流式测细胞周期
流式细胞术检测细胞周期和凋亡
细胞周期检测：细胞周期是指从上一次细胞分裂结束到下一次分裂结束的过程，主要由G0\/G1期、S期、G2期和M期组成。在G0\/G1期，细胞分裂成两个细胞，或进入静止期（G0期）。G0期与G1期在DNA含量上无法区分，细胞开始合成RNA和蛋白质，但DNA含量仍保持二倍体。S期，DNA开始合成，细胞核内DNA含量介于G...
流式细胞术测细胞周期S期增多是什么意思
细胞周期分为G1，也就是一般的细胞静止期，细胞要分裂，就要复制DNA，复制好一倍的DNA后，正要分列前，含有2倍的DNA，叫做G2期。而在G1和G2之间，是DNA合成的时间，叫做S期，S是英语synthesize（合成）第一个字母的大写。这个期增多，表示细胞分裂活跃。
细胞周期检测方法即PI法的操作步骤
3. 细胞染色：1500rpm离心5min，弃上清，以3mL的PBS洗涤一次，加入400uL溴化乙锭（PI，50ug\/mL），100ul RNase A（100ug\/mL ），4℃避光孵育30min。4. 流式分析： 以标准程序用流式细胞仪检测，一般计数2~3万个细胞，结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。细胞周期是指能持续分裂的真核细胞从一次...
在流式细胞检测细胞周期里,为什么处于S期和G2期的细胞多,就能说明细 ...
所谓细胞周期，就是指一个细胞从不分裂的状态（G1）期，先开始复制合成新的DNA（S期），合成完成后，每个细胞都有了2份DNA，准备分裂（G2）。分裂完成后，新的细胞就是G1，如果是很快分裂的细胞。那这些新产生的G1期的细胞不会一直停留的G1，马上就会再次进入S期，启动下一个细胞周期。所以，不...
测细胞周期做流式前期一定要酒精固定吗
测细胞周期就可以用PI单独染色，也可以用PI加上BrdU\/EdU。不论何种方法，都需要固定细胞。使用BrdU还要做细胞膜和核膜的通透，以利于抗体的进入。一般常见的，只用PI染色的方法，都是使用酒精固定。优点是快速。而BrdU的方法则可以使用多聚福尔马林。
新手流式细胞周期flowjo分析求助
如果是PI单色流式分析细胞周期，应该如下几个步骤：第一，在FSC-A\/SSC-A散点图上划出细胞门，排除细胞碎片和大的团块。第二，把第一步得到的细胞群在SSC-W\/SSC-H散点图上划出单细胞门，特点是SSC-W比较窄。第三，把第二步得到的单细胞在FSC-W\/FSC-H散点图划出更进一步的单细胞门。第四，...
测细胞周期sub-g1流式怎么设置
就像下图左侧A里一样 然后就是设置单细胞gate，只显示细胞gate的情况下，再设置单细胞gate 这样就把聚集在一起的细胞排除在外。3. 才是设置sub-G1的gate 在现实细胞周期柱状图的形态下，如下图，G1前面的都酸是sub-G1, 柱状图里面只显示单细胞gate里面的细胞 ...
流式细胞术测细胞周期一般需要多少细胞
一般实验，检测需要记录10000个细胞。根据仪器的不同，死腔的体积也不一样，所以体积的要求不一样。理想状态下，样本浓度最好是每毫升一百万。另外，还需要一个样本管来设置机器（如果是单色），双色的话需要单色对照。这些对照管的细胞数要求很多。真正用来记录的样本只要比实际记录再加上死腔体积多一点...
流式检测细胞周期都有哪些染色方法
第二类另外加了一个步骤，在细胞培养液中加入核苷酸的模拟物，比如BrdU或者EdU。细胞新合成的DNA上就会有这些物质。在不同时间点收集细胞，用DNA染料染DNA的同时，还以用抗体或者化学发光法染核苷酸模拟物也发荧光。这个方法的有点就是不仅可以像第一类方法一样，看到处于细胞周期各个期的百分率，另外还...
流式检测细胞周期要检测3次,每次3个样吗
进行统计分析。比如你测细胞周期，做了一次实验。每组都用了三个培养盘。然后每个盘的细胞都测了三次，这样就有了9个数据，这个只能取平均值算一个数据。测到的误差是你实验（比如加样）的误差，而不是实验间的误差。所以只有把实验重头做至少三遍（从细胞培养开始），才可以。
西工区辛疏回答：[答案] 根据你所购买的试剂盒而定,一般是先用70%乙醇先固定,然后加RNA酶和PI,半个小时左右上机检测就可以了.需要注意的就是加酒精固定的时候要用四度预冷的酒精,缓慢的加,边加边晃动细胞,避免细胞黏连在一起.
