细胞在trizol里面保存多久
细胞加入trizol后在4度可以放多久
样品匀浆步骤:匀浆后(加入氯仿前),样品可在–70°C保存至少1年。匀浆后样品在加入氯仿前,可在室温保存数小时。样品匀浆步骤:如果样品已在TRIzol试剂中有效裂解且试剂已使核酸酶失活,RNA可在室温下安全保存3-4天。RNA沉淀步骤:异丙醇中的RNA可在4°C保存过夜。在这种低温条件下延长保存时间不会...
干货分享丨一文详解Trizol法提取RNA
Trizol试剂能够直接从细胞或组织中提取总RNA,并在此过程中保持RNA的完整性。通过加入氯仿后离心,样品被分为水样层和有机层,其中RNA存在于水样层中。提取的水样层中RNA可以通过异丙醇沉淀进行还原,而除去水样层后的样品中DNA和蛋白也能以沉淀形式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙...
TRIZOL基本特点
TRIZOL试剂是一种高效且广泛应用的总RNA提取工具,适用于各种生物样本,包括人、动物、植物和细菌。无论组织大小,从50-100毫克的微小样本到1克以上的大量组织,甚至细胞数量在5×106至107的范围,TRIZOL都能提供出色的分离效果。其操作简便,能够在一小时内处理多个样品,极大地节省了时间。TRIZOL提取的总...
TRIZOL主要成分
TRIzol是一种常用的RNA提取试剂,其核心成分是苯酚。苯酚在TRIzol中的主要功能是促使细胞裂解,促使细胞内的蛋白质和核酸分解,从而释放出RNA。尽管苯酚能有效地变性蛋白质,但它对RNA酶活性的抑制作用并不完全,因此TRIzol配方中还包含了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍和β-巯基乙醇等辅助成分。8-羟基喹啉作为...
TRIzol的作用机理是什么?
TRIzol有毒性,trizol中含有苯酚,苯酚是刺激性气味。对呼吸道有伤害,闻久了会有晕的感觉。1、TRIZOL的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。2、苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制RNA酶活性,因此TRIzol中还加入了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍、β-巯...
用于提取DNA的细胞如何保存?
细胞直接加入1 ml Trizol,然后负80冻存,提取时再放提取台中室温化解。进行后续提取操作
细胞加了trizol过夜可以吗
可以放负二十℃
在原有总RNA基础上,如何提高总RNA的量
当Trizol量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。另外,在Trizol的使用说明中的注意事项提及,如果细胞量太少(100~10000个细胞),可加入800 ul的Trizol,后续裂解、加氯仿按常规操作。在用异丙醇沉淀RNA前加入5-10 ug无RNA酶的糖原作为水相的载体。其会保留在水相,与RNA共沉淀,且不影响后续的逆转录...
请教用TRIZOL提取RNA
RNA的提取(仅供参考)准备试剂:氯仿,异丙醇,75℅乙醇,无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制)操作步骤:匀浆处理:a. 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。b. 单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol...
基因芯片细胞样品送检前是否应该加trizol液
这样做降解的可能很大。你可以自己提取RNA,干冰运送。如果是细胞,建议保存在RNALATER溶液,室温下可以保存寄送。
洛扎县协新回答: 没记错的话trizol说明书说加完trizol裂解的细胞匀浆可在室温放置数小时. 如果冷冻在-80摄氏度则我觉得几个月也没任何问题.
郯灵18835967849问: 用于提RNA的植物叶片可以放 - 70度保存吗,一般可以放多长时间呢 - ?
洛扎县协新回答: 还是加了RNA提取试剂放-70比较好.至少动物细胞加trizol后,可以在-70放1个月以上
郯灵18835967849问: 我想问做PCR扩增应该注意的事项? - ?
洛扎县协新回答:[答案] 注意] 1、整个操作要带口罩及一次性手套,并尽可能在低温下操作. 另外,提取上清这步一定要小心,靠近沉淀的部分一定要舍得不要,要不然会有蛋白质污染,影响比值 2、加氯仿前的匀浆液可在-70℃保存一个月以上,RNA沉淀在70%乙醇中可在...
郯灵18835967849问: 动物RNA的提取 - ?
洛扎县协新回答: RNA的提取 一、准备试剂: 氯仿,异丙醇,75℅乙醇,无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制). 二、操作步骤: 1. 匀浆处理: a. 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理....
郯灵18835967849问: 为什么trizol提不出来rna - ?
洛扎县协新回答: trizol提不出来rna的原因有可能是以下原因: 1)你的Trizol试剂核有无问题? 2)研究材料是否新鲜,RNA容易降解,应妇80度保存. 3)如果都没问题,你的操作有无问题? trizol提取rna的步骤:(仅供参考) 用户需自备的试剂和材料 无水乙...
郯灵18835967849问: 如何从冻存的细胞提取RNA十万火 - ?
洛扎县协新回答: 1). 将冻存管从液氮或冰箱中取出; 2). 不待细胞溶解,将Trizol500ul-1ml直接放入冻存管中,此时Trizol会冻成冰状; 3). 将冻存管缓慢融化,并用加样器吹打混匀; 4). 将细胞裂解液移至Eppendorf管中,16000′g离心1min,吸出管底絮状...
郯灵18835967849问: 如何收集用于western blot等的细胞?
洛扎县协新回答: 博凌科为解答:1、1 ml的PBS可能溶不了那么多细胞(如果你细胞多的话),所以建议用3 mlPBS,分两管装,离完心后用Trizol溶解合成一管2、离心的速度太大了,细胞会死的,建议800 转,5 分钟,一般的细胞都可以离下来3、需要去上清,如果是提RNA就用Trizol溶解合成一管,然后放在-80度冰箱,如果提蛋白就直接将离心后的细胞放在-80度冰箱.上清对于 提蛋白和RNA没什么影响.还有一点,提RNA的东西一定要高压,如果是初次做可以用DEPC水泡枪头,可以提高作成功的几率.如果操作严格,可以只把要 用的枪头和EP管高压即可.其他的没什么特别的,流程跟你写的是一样的.
郯灵18835967849问: Trizol法提取流感病毒 RNA - ?
洛扎县协新回答: 1、取200ul样品数+阴性对照+阳性对照加入1.5ml灭菌eppendorf管;2、加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀;3、13000rpm离心15min;4、在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul于-20℃...
郯灵18835967849问: 想请教用过Trizol法提取RNA,且结果比较理想的详细步骤及注意事项,是否可以共享一下,谢谢 - ?
洛扎县协新回答: 我这边刚好在做,给你说下: 贴壁细胞的话去培养液,PBS洗一遍,加Trizol吹打下来.组织的话,在液氮里面捣碎,然后粉末放进Trizol,用超声粉碎器粉碎(超声每3秒,停10秒冷却,直到看不见组织碎末). (此步骤可以-80oC冻存,下面...
郯灵18835967849问: TRIzol有无毒性,经呼吸道吸入有何影响? - ?
洛扎县协新回答: TRIzol有毒性,trizol中含有苯酚,苯酚是刺激性气味.对呼吸道有伤害,闻久了会有晕的感觉. 1、TRIZOL的主要成分是苯酚.苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放. 2、苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完...