结果,或者是条带很弱.Phusion最牛,保真度可能大概有Taq酶的50来倍,而且太强劲了,基本没有P不出来过.
菜罡18410593259问： 重叠延伸PCR的酶一定要用高保真的Taq酶吗?普通的Taq酶可以吗 - ？
瑞丽市盆炎回答： 重叠延伸PCR技术由于采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸,将不同来源的扩增片段重叠拼接起来.重叠延伸PCR技术成功的关键是重叠互补引物的设计: 引物F及R为基因两端特异引物,其中Fm及Rm为中间引物.其中引物Fm及Rm中间共享一段序列. 分别用引物F和Rm及Fm和R进行配对进行PCR.注意该步一定不要用Taq酶,因为Taq酶容易在PCR产物末端加A,从而可能会使产物移码突变.希望能帮到你!
菜罡18410593259问： 基因定点突变使用taq聚合酶好还是pfu聚合酶好 - ？
瑞丽市盆炎回答： 般taq酶没5'-3'外切性现些酶比TAKARAEx-Taq5'-3'外切性主要减少错配提高保真率 再PrimerStar 另外pfu酶近用比较保真性介于ExPS间挺用扩增效率没
菜罡18410593259问： rTaq聚合酶与Taq聚合酶有什么区别 - ？
瑞丽市盆炎回答： rTaq聚合酶即重组Taq聚合酶,它比一般的Taq聚合酶多了一段基因片段,其作用也更强.
菜罡18410593259问： Taq DNA Polymerase 和rTaq酶有什么区别 - ？
瑞丽市盆炎回答： Taq DNA Polymerase 和rTaq酶有什么区别 第一代热启动Taq酶是一种DNA聚合酶. 第一代指的是直接从Taq(这是一种细菌)体内提取的天然聚合酶,没有进行化学修饰的,为了达到更好的聚合催化效果,往往需要经过酶工程处理,得到的聚合酶催化效率更高. 热启动是指这种酶的反应温度条件 Taq DNA polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后,再经过柱纯化分离出来的一个约94 KD的重组蛋白.无外源核酸酶和细菌DNA污染,稳定性好,特异性强,适用于常规PCR扩增.
菜罡18410593259问： 二代测序16s 能用普通酶扩增吗 - ？
瑞丽市盆炎回答： 二代测序16s 不能用普通酶扩增 16s测序主要为了鉴定菌种,通常在做鉴定的时候区分标准是97%,区分亚种和菌株的时候相似度更高. 普通TAQ酶的复制错误率较高,可能在扩增过程中引入错误,这些错配可能导致相似度下降从而分类错误.
菜罡18410593259问： 请问PCR中高保真酶、T - easy载体分别是啥玩意儿啊?谢谢大家! - ？
瑞丽市盆炎回答： 高保真酶就是3'->5'的外切酶活性比较强,一旦出现错配,可以及时切除出错碱基并重继续扩增.T-easy载体,应该是做TA克隆使用的载体,线性双链DNA的3'末端多一个T,以便和普通Taq扩增的PCR片段(末端多个A)直接高效率连接