褒聪18958536717问： 流式检测细胞周期都有哪些染色方法 - ？
西工区辛疏回答： 从分类上来说,一般有两类:第一类是只染DNA.这类方法比较简单,用酒精固定细胞后,直接加含有RNA酶的荧光染料,比如PI等,然后就可以直接上机. 第二类另外加了一个步骤,在细胞培养液中加入核苷酸的模拟物,比如BrdU或者EdU.细胞新合成的DNA上就会有这些物质.在不同时间点收集细胞,用DNA染料染DNA的同时,还以用抗体或者化学发光法染核苷酸模拟物也发荧光.这个方法的有点就是不仅可以像第一类方法一样,看到处于细胞周期各个期的百分率,另外还可以看到有多少DNA是新合成的.是一个动态的过程.
褒聪18958536717问： 流式细胞仪测定细胞周期各时相的原理和基本步骤(不用说具体使用的量) - ？
西工区辛疏回答： 在细胞培养液中加入模拟核苷酸EdU (比较老的方法也可以用BrdU).培养一小时 后,更换为正常的培养液继续培养.模拟核苷酸可以像天然核苷酸一样被细胞摄取并整合入新合成的DNA.培养一段时间后(一般小于一个细胞周期),固定细...
褒聪18958536717问： 流式细胞术(FCM)可用于测定细胞周期各时期细胞的百分比.其主要原理是应用能与DNA结合的荧光探针,通过测定细胞群体中每个细胞的DNA含量,得... - ？
西工区辛疏回答：[答案] (1)G1→S→G2→M (2)胰蛋白酶 (3)2c~4c 4c 2c (4)1.53 (5)图“略”(细胞形态、纺锤体,染色体、基因需标注正确)
褒聪18958536717问： 请问怎样利用流式细胞仪分析细胞存活率、细胞周期和ROS?希望前辈们帮忙, - ？
西工区辛疏回答：[答案] 1 测定细胞存活率 1.1取对数生长期的细胞,均以4*10 5 /mL 密度接种于6孔细胞培养板上;1.2培养过夜后,用相应药物处理细胞;1.3 消化收集细胞,包括培养液中悬浮的死细胞;1.4 300g离心5 min,去上清;1.5 加1mL PBS缓冲液重悬细胞,再...
褒聪18958536717问： 流式测细胞周期透膜液TritonX - 100怎么使用 - ？
西工区辛疏回答： 如果是单用PI染色,细胞直接用酒精加RNA酶固定作用半小时就可以了.如果还要染其他核蛋白,根据细胞的情况,0.1-1%TritonX-100 PBS 作用15分钟后洗干净.
褒聪18958536717问： 测细胞周期做流式前期一定要酒精固定吗 - ？
西工区辛疏回答： 测细胞周期就可以用PI单独染色,也可以用PI加上BrdU/EdU.不论何种方法,都需要固定细胞.使用BrdU还要做细胞膜和核膜的通透,以利于抗体的进入.一般常见的,只用PI染色的方法,都是使用酒精固定.优点是快速.而BrdU的方法则可以使用多聚福尔马林.
褒聪18958536717问： 怎样利用流式细胞仪分析细胞存活率、细胞周期和ROS?？
西工区辛疏回答： 1 测定细胞存活率1.1取对数生长期的细胞,均以4*105/mL 密度接种于6孔细胞培养板上;1.2培养过夜后,用相应药物处理细胞;1.3 消化收集细胞,包括培养液中悬浮的死细胞;1.4 300g离心5 min,去上清;1.5 加1mL PBS缓冲液重悬细胞,...
褒聪18958536717问： 请教流式细胞术PI染色进行细胞周期分析的原理 - ？
西工区辛疏回答： 博凌科为解答:PI ,即碘化丙锭,可以与细胞内DNA 和RNA 结 合,采用RNA 抑制剂将RNA 消化后,通过流式细胞术检测 到的与DNA 结合的PI 的荧光强度直接反映了细胞内DNA 含量的多少.由于细胞周期各时相的DNA 含量不同,通常 正常...
褒聪18958536717问： 流式细胞仪测细胞周期图怎样分析 - ？
西工区辛疏回答：[答案] (1)细胞培养取对数生长期的细胞,按1X106个/mL以1mL体积接种于6孔板内.培养24h后,加入不同浓度样品.在37 ℃、5 % 的CO2恒温箱中培养24h后终止.(2)细胞固定胰酶消化并离心收集细胞(800rpm/min),弃上清,用...
